目的 了解多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔免疫细胞迁移及分化的变化,探讨其发挥免疫功能的机制。方法 裂解增强绿色荧光蛋白(EGFP)小鼠脾组织,分离EGFP示踪免疫细胞。C57BL/6J小鼠腹腔注射2.5 × 107个示踪免疫细胞,5 d后经肝门静脉穿刺接种3 000个多房棘球蚴原头节。感染19周后,取感染小鼠肝、脾组织,冷冻切片后4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色,免疫荧光观察示踪免疫细胞的分布。分离感染小鼠外周血、肝、脾和腹膜腔免疫细胞,流式细胞术检测EGFP示踪免疫细胞在不同组织的迁移分布和细胞分型,以及细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)的分泌情况。结果 免疫荧光结果显示,EGFP示踪细胞主要迁移至小鼠脾组织。肝组织中各型示踪淋巴细胞占比从高到低依次为CD8+ T细胞(79.63 ± 5.00)%、CD4+ T细胞(7.08 ± 4.00)%、B细胞(2.01 ± 1.00)%(F = 396.20,P < 0.01);脾组织中各型淋巴细胞占比从高到低依次为CD8+ T细胞(73.97 ± 3.56)%、CD4+ T细胞(11.92 ± 5.02)%、B细胞(3.86 ± 0.32)%(F = 349.00,P < 0.01);腹膜腔中各型淋巴细胞占比从高到低依次为CD8+ T细胞(45.27 ± 4.53)%、CD4+ T细胞(34.60 ± 8.00)%、B细胞(15.03 ± 6.38)%(F = 16.90,P < 0.05)。肝、脾、腹膜腔中的示踪CD4+ T细胞数量分别为2 700 ± 3 120、14 407 ± 11 958、3 376 ± 1 481,示踪CD8+ T细胞数量分别为26 407 ± 22 190、109 179 ± 92 692、4 245 ± 798,示踪B细胞数量分别为698 ± 719、5 794 ± 4 971、1 476 ± 840,3种示踪淋巴细胞均主要分布在脾组织中(F = 2.51、3.03、2.62,均P > 0.05)。肝组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(3.94 ± 1.33)%、单核细胞(3.79 ± 1.80)%、巨噬细胞(3.13 ± 1.85)%、嗜酸粒细胞(2.40 ± 1.81)%、骨髓来源抑制性细胞(0.76 ± 0.17)%、中性粒细胞(0.67 ± 0.04)%(F = 3.21,P < 0.05);脾组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(1.86 ± 0.89)%、单核细胞(0.41 ± 0.09)%、巨噬细胞(0.23 ± 0.03)%、中性粒细胞和骨髓来源抑制性细胞[均(0.13 ± 0.14)%]、嗜酸粒细胞(0.04 ± 0.04)%(F = 42.70,P < 0.01);外周血中组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(0.37 ± 0.28)%、单核细胞(0.22 ± 0.27)%、巨噬细胞(0.22 ± 0.21)%、中性粒细胞和骨髓来源抑制性细胞[均(0.17 ± 0.08)%]、嗜酸粒细胞(0.05 ± 0.08)%(F = 0.92,P > 0.05)。肝组织的示踪CD4+ T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(41.17 ± 19.92)%、(30.70 ± 3.35)%、(2.78 ± 4.81)%(F = 8.22,P < 0.05);示踪CD8+ T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(64.17 ± 3.17)%、(24.85 ± 15.66)%、(5.67 ± 6.35)%(F = 27.08,P < 0.01)。脾组织的示踪CD4+ T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(52.43 ± 19.43)%、(27.67 ± 18.99)%、(4.77 ± 2.23)%(F = 6.88,P < 0.05);示踪CD8+ T细胞中,分泌TNF-α、IFN-γ、IL-4的细胞分别占(40.53 ± 17.79)%、(38.97 ± 18.04)%、(3.23 ± 3.09)%(F = 6.15,P < 0.05)。腹膜腔的示踪CD4+ T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(64.33 ± 6.82)%、(46.43 ± 13.44)%、(4.03 ± 3.51)%(F = 36.04,P < 0.01);示踪CD8+ T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(53.57 ± 19.17)%、(21.47 ± 8.54)%、(6.13 ± 8.63)%(F = 10.24,P < 0.05)。结论 多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔内免疫细胞主要迁移至脾组织,细胞类型以CD8+ T细胞和树突状细胞为主。T细胞主要分泌IFN-γ,呈Th1型免疫应答。