目的 基于重组酶聚合酶扩增（RPA）技术和簇状规则间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a（CRISPR/Cas12a）技术，建立日本血吸虫特异性核酸片段的快速可视化检测方法，并初步评价其应用价值。 方法 以SjCHGCS20（GenBank：FN356222.1）为靶标序列，设计RPA引物、单链DNA（ssDNA）报告探针和CRISPR RNA（crRNA）序列，优化RPA反应体系中T4重组酶Y、T4重组酶X、T4单链结合蛋白和肌酸激酶的浓度以及RPA反应的温度和时间。建立RPA-CRISPR/Cas12a一管式方法：将优化的RPA反应体系、矿物油和Cas12a切割反应体系放入反应管中，采用优化的反应条件进行RPA扩增后，混合RPA反应产物和Cas12a切割反应体系，Cas12a切割反应后在蓝光割胶仪照射下观察结果，能观察到明亮的绿色荧光则反应产物呈阳性。以100、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5和10-6 ng的日本血吸虫成虫基因组DNA为模板进行RPA-CRISPR/Cas12a检测，评价该方法的敏感性；以1 ng日本血吸虫、曼氏血吸虫、卫氏并殖吸虫、华支睾吸虫的基因组DNA为模板进行RPA-CRISPR/Cas12a检测，评价该方法的特异性。取日本血吸虫DNA终浓度为0.2、2、20、200 ng/ml的模拟阳性血清和感染日本血吸虫后第3、7、14、21、28、35和42天小鼠的血清，提取DNA后进行RPA-CRISPR/Cas12a检测，评价该方法的检测效果。 结果 优化的RPA反应体系中，T4重组酶Y、T4重组酶X、T4单链结合蛋白和肌酸激酶的终浓度分别为50、440、200和120 ng/μl；优化的RPA反应条件为40 ℃ 30 min。建立的RPA-CRISPR/Cas12a方法敏感性评价结果显示，当日本血吸虫成虫基因组DNA含量≥ 10-5 ng时反应产物呈阳性；特异性评价结果显示，仅以日本血吸虫成虫基因组DNA为模板的反应产物呈阳性，以曼氏血吸虫、卫氏并殖吸虫、华支睾吸虫基因组DNA为模板的反应产物均呈阴性。日本血吸虫DNA终浓度为2、20、200 ng/ml的模拟阳性血清反应产物呈阳性，终浓度为0.2 ng/ml的模拟阳性血清反应产物呈弱阳性。血吸虫感染后第28和42天的小鼠血清反应产物呈阳性、第35天的呈弱阳性。 结论 本研究建立了检测SjCHGCS20序列的RPA-CRISPR/Cas12a一管式方法，最低检出限为10-5 ng DNA，且与卫氏并殖吸虫、华支睾吸虫、曼氏血吸虫等基因组DNA均无交叉反应，操作简单、反应迅速、特异性高、可借助蓝光激发裸眼观察结果，具有较好的现场检测潜力。
收集监测报告管理系统中2024年全国31个省（自治区、直辖市，未包括台湾、香港和澳门地区）和新疆生产建设兵团疟疾流行病学个案调查表，对疟疾疫情特征进行统计分析。2024年全国报告疟疾病例3 157例，较2023年（2 488例）增加了26.9%；其中境外输入性病例3 155例，输血感染病例2例；恶性疟2 008例（占63.6%，2 008/3 157），间日疟798例（占25.3%，798/3 157），卵形疟274例（占8.7%，274/3 157），三日疟65例（占2.1%，65/3 157），混合感染12例（占0.4%，12/3 157）。男女性别比为12.4∶1；30~39岁年龄组的病例最多（占28.3%，895/3 157）；以出境务工为主（占69.2%，2 183/3 155）。除西藏自治区和新疆生产建设兵团外，其余30个省份均有疟疾病例报告，病例数位居前5位的省份依次为云南（564例）、广东（246例）、河南（241例）、山东（232例）和四川（220例），累计报告1 503例（占47.6%，1 503/3 157）。全国报告疟疾危重症病例112例（占3.5%，112/3 157），死亡病例15例（占0.5%，15/3 157）。我国已经连续8年无本土原发蚊传疟疾病例报告，但境外输入性疟疾带来的风险持续存在，须提高监测系统敏感性，及时发现、救治病例，减少恶性疟发展为危重症甚至死亡，避免间日疟引起继发传播。
目的 探讨去氢骆驼蓬碱联合rad51抑制剂（RI-1）对细粒棘球蚴体外作用及DNA损伤水平的影响。 方法 从绵羊肝脏的棘球蚴包囊中收集细粒棘球蚴，随机分组，各组分别用去氢骆驼蓬碱（0、20、30、40、50、100 μg/ml）与RI-1（0、5、10、20、40、80 μg/ml）培养5 d，0.1%亚甲基蓝染色计算存活率，选择接近去氢骆驼蓬碱抗细粒棘球蚴半抑制浓度组别的浓度为固定浓度，分别以去氢骆驼蓬碱与RI-1比例分别为40∶5、40∶10、40∶20的混合药物干预细粒棘球蚴，筛选最佳协同比例。设置去氢骆驼蓬碱和RI-1混合药物组，同浓度单独作用的去氢骆驼蓬碱组和RI-1组，并设置阳性对照组（添加阿苯达唑亚砜）与空白对照组，观察干预3 d后细粒棘球蚴与囊泡形态。DCFH-DA法检测各组干预后细粒棘球蚴活性氧含量；各组进行彗星实验（阳性对照为阿霉素），分析并测定Olive尾矩；试剂盒检测药物干预后细粒棘球蚴氧化应激水平及Caspase-3含量，以及三磷酸腺苷（ATP）和乳酸脱氢酶（LDH）含量；qRT-PCR反应检测DNA损伤修复相关基因的mRNA相对表达水平。 结果 0、20、30、40、50、100 μg/ml的去氢骆驼蓬碱干预5 d后细粒棘球蚴存活率分别为（94.67 ± 1.25）%、（83.00 ± 3.27）%、（64.67 ± 3.86）%、（55.33 ± 3.40）%、（29.67 ± 2.49）%、（9.33 ± 1.70）%，0、5、10、20、40、80 μg/ml的RI-1干预5 d后细粒棘球蚴存活率分别为（94.33 ± 0.94）%、（70.00 ± 2.94）%、（55.67 ± 3.86）%、（30.00 ± 5.09）%、（2.67 ± 1.25）%、0。以40 μg/ml∶10 μg/ml作为混合药物最佳协同比例干预细粒棘球蚴3 d后，混合药物组存活率为（48.67 ± 2.62）%，与空白对照组[（96.33 ± 1.25）%]、阳性对照组[（91.67 ± 1.25）%]、去氢骆驼蓬碱组[（72.67 ± 4.50）%]相比均下降（F = 78.85，P < 0.01；F = 437.92, P < 0.05；F = 42.49，P < 0.01）。混合药物组虫体结构塌陷，形态破坏严重，虫体显著缩小且表皮层呈现虫蚀样改变。混合药物组活性氧平均荧光强度（45.71 ± 1.52）与空白对照组（3.40 ± 0.55）、阳性对照组（12.98 ± 0.67）、去氢骆驼蓬碱组（39.79 ± 1.11）相比均增强（F = 339.795、773.96、76.99，均P < 0.01）。混合药物组Olive尾矩值（17.73 ± 1.11）高于空白对照组（0.03 ± 0.02）、阳性对照组（6.46 ± 0.56）和去氢骆驼蓬碱组（8.80 ± 0.61）（F = 230.32、165.59、151.44，均P < 0.01）。混合药物组总超氧化物歧化酶（SOD）含量为（0.71 ± 0.07）U/mg，与空白对照组[（2.32 ± 0.24）U/mg]、去氢骆驼蓬碱组[（1.26 ± 0.12）U/mg]相比均降低（F = 39.57、 15.74，均P < 0.01）；混合药物组丙二醛（MDA）含量为（0.62 ± 0.03）mmol/mg，与空白对照组[（0.82 ± 0.05）mmol/mg]、去氢骆驼蓬碱组[（0.70 ± 0.03）mmol/mg]相比均降低（F = 22.78、28.37，P < 0.01）；混合药物组Caspase-3水平为（1.82 ± 0.05）U/mg，与空白对照组[（0.70 ± 0.02）U/mg]、去氢骆驼蓬碱组为[（1.36 ± 0.19）U/mg]相比均升高（F = 26.24，P < 0.01；F = 7.52，P < 0.05）。混合药物组细粒棘球蚴线粒体ATP水平为（112.21 ± 2.72）µmol/ml，与空白对照组[（157.50 ± 5.23）µmol/ml]、去氢骆驼蓬碱组[（123.10 ± 4.73）µmol/ml]相比均降低（F = 60.73，P < 0.01；F = 67.42，P < 0.05）。混合药物组细粒棘球蚴LDH释放量为（1.83 ± 0.09）mU，与空白对照组[（0.70 ± 0.05）mU]相比升高（F = 146.79，P < 0.01），与去氢骆驼蓬碱组[（1.51 ± 0.05）mU]相比差异无统计学意义（F = 62.78，P > 0.05）。混合药物组细粒棘球蚴h2ax、rad51、brca1、mre11基因相对表达水平分别为2.34 ± 0.15、1.19 ± 0.14、1.35 ± 0.08、1.43 ± 0.10，与空白对照组（均为1.00 ± 0.00）相比均上调（F = 23.79，P < 0.01；F = 8.96，P < 0.05；F = 30.75，P < 0.05；F = 39.81，P < 0.01）。 结论 去氢骆驼蓬碱联合rad51抑制剂RI-1可增强去氢骆驼蓬碱体外抗细粒棘球蚴的作用，同时增强细粒棘球蚴DNA损伤。
白蛉作为多种病原体的传播媒介具有重要的流行病学意义。白蛉肠道内定植着大量的微生物群落，对白蛉及其携带病原体的繁殖和生长发育有着重要影响。本文综述了白蛉携带病原体的种类和肠道微生物的组成，并揭示了白蛉-病原体-肠道微生物之间的相互关系。肠道微生物不仅能直接抑制病原体的感染和传播，也可通过参与白蛉的免疫应答和防御机制，间接改变其感染和传播病原体的能力。
目的 建立基于规律间隔成簇短回文重复序列关联蛋白12a（CRISPR/Cas12a）系统的蚊种属及其携带病原体的快速检测方法，以提升虫媒传染病监测与防控效率。方法 分别取30只1日龄白纹伊蚊幼虫和10只1日龄斯氏按蚊成蚊，提取基因组DNA，重组酶聚合酶扩增（RPA）扩增蚊种特异性序列，以白纹伊蚊DNA为模板，利用斯氏按蚊RPA引物进行扩增，评价RPA扩增的特异性。采用CRISPR/Cas12a系统进行荧光检测，并以斯氏按蚊和白纹伊蚊的CRISPR RNA（crRNA）进行交叉检测，评价该系统的特异性。约氏疟原虫复苏后，取1 × 106个约氏疟原虫通过尾静脉感染小鼠3只，感染后第3天，供100只斯氏按蚊血餐后，取第1、2、3、4、5、10天的蚊中肠，显微镜下观察中肠上的疟原虫卵囊；分别取感染疟原虫后第1、2、3、4、5、10天的斯氏按蚊10只，提取疟原虫基因组DNA，RPA扩增疟原虫18S rRNA片段，并进行CRISPR/Cas12a荧光检测，以10-9、10-10、10-11、10-12、10-13、10-14、10-15、10-16、10-17、10-18 mol/L的疟原虫DNA为模板进行CRISPR/Cas12a检测，评价该法的最低检出限。合成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型登革病毒种特异性序列，并装载于质粒pUC18。RPA扩增非结构蛋白5后，进行CRISPR/Cas12a荧光检测，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型登革病毒crRNA分别与其他登革病毒质粒模板混合后检测，以评价该方法的特异性。以10-9、10-10、10-11、10-12、10-13、10-14、10-15、10-16、10-17、10-18、10-19 mol/L的质粒为模板，评价该方法的最低检出限。采用Cas12专用核酸检测试纸条可视化检测斯氏按蚊、白纹伊蚊、疟原虫和登革病毒。结果 RPA扩增斯氏按蚊细胞色素c氧化酶亚基1基因片段长89 bp，白纹伊蚊87 bp。CRISPR/Cas12a检测结果表明，白纹伊蚊和斯氏按蚊的基因片段均可激活毛螺菌Cas12a的DNA剪切酶活性，反应5 min后即可产生明显的荧光信号，斯氏按蚊成蚊激发的荧光信号最强，13 min达检测平衡。RPA扩增约氏疟原虫18S rRNA片段长142 bp。CRISPR/Cas12a检测结果表明，斯氏按蚊感染约氏疟原虫第1、2、3、4、5、10天后，均可从蚊体内检测出疟原虫，最低检出限为3.3 × 10-17 mol/L。斯氏按蚊血餐后，第1~4天均未观察到卵囊，第5天可观察到2个卵囊，第10天卵囊的数量和体积均增加。RPA扩增Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ登革病毒非结构蛋白5基因片段长度分别为109、93、147和170 bp。CRISPR/Cas12a检测结果表明，均可从样品中检测到登革病毒序列，5 min即可产生明显荧光信号，最快17 min达到检测峰值；不同血清型登革病毒不会产生交叉反应，最低检出限为2.5 × 10-18 mol/L。Cas12专用核酸检测试纸条可于30 min检测出样品中的靶标序列。结论 本研究建立的基于CRISPR/Cas12a技术的蚊种属及病原体检测方法，具有快速、高灵敏度、高特异性和可视化等优势，可为虫媒传染病的早期预警和传播阻断提供有效检测工具。
目的 基于重组酶聚合酶扩增（RPA）技术和簇状规则间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a（CRISPR/Cas12a）技术，建立快速、便捷、高效检测人粪样中十二指肠钩虫的方法，以及时干预、降低疾病传播风险，提高公共卫生水平。 方法 参考十二指肠钩虫线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ（cox1）序列，设计并筛选RPA引物和CRISPR RNA（crRNA），优化crRNA浓度、ssDNA浓度和其他反应条件，建立RPA-CRISPR/Cas12a荧光检测体系。以105、104、103、102、101、100、10-1、10-2拷贝/µl的十二指肠钩虫阳性质粒为模板，分别采用RPA法和RPA-CRISPR/Cas12a法检测最低检出限，评价该方法的敏感度。分别以十二指肠钩虫（105拷贝/µl）、美洲钩虫（20 ng/µl）、异尖线虫（30 ng/µl）、旋毛形线虫（60 ng/µl）基因组DNA为模板，采用RPA-CRISPR/Cas12a法进行检测，评价该方法的特异性。以Kato-Katz法结合半巢式PCR法结果为标准，检测42份粪样（经Kato-Katz法检测31份为钩虫阳性，11份为钩虫阴性），计算RPA-CRISPR/Cas12a法的灵敏度和特异度，Kappa值比较检测结果的一致性。 结果 建立了基于十二指肠钩虫cox1序列的RPA-CRISPR/Cas12a荧光检测体系，在优化的CRISPR/Cas12a体系中，LbCasl2a核酸酶终浓度为50 nmol/L、crRNA探针终浓度为50 nmol/L、ssDNA报告分子终浓度为100 nmol/L。该检测体系的反应条件为37 ℃ 40 min。RPA的最低检出限为102拷贝/μl，RPA-CRISPR/Cas12a法的最低检出限为10拷贝/μl，后者敏感度更高，且与美洲钩虫、异尖线虫、旋毛形线虫无交叉反应。与Kato-Katz法结合半巢式PCR法比较，RPA-CRISPR/Cas12a检测的灵敏度为19/19，特异度为91.30%（21/23），一致性较好（Kappa = 0.904 8）。 结论 该研究建立的RPA-CRISPR/Cas12a荧光检测体系具备快速、灵敏、特异的检测能力，为公共卫生监测和钩虫病防控提供了可靠技术支持。
目的 筛选曼氏血吸虫循环阴极抗原（circulating cathodic antigen，CCA）特异性核酸适配体，并进行鉴定。方法 构建曼氏血吸虫循环阴极抗原的重组原核表达载体（pET-28a-CCA），诱导pET-28a-CCA蛋白表达并通过Ni-NTA柱纯化，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析pET-28a-CCA蛋白的表达情况。以pET-28a-CCA蛋白为靶标，进行指数富集配基的系统进化（SELEX）筛选，利用荧光定量PCR监测分析每一轮文库富集情况。经过多轮加压筛选，获得的产物通过高通量测序分析、生物信息学分析，并采用微量热泳动技术表征（MST）测定候选核酸适配体与pET-28a-CCA蛋白的结合亲和力，进行分子对接。结果 双酶切鉴定和测序结果显示，pET-28a-CCA重组质粒插入约为1 044 bp的CCA基因片段。SDS-PAGE电泳结果显示，pET-28a-CCA蛋白的相对分子质量（Mr）约为43 600；SELEX筛选结果显示，第13轮筛选文库达到最佳富集。根据测序结果筛选出的9条候选核酸适配体序列，经过MST检测，有7条候选核酸适配体与pET-28a-CCA蛋白有结合亲和力。TQ-apt1的吉布斯自由能最低（ΔG = -13.09 kcal/mol），GC含量最高（59.20%）、熔解温度最高（102.3 ℃）以及G-四链体得分最高（15分），TQ-apt1与pET-28a-CCA蛋白的亲和力最高，解离常数为2.1 nmol/L。结论 成功获得了pET-28a-CCA蛋白的核酸适配体。
旋毛虫病是一种危害严重的人兽共患寄生虫病。在研究与教学工作中，一些旋毛虫和旋毛虫病术语（包括拉丁名和中文名）时常令人感到困惑。目前的相关教材与专著中尚未有这些术语的完整释义。本文对旋毛虫与旋毛虫病的若干术语进行释义，旨在为我国旋毛虫与旋毛虫病的教学与防治研究提供参考。
我国发现首例现代确诊血吸虫病病例迄今已120年，经过几代人的努力，血吸虫病防治工作取得举世瞩目的成就。至2023年底，全国实现血吸虫病传播阻断目标，78.49%的流行县均达到了消除目标。但受气候变化、自然灾害、人口流动等因素影响，全国要实现血吸虫病消除目标并持续巩固消除成果仍面临挑战。各地应继续坚持“以传染源控制为主、强化重点环境钉螺控制”的综合防治策略，加强监测预警和风险评估，以科技赋能，创新防治手段，强化能力建设，高质量推进消除进程。
截至目前，有关非洲的弓形虫感染和弓形虫病的研究报道较有限。本文在PubMed中使用关键词“弓形虫”“弓形虫病”和“非洲”系统检索2015—2024年报道的非洲一般人群的弓形虫感染状况、非洲孕妇的弓形虫感染状况、非洲儿童的弓形虫感染状况和先天性弓形虫病、非洲HIV阳性者/艾滋病患者和肿瘤患者的弓形虫感染状况、非洲的弓形虫虫株基因型和地理分布，以及非洲弓形虫感染的危险因素和感染方式的文献报道，以期为相关研究提供参考。
目的 评估亚洲璃眼蜱在普氏野马分布区域传播疾病的潜在风险，研究雌、雄蜱在宏基因组水平的特征并进行病原体分析。 方法 2022年4月，在新疆卡拉麦里山有蹄类自然保护区使用“守株待蜱”法采集硬蜱，利用体视镜进行形态学鉴定，提取48只蜱（雌、雄各24只）DNA，PCR扩增线粒体细胞色素C氧化酶第1亚基（COⅠ）序列进行分子生物学鉴定。将雌、雄亚洲璃眼蜱分组进行宏基因组测序，非冗余基因集与非冗余蛋白（NR）数据库进行比对，分析蜱携带的微生物群落组成；与京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库和抗生素抗性基因数据库（ARDB）进行比对，获取蜱及蜱传病原体的基因功能注释结果以及抗生素抗性功能注释结果。数据的比较采用t检验分析。 结果 共采集硬蜱124只，经形态学鉴定亚洲璃眼蜱成虫119只。硬蜱DNA扩增出约700 bp的阳性条带，经测序与亚洲璃眼蜱（GenBank：MH459386.1）的序列一致性为99%~100%。宏基因组测序经质控过滤共获得469 327 812条序列读长，开放阅读框预测得到836 843~1 094 994条序列。NR数据库比对结果显示，亚洲璃眼蜱携带的细菌菌落丰度占注释到的总群落丰度的99.13%，共注释到细菌32门2 040种，变形菌门和放线菌门为优势菌门，分别占细菌群落丰度的51.52%和44.35%；嗜吞噬细胞无形体为优势菌种，占细菌群落丰度的16.35%。病毒菌落丰度占注释到的总群落丰度的0.004%，共注释到病毒5门21种。雌蜱和雄蜱携带的细菌群落和病毒群落的丰富度及多样性差异均无统计学意义（t = -1.180、-1.729，均P > 0.05）。KEGG基因功能注释到亚洲璃眼蜱新陈代谢基因占比最高（54.38%），主要的功能条目为氨基酸代谢、碳水化合物代谢、膜转运等；共识别出11 352种蛋白通路，其中154种蛋白通路在雌蜱和雄蜱间的差异有统计学意义（t = -2.348，P < 0.05）。ARDB注释到亚洲璃眼蜱携带154种抗生素抗性基因，包括49种抗性基因类型，主要抗性基因类型为Baca（占62.53%），抗生素类型为肝菌肽。大部分注释到的抗性基因与多重耐药相关，如Mexf、Mexb、Emrd、Mexw等。雌蜱和雄蜱在抗生素抗性基因类型的差异性对比结果显示，仅雌蜱的Emrd基因抗性高于雄蜱（t = -7.558，P < 0.05）。 结论 本研究在宏基因组水平上揭示了亚洲璃眼蜱携带的主要细菌、病毒群落及多重耐药相关的抗生素抗性基因，雌蜱及其携带的病原体具有较高的物种丰度和基因丰度。
目的 观察体内和体外壮药鸡骨草制剂（HaF）治疗多房棘球蚴感染诱导的肝纤维化效果。 方法 取鸡骨草胶囊制备25、50、100、200 µg/ml HaF溶液，分别体外处理人肝星状细胞LX2（HSC-LX2）72、96、120 h后，蛋白质免疫印迹（Western blotting）检测在HSC-LX2中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白（collagen Ⅰ）的相对表达量。取0.1 mg/ml多房棘球蚴虫体蛋白刺激HSC-LX2 24 h，加入100 µg/ml HaF溶液处理24、48、72 h后，Western blotting检测HSC-LX2中α-SMA和collagen Ⅰ相对表达量。将36只雌性昆明小鼠随机分为对照组（4只）、感染组（4只）、0.5 g/（kg•d）HaF治疗组（5只）、1.0 g/（kg•d）HaF治疗组（5只）、2.0 g/（kg•d）HaF治疗组（6只）、阿苯达唑（ABZ）治疗组（6只）、ABZ + HaF联合治疗组（6只）等7个组，感染组和各治疗组小鼠分别腹腔注射2 000个原头节，对照组注射等体积生理盐水。感染后60 d，治疗组小鼠灌胃相应药物，1次/d。治疗60 d后，取小鼠肝、脾组织称重，计算小鼠肝脏指数和脾脏指数；碱水解法测定肝组织羟脯氨酸（HYP）含量；比色法测定血清天冬氨酸转氨酶（AST）水平；Western blotting检测肝组织α-SMA和collagen Ⅰ相对表达量；苏木精-伊红（HE）染色、Masson染色观察小鼠肝、脾组织病理变化。两组间数据比较采用独立样本t检验。 结果 100 µg/ml HaF溶液干预96 h后，HSC-LX2中α-SMA和collagen Ⅰ相对表达量分别为0.401 ± 0.218、0.352 ± 0.058，均低于对照组（1.435 ± 0.297、1.340 ± 0.416）（t = 2.755、11.120，均P < 0.05）；其他浓度和作用时间与对照组差异无统计学意义（均P > 0.05）。经多房棘球蚴虫体蛋白刺激的HSC-LX2在HaF处理48 h后的α-SMA和collagen Ⅰ相对表达量分别为0.326 ± 0.106和0.315 ± 0.076，均低于对照组（0.895 ± 0.417、1.009 ± 0.378）（t = 6.359、9.059，均P < 0.05）。体内实验结果显示，感染组小鼠的肝脏指数、脾脏指数、血清AST水平和肝组织HYP含量分别为（4.366 ± 0.284）%、（5.129 ± 1.114）mg/g、（22.194 ± 1.509）U/L和（21.743 ± 2.503）× 10-2 μg/mg，均高于对照组的（3.389 ± 0.045）%、（2.031 ± 0.165）mg/g、（17.355 ± 0.574）U/L和（9.330 ± 1.519）× 10-2 μg/mg（t = 3.393、2.752、2.616、4.549，均P < 0.05）。0.5 g/（kg•d）治疗组、1.0 g/（kg•d）治疗组、2.0 g/（kg•d）HaF治疗组、ABZ治疗组、ABZ + HaF联合治疗组小鼠血清AST水平分别为（17.375 ± 0.746）、（15.411 ± 1.338）、（17.057 ± 1.066）、（16.190 ± 1.559）、（14.637 ± 1.888）U/L，均低于感染组（t = 2.863、3.362、2.838、2.717、3.002，均P < 0.05），其中1.0 g/（kg•d）HaF治疗组降低最明显；5个治疗组小鼠肝脏指数、脾脏指数、肝组织HYP含量与感染组比较差异均无统计学意义（均P > 0.05）。Western blotting结果显示，1.0 g/（kg•d）HaF治疗组小鼠肝组织中α-SMA相对表达量为0.818 ± 0.195，ABZ + HaF联合治疗组小鼠肝组织collagen Ⅰ相对表达量为0.799 ± 0.167，均低于感染组（1.668 ± 0.131、1.341 ± 0.141）（t = 3.619、2.486，均P < 0.05）。HE染色和Masson染色表明，ABZ + HaF联合治疗组小鼠肝纤维化程度明显改善，肝组织中纤维组织面积为（6.184 ± 1.951）%，低于感染组的（19.916 ± 2.046）%（t = 4.703，P < 0.01）。 结论 壮药鸡骨草制剂在体内和体外均可明显减轻多房棘球蚴感染诱导的肝纤维化，为鸡骨草胶囊作为多房棘球蚴病的新型治疗制剂提供了实验依据。
多房棘球蚴病（AE）是一种严重危害人类健康和畜牧业发展的人兽共患寄生虫病。AE病变周围各种免疫细胞（包括巨噬细胞）浸润增加，可造成以肝脏为主的多种重要器官纤维化，并可能发展成肝硬化和肝癌等严重疾病。几种巨噬细胞在AE肝脏炎症的进程以及纤维化形成的不同时期分别表现为M1型巨噬细胞或M2型巨噬细胞,并分泌促炎细胞因子和抗炎细胞因子,以此来促进早期棘球蚴的清除作用和中晚期的抗炎作用从而在AE肝脏纤维化的形成过程中发挥调控作用。本文从AE所致肝脏纤维化中几种巨噬细胞的调控机制作一论述。
目的 通过转录组测序分析辣根素作用后粉尘螨差异表达基因（DEG）的变化及作用机制。方法 将90个熏蒸瓶随机均分为实验组和对照组。每瓶取80只粉尘螨背部朝下置于熏蒸瓶的胶板上，实验组熏蒸瓶中加入0.25 ml/L的辣根素稀释液25 μl，对照组加入石蜡。熏蒸24 h后，每组收集2 000只存活螨。实验组和对照组各重复6次，3次用于测序，3次用于实时荧光定量PCR（qPCR）验证。提取粉尘螨RNA并逆转录为cDNA，构建文库并进行转录组测序。测序数据进行质控组装后与非冗余蛋白（NR）、基因本体功能注释（GO）、京都基因与基因组百科全书（KEGG）等数据库进行比对。使用edgeR软件进行差异表达分析，对DEG进行GO与KEGG功能注释与富集。选取粉尘螨在辣根素作用后的DEG，进行qPCR验证，使用R软件对qPCR数据进行方差分析。结果 转录组测序获得56 625条转录本，总长度为72 418 610 nt。共获得的39 510条单基因簇，比对到NR数据库中的数量最多，为25 450个，其次分别为直系同源蛋白分组比对（eggNOG）数据库（17 643个）、蛋白质（Swiss-prot）数据库（13 338个）、GO数据库（13 234个）、KEGG数据库（9 445个）。辣根素作用粉尘螨后，共检测到2 719个DEG，其中上调基因1 185个，下调基因1 534个。GO功能注释结果显示，DEG主要与细胞过程、结合与催化活性等功能相关，GO富集分析结果显示，上调基因主要为ATP结合盒转运蛋白G亚家族（ABCG）、细胞色素P450（CYP450）、热休克蛋白、乙酰胆碱受体等；下调基因主要为钙调蛋白、RNA聚合酶等。KEGG注释显示，DEG主要参与运输与分解代谢、信号转导、翻译等过程。KEGG富集分析显示，DEG富集于30条通路，主要富集在核糖体、不同环境中微生物代谢以及次生代谢物的生物合成等通路。qPCR结果显示，实验组UDP-葡萄糖醛酸转移酶（UGT）、多重耐药相关蛋白1（MRP1）基因的相对转录水平分别为1.18 ± 0.22、6.22 ± 0.42，较对照组（0.76 ± 0.30、2.52 ± 1.75）显著上调（F = 11.22、16.83，均P < 0.05）；线粒体核糖体相关GTP酶（MTG）的相对转录水平为0.05 ± 0.04，较对照组（1.23 ± 0.62）显著下调（F = 13.95，P < 0.05）；均与转录组测序结果一致。结论 辣根素作用后粉尘螨体内多种基因存在表达差异，UGT、CYP450、MRP1、ABCG基因在对辣根素产生抗性或解毒代谢中起重要作用。
目的 解析图兰扇头蜱（Rhipicephalus turanicus）线粒体全基因组的结构特征与系统发育关系，揭示不同地理种群之间的遗传分化，为进一步开展物种鉴定和系统发育分析等研究提供数据支撑。 方法 2023年8月，于山东省济宁市微山县马坡镇的一只家犬体表采集并鉴定图兰扇头蜱雄蜱1只，提取基因组DNA，采用Illumina测序平台二代测序技术进行测序，并利用Novoplasty软件进行序列组装，拼接完整的线粒体基因组全序列，使用MITOS软件对线粒体基因组进行初步功能注释。基于13个蛋白质编码基因（protein-coding gene，PCG）序列，应用最大似然法构建系统进化树。 结果 测序结果显示，图兰扇头蜱线粒体基因组全长为14 718 bp（GenBank登录号：PV416795），由13个PCG、22个转运RNA基因、2个核糖体RNA和2个非编码区（NCR）组成。线粒体基因组基因之间存在重叠或基因间隔区，碱基组成呈现明显A + T偏向性。PCG以ATA、ATC、ATG和ATT等4种典型的ATN序列作为起始密码子，TAA、TAG、TA、T为终止密码子。在22个tRNA基因二级结构中，除trnC、trnF、trnS1缺少二氢尿嘧啶臂（DHU臂）和二氢尿嘧啶环（DHU环）导致不能形成完整的三叶草结构外，其余均能形成典型的三叶草结构。系统进化分析表明，本研究采集的山东图兰扇头蜱与北京种群（登录号：OM368330）、新疆种群（登录号：KY996841、NC035946、OM368326）共同聚为一支，并与来自以色列（登录号：OQ184023）和沙特阿拉伯（登录号：PP919886）的种群共同构成一个强支持的单系分支。不同地理种群图兰扇头蜱聚为同一高度支持的系统发育分支，表明其具有较强的遗传保守性，同时也显示出一定的地域性遗传分化趋势。 结论 本研究获得了山东图兰扇头蜱线粒体基因组全序列，符合硬蜱科线粒体基因组特征，不同地理种群间存在潜在的遗传分化趋势。
蜱是一种人兽共患的体表吸血寄生虫，其在吸血过程中会触发机体的凝血系统。为逃避宿主防御机制，蜱会分泌多种抗凝血蛋白来调节宿主凝血系统，以维持血液的持续流动。这些抗凝血蛋白多为蛋白酶抑制剂，可与宿主的凝血因子及血小板活性相关分子相互作用，从而有效调节宿主的血液凝固过程。目前已发现大量具有抗凝血活性的蜱源蛋白分子，这些蛋白分子的结构多样，且与宿主体内的目标分子具有较高的特异性和较强的亲和力。基于这些蜱源抗凝分子开发的抗凝药物有望兼具高效抗凝作用和较低的出血风险。本文综述了部分蜱源抗凝血分子的研究进展，讨论了它们的作用机制及潜在的临床应用价值，旨在为新型抗凝药物的研发提供参考。
目的 结合环介导等温扩增（LAMP）技术与规则成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白12a（CRISPR/Cas12a）系统，建立一种高度敏感、特异的日本血吸虫核酸片段的快速检测方法。方法 选取Sj28S核糖体基因片段作为靶序列，设计LAMP引物、单链DNA（ssDNA）和CRISPR RNA（crRNA），确定各组分浓度，筛选最佳反应体系和条件，建立日本血吸虫核酸LAMP-CRISPR/Cas12a快速荧光检测方法。用不同浓度的日本血吸虫成虫基因组DNA（1 ng/μl、100 pg/μl、10 pg/μl、1 pg/μl、100 fg/μl、10 fg/μl、1 fg/μl）及构建的含Sj28S核糖体基因片段的重组质粒（106、105、104、103、102、101、100、10-1拷贝/μl）评估该方法的敏感性，用日本血吸虫、曼氏血吸虫、华支睾吸虫、大片形吸虫、卫氏并殖吸虫、广州管圆线虫、多房棘球绦虫、湄公血吸虫感染的开放拟钉螺以及日本血吸虫感染湖北钉螺和阴性湖北钉螺基因组DNA评价其特异性。构建40、20、10条日本血吸虫尾蚴感染小鼠模型，采集感染后第3~6周小鼠粪样以及感染后第3天及第1~6周小鼠血浆样本，以qPCR法为平行对照，评价所建方法检测日本血吸虫感染鼠粪样与血浆DNA的效果。结果 选择crRNA-2建立LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法，筛选ssDNA、crRNA和Cas12a的最适终浓度分别为400、200、200 nmol/L，LAMP预扩增时间为30 min。该方法对日本血吸虫成虫基因组的最低检出限为10 fg/μl，对重组质粒的最低检出限为1拷贝/μl。该方法与曼氏血吸虫、华支睾吸虫、大片形吸虫、卫氏并殖吸虫、广州管圆线虫、多房棘球绦虫等常见寄生虫以及湄公血吸虫感染的开放拟钉螺和阴性湖北钉螺等中间宿主基因组DNA均无交叉反应。LAMP-CRISPR/Cas12a、qPCR法对感染小鼠混合粪样检测阳性率分别为85.42%（41/48）和51.02%（175/343）（χ² = 8.71，P < 0.05），且LAMP-CRISPR/Cas12a法最早可检出小鼠感染后第3周的粪样，早于qPCR法（可检出感染第4周粪样）。LAMP-CRISPR/Cas12a、qPCR法对感染小鼠血浆样本检测阳性率分别为58.3%（28/48）和27.11%（93/343）（χ² = 9.77，P < 0.05）；LAMP-CRISPR/Cas12a和qPCR方法均最早可检出小鼠感染后第3天血浆中的血吸虫循环DNA，阳性率分别为53.06%（26/49）、22.45%（11/49）（χ² = 9.77，P < 0.05）。结论 本研究建立了一种LAMP-CRISPR/Cas12a日本血吸虫核酸快速检测方法，操作简便快捷、高度敏感与特异，且具有较好的早期检测价值，有望为血吸虫病的现场检测提供新的工具。
华支睾吸虫以鱼虾等为中间宿主，以哺乳动物为终末宿主，是一种重要的人兽共患寄生虫。该病原体主要导致胆管癌变等消化系统疾病。随着我国居民消费水平的提升和消费结构的变化，国内因食生或半生鱼类引起的华支睾吸虫病感染人数高达1 300多万，成为食品安全和公共卫生领域中亟待解决的问题。本文对近年来国内外学者在华支睾吸虫感染发病机制及防控措施的最新研究进行综述，以期为该病原体的监测、预防和控制策略提供参考。
随着以青蒿素为基础的联合疗法在恶性疟治疗中的广泛应用，恶性疟原虫对青蒿素及其衍生物逐渐产生了部分耐药性，成为当前全球疟疾防控最严峻的挑战之一。近年来，恶性疟原虫青蒿素耐药分子机制研究和分子标记鉴定取得较大进展。目前已发现的恶性疟原虫青蒿素耐药相关基因有Kelch13（pfk13）、泛素特异性蛋白酶1（pfubp1）、衔接蛋白复合体2-μ亚基（pfap2μ）和冠状蛋白（pfcoronin）等。分子监测结果显示，恶性疟原虫青蒿素耐药相关突变在东南亚地区已普遍存在，非洲、南美洲和大洋洲也已陆续出现了独立起源的耐药突变虫株。高通量测序技术和分子检测技术的发展为恶性疟原虫青蒿素耐药分子监测提供了强大助力。本文就恶性疟原虫青蒿素耐药分子监测的研究进展作一综述，以期为恶性疟原虫青蒿素耐药监测和控制提供参考。
曼氏裂头蚴病是由曼氏迭宫绦虫的幼虫——裂头蚴侵入人体引起的一种人兽共患寄生虫病，呈世界性分布，严重威胁人类健康。曼氏裂头蚴可在人体内移行，其寄生部位多变，所致临床症状各不相同，并且缺乏特异性表现，误诊、漏诊较为普遍，故对裂头蚴病的精确诊断尤为重要。目前已有多种方法应用于人体曼氏裂头蚴病的诊断，本文分别从病原学、影像学、免疫学和分子生物学等方面综述了曼氏裂头蚴病的常用诊断方法，以期为曼氏裂头蚴病诊断技术的进一步研究提供参考。
