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    2026年 第44卷 第3期    刊出日期:2026-06-30
    上一期   
    封面和目录
    第44卷第3期封面和目录
    2026, 44(3):  0-0. 
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    相关文章 | 计量指标
    共识与指南
    寄生虫标准株的筛选、鉴定、保藏与应用专家共识
    寄生虫标准株的筛选、鉴定、保藏与应用专家共识撰写组
    2026, 44(3):  309-319.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.001
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    寄生虫标准株是寄生虫学研究、寄生虫病防控与生物医药创新的基础资源。基于我国寄生虫标准株体系建立不完善、规范化管理不足等问题,国家寄生虫资源库秘书处组织全国54位专家开展系统性研讨后达成重要共识。共识系统阐述了寄生虫标准株筛选、鉴定、保藏与应用的规范及细则,明确了标准株应具备代表性、遗传稳定性、纯度单一性,可通过形态学、分子生物学等多维技术进行鉴定与质量控制;同时,提出了分级保藏策略、标准化分发流程,以及细化在不同科研场景下的应用规范,并强调伦理审查、生物安全与资源惠益共享原则的实施要求。共识还提出了加强顶层设计、构建全链条保藏体系、推动人工智能技术应用、建立多学科协作平台的建议,以加速建成与国际接轨的中国寄生虫标准株体系,提升国家生物资源战略储备能力与科技创新竞争力。

    论著
    H3组蛋白甲基化转移酶抑制剂BIX-01294对细粒棘球蚴原头节体外杀伤效果评价
    葛聪蕙, 阿比旦·艾尼瓦尔, 肖雯颖, 唐娜, 孙胜, 王梦颖, 高毅, 阿依娜尔·吉恩斯, 胡秋, 李静, 王慧, 张传山
    2026, 44(3):  320-327.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.002
    摘要 ( )   HTML ( )   PDF (8832KB) ( )  
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    目的 探讨使用H3组蛋白甲基化转移酶抑制剂BIX-01294干预对细粒棘球蚴原头节和中绦期囊泡活性的影响。方法 采集当地屠宰场感染细粒棘球蚴的绵羊肝脏,无菌条件下分离获得原头节,使用不同浓度的BIX-01294(1、5、10、25、50 µmol/L)二甲基亚砜(DMSO)溶液进行体外干预,同时设置溶剂对照组(DMSO组),分别在干预后第3、6、9、12和15天收集虫体,亚甲基蓝染色观察原头节的活性情况,计算原头节存活率,绘制生存率曲线,采用梯形法计算存活率-曲线下面积(AUC)。收集25 µmol/L BIX-01294干预12 d后的原头节,通过苏木精-伊红(HE)染色观察干预后原头节变化。收集1、25 µmol/L BIX-01294干预1、6、9、12 d的原头节,通过Caspase-3/7荧光染色观察干预后原头节的凋亡情况。蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测25 µmol/L BIX-01294干预12 d后原头节中H3K9me2的表达水平。利用25 µmol/L的BIX-01294干预体外培养的囊泡,在第1、3、6、9和12天通过显微镜观察BIX-01294对囊泡形态的影响,通过扫描电镜观察BIX-01294干预9 d后囊泡超微结构的变化。结果 25 µmol/L BIX-01294干预6 d时,原头节存活率为(36.45 ± 7.14)%,与干预3 d的(90.21 ± 3.72)%相比下降(t = 15.86,P < 0.01);50 µmol/L BIX-01294干预3 d时,原头节存活率为(71.91 ± 7.92)%,与干预0 d的100%相比下降(t = 6.25,P < 0.05);50 µmol/L BIX-01294干预6 d时,原头节存活率为(5.64 ± 1.48)%,与干预3 d时相比继续下降(t = 15.89,P < 0.01)。各浓度组BIX-01294的AUC数值随其浓度升高呈剂量依赖性降低,50 µmol/L组AUC最低(395.25%·d)。显微镜下50 µmol/L BIX-01294干预6 d后,原头节虫体皱缩,顶突和小钩脱落,钙颗粒减少,活动减弱;HE染色结果显示,25 µmol/L BIX-01294干预12 d后原头节结构松散、空洞且体积缩小呈不规则状,体壁变薄且不完整。25 µmol/L BIX-01294干预12 d时Caspase-3/7荧光表达强度最强。Western blotting结果显示,干预12 d后原头节中H3K9me2表达水平(0.53 ± 0.08)较DMSO组(1.00 ± 0.17)降低(t = 4.226,P < 0.05)。囊泡经25 µmol/L的BIX-01294干预后第6天开始出现不同程度的塌陷或皱缩,扫描电镜结果显示,干预后第9天囊泡超微结构发现明显改变,生发层和角质层结构分离,生发层结构紊乱。结论 BIX-01294对体外培养的细粒棘球蚴原头节和囊泡具有显著杀伤效果,且呈现时间和浓度依赖效应,并伴随H3K9me2表达降低及凋亡相关信号上调,表明BIX-01294具有潜在的抗棘球蚴应用价值。

    多房棘球绦虫原头节体外双向发育的转录特征与潜在关键分子挖掘
    苏璇, 赖昕, 谢俊, 肖合宇, 曹伊琳, 季笑遥, 陈军虎, 郑彬, 胡薇, 周晓农, 张颋
    2026, 44(3):  328-335.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.003
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    目的 构建多房棘球绦虫原头节体外向囊泡分化与向体节发育的双向发育模型,解析其转录组特征并筛选关键调控分子。方法 采用体外培养体系诱导原头节分别向囊泡分化及体节发育。分别选择早期分化阶段和结构稳定形成阶段作为代表性时间点,利用扫描电子显微镜观察虫体超微结构变化,并以囊泡分化成熟阶段和类体节形成阶段作为发育节点,提取虫体RNA进行转录组测序,以原头节为对照筛选差异表达基因(DEG),并进行基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析及蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络构建。结果 向囊泡分化第9天可见虫体边缘膨大、出现囊泡雏形,第30天原头节顶突退化且表面微绒毛减少,囊泡形成率为(34.2 ± 3.4)%;转录组分析显示,第30天检出3 910个差异基因(60.15%下调,2 352/3 910),显著高于第9天(43.79%下调,621/1 418)(χ2 = 112.92,P < 0.01),主要富集于膜受体信号转导与跨膜转运等通路,枢纽基因主要涉及蛋白质合成及线粒体能量代谢相关过程。向体节发育第3天头节外翻、蠕动活跃,第15天可见明显的颈部缢缩与后部类体节膨大,类体节形成率为(33.8 ± 2.9)%;转录组分析显示,第15天检出1 520个差异表达基因(57.82%上调,879/1 520),显著高于第3天(51.97%上调,408/785)(χ2 = 7.19,P < 0.01),主要富集于细胞周期及无翅型整合位点(Wnt)信号通路,枢纽基因为细胞周期调控相关分子等。结论 多房棘球绦虫原头节的双向发育由差异化的转录程序调控,其中,囊泡分化以代谢和膜系统调控为特征,体节发育以细胞周期及Wnt信号为主,揭示了原头节双向发育的分子调控规律。本研究为解析棘球绦虫发育调控机制及筛选潜在干预靶点提供了依据。

    2016—2025年宁夏棘球蚴病综合防治效果及防控对策
    吴向林, 段红菊, 齐蓉婷, 刘煊, 闫芳, 马学平
    2026, 44(3):  336-342.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.004
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    目的 分析宁夏棘球蚴病综合防治效果,为制定防控对策提供参考依据。方法 2016—2025年在宁夏19个细粒棘球蚴病流行县(市、区),以既往有棘球蚴病病例报告或家犬粪棘球绦虫抗原阳性的村(社区)为人群筛查点,整村开展筛查。3岁及以上常住居民进行腹部B超检查人群棘球蚴病;每村(社区)抽取50只家犬,ELISA检测粪棘球绦虫抗原,计算阳性率;抽取当地屠宰场齿龄为1岁及以上羊1 000只或牛500头,检查内脏,计算牛羊棘球蚴感染率。3个多房棘球蚴病流行区周边各布置鼠夹400盘,检查内脏,计算捕获的小型啮齿类棘球蚴感染率。对棘球蚴病患者建档管理,对药物和手术治疗效果进行判定。对人群开展棘球蚴病防治知识知晓情况调查。结果 宁夏细粒棘球蚴病检出率由2016年的1.60‰(133/83 240)下降至2025年的0.36‰(35/98 263)(χ2趋势 = 265.704,P < 0.05);多房棘球蚴病检出率由2016年的0.20‰(17/83 240)下降到2025年的0.01‰(1/98 263)(χ2趋势 = 45.581,P < 0.05)。家犬粪棘球绦虫抗原阳性率由2016年的3.47%(547/15 776)下降至2025年的0.35%(50/14 290)(χ2趋势 = 1 119.418,P < 0.05),但2022年为0.75%(106/14 173)、2023年为0.76%年(167/21 916),出现小幅反弹。牛、羊棘球蚴感染率总体呈下降趋势,其中2019年、2024年、2025年未检出感染牛,羊感染率2025年(0.07%,6/9 218)较2016年(1.07%,78/7 291)下降了1个百分点(牛χ2趋势 = 44.725、羊χ2趋势 = 392.069,均P < 0.05)。啮齿类动物多房棘球蚴感染率为0.19%(29/15 125),其中2020年、2021年和2025年未检出阳性鼠,2022—2024年疫情出现反弹(χ2趋势 = 20.880,P < 0.05)。人群不愿意接受治疗率2025年较2016年下降了4.77个百分点,药物治疗治愈及好转率2025年较2016年上升了15.42个百分点,手术治疗复发率10年下降了12.82个百分点。人群知识知晓率从2016年的56.04%(5 506/9 825)提升到2025年86.49%(5 642/6 523)。结论 2016—2025年,宁夏棘球蚴病综合防治成效显著,但传播循环链依然存在,病人治愈率不高。今后防控工作重点应该放在有效阻断传播链,精准救治患者等方面。

    基于病理特征的肝多房棘球蚴病超声分型验证研究
    王梓瑞, 王晓荣, 杨凌菲, 李钊, 刘小凤, 宋涛
    2026, 44(3):  343-350.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.005
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    目的 基于肝多房棘球蚴病(HAE)病理特征提出4型超声分类体系,探讨其与病理分型的一致性和临床应用价值。方法 回顾性分析2018年1月—2024年12月于新疆医科大学第一附属医院经手术病理确诊为HAE的患者,收集患者的超声资料、病理资料及治疗方式。对患者进行超声检查,记录病灶的位置、最大直径、病灶内部回声、液化坏死区及钙化范围等情况,参照超声检查结果和病灶术后病理特征,将病灶分为浸润型、钙化型、液化型、复杂型4种类型。对比分析病灶超声分型的观察者间一致性和超声分型与病理结果的一致性,一致性评价采用Kappa值。比较4型病灶的超声相关参数之间的差异性,包括最大直径、实性区域面积占比、钙化区域面积占比、液化区域面积占比及病灶周围低回声晕圈等。基于患者最大病灶的分型确定患者类型,同时收集患者的临床治疗措施,分析患者类型和治疗方式的关联性。采用SPSS 26.0软件进行统计学分析。结果 最终纳入HAE患者344例、HAE病灶469个。超声分型结果为浸润型病灶227个、钙化型病灶73个、液化型病灶106个、复杂型病灶63个;病理分型结果为浸润型病灶217个、钙化型病灶81个、液化型病灶110个、复杂型病灶61个。超声分型的总体符合率为94.5%(443/469),各型病灶符合率分别为:钙化型100%(73/73)、液化型97.2%(103/106)、浸润型92.5%(210/227)、复杂型90.5%(57/63)。观察者间一致性Kappa值为0.936,超声分型与病理结果的一致性Kappa值为0.918。4型病灶在实性、钙化、液化成分占比和最大直径的差异均有统计学意义(H = 381.729、237.657、384.372、101.102,均P < 0.05)。76.7%(264/344)的患者行HAE根治性切除术,21.2%(73/344)行自体肝移植,2.0%(7/344)行异体肝移植。术前12.8%(44/344)的患者行姑息治疗,其中经皮肝穿刺胆道减压术16例,25例液化型及3例复杂型患者行脓腔穿刺置管引流。浸润型患者占44.5%(153/344)、钙化型患者占12.5%(43/344)、液化型患者占27.3%(94/344)、复杂型患者占15.7%(54/344)。关联分析结果显示,不同患者类型中脓腔穿刺置管引流术选择率的差异有统计学意义(χ2 = 47.32,P < 0.01)。不同患者类型中根治性病灶切除术选择率的差异虽有统计学意义(χ2 = 10.47,P < 0.05),但经Bonferroni校正后(α = 0.008 33),任意两型间选择率的差异均未没有统计学意义。结论 4型超声分类体系中HAE超声分型与病理特征高度一致且具备高度可重复性,各分型具备特征性超声参数,该分型方式通过术前识别病灶的主要成分,为HAE的个体化治疗提供影像学依据。

    青海省果洛藏族自治州犬科动物棘球绦虫感染状况与人群棘球蚴病风险因素调查
    马万里, 蔡辉霞, 刘佳, 张雄英, 王威, 晁洁, 刘娜, 张青, 贾德强, 郭帅, 赵存哲, 祁通生, 詹培珍, 丁玉莲, 刘玉芳, 雷雯, 史可梅
    2026, 44(3):  351-357.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.006
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    目的 了解青海省果洛藏族自治州(简称果洛)犬科动物棘球绦虫感染情况、人群棘球蚴病感染因素及风险行为,为该地区棘球蚴病精准防控提供科学依据。方法 2025年采用随机抽样方法,对果洛班玛县、达日县、久治县的11个乡(镇)的牧业养犬户开展家犬感染因素调查,同时采集新鲜或表观被膜完整的家犬、野外犬科动物粪样,采用多重实时荧光定量PCR(qPCR)检测粪样棘球绦虫感染情况。基于前期调查结果,同年开展果洛班玛县、达日县人群棘球蚴病感染因素及风险行为调查,以人群既往棘球蚴病患病情况为因变量进行单因素分析,构建logistic回归模型,分析人群患病的独立影响因素。使用SPSS25.0统计软件进行统计学分析,采用χ2检验或Fisher确切概率法分析构成比差异。结果 共采集犬粪945份(家犬粪样696份,野外犬科动物粪样249份),犬粪棘球绦虫总阳性率为1.59%(15/945)。其中家犬粪样阳性率为0.43%(3/696),明显低于野外犬科动物的4.82%(12/249)(χ2 = 19.885,P < 0.01)。共收集家犬感染风险因素问卷459份,分析结果显示,家犬不同拴养方式之间犬粪阳性率差异有统计学意义(χ2 = 8.400,P < 0.05),其余风险因素均无统计学意义(P > 0.05)。人群棘球蚴病行为调查发放问卷400份,回收有效问卷346份,回收率为86.50%,棘球蚴病防治知识知晓率为86.12%(1 788/2 076),合格率为86.99%(301/346)。班玛县和达日县的人群棘球蚴病防治知识合格率分别为96.95%(159/164)和78.02%(142/182),差异有统计学意义(χ2 = 25.672,P < 0.05);家中养犬、居家附近有流浪犬或野生犬科动物、随意躺在草地并口衔草梗、家中生牛羊脏器的处理方式的不同行为人群合格率差异有统计学意义(χ2 = 18.155、5.115、3.958、32.647,均P < 0.05)。单因素分析结果显示,班玛县和达日县的人群棘球蚴病患病情况差异有统计学意义(χ2 = 4.984,P < 0.05);不同年龄组、文化程度,以及家中养犬、居家附近有流浪犬或野生犬科动物、随意躺在草地并口衔草梗的不同行为人群棘球蚴病患病情况差异有统计学意义(χ2 = 9.298、14.202、10.426、8.082、7.247,均P < 0.05)。多因素logistic回归分析显示,年龄组(OR = 2.075,95% CI:1.041~4.138)、文化程度(OR = 0.440,95% CI:0.224~0.865)、家中养犬(OR = 2.482,95% CI:1.017~6.057)、居家附近有流浪犬或野生犬科动物(OR = 3.094,95%CI:1.096~8.732)是人群患病的独立影响因素。结论 青海果洛牧业户家养犬棘球绦虫防控效果较好,但人群感染风险因素仍持续存在,需强化牧业户健康教育,规范犬类饲养管理,野外犬科动物棘球绦虫阳性率居高不下,需优化野外犬科动物防控体系,巩固现有防控成果。

    2025年江西省第四次人体重点寄生虫病现状调查
    兰炜明, 邱婷婷, 李召军, 高晓晖, 文雨松, 李晓琴, 刘克星, 陈喆, 曾小军, 丁晟, 葛军
    2026, 44(3):  358-364.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.007
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    目的 了解和分析江西省人体重点寄生虫病流行现状和变化趋势,为优化防治策略和措施提供科学依据。方法 按照2025年《全国人体重点寄生虫病现状调查方案》,结合江西省实际情况,土源性线虫以生态区为基础,按经济条件和地理方位多阶段分层整群抽样,每个调查县根据地理方位划分为东南西北中5个片区,每片区随机抽取1个乡镇,再从中随机抽取1个自然村为调查点开展调查,每调查点200人。另在华支睾线虫流行区信丰县随机抽取3个乡镇,每个乡镇随机抽取1个自然村调查点开展调查,每调查点200人。采用改良加藤厚涂片法检查蠕虫卵(土源性线虫、华支睾吸虫和带绦虫),3~9岁儿童用透明胶纸肛拭法检查蛲虫。结果 全省18个县88个调查点共调查18 155人,加查儿童蛲虫896人。查出肠道蠕虫6种,包括钩虫、鞭虫、蛲虫、华支睾吸虫、并殖吸虫和棘口科吸虫。肠道蠕虫平均感染率为1.47%(266/18 155),土源性线虫感染率为0.90%(163/18 155),钩虫、鞭虫、蛲虫和华支睾吸虫感染率分别为0.75%(137/18 155)、0.15%(27/18 155)、0.11%(20/18 155)和0.44%(80/18 155),棘口科吸虫5例、并殖吸虫1例。3~9岁儿童蛲虫感染率2.01%(18/896)。蠕虫感染以南岭山地丘陵生态区最高,为2.96%(79/2 666);浙闽山地丘陵生态区最低,为0.34%(7/2 035)(χ2 = 44.09,P < 0.01)。土源性线虫感染以湘赣丘陵山地生态区最高,为1.38%(101/7 324)(χ2 = 37.97,P < 0.01),其中鞭虫感染率以长江中下游平原生态区最高(0.28%,17/6130),钩虫感染率以湘赣丘陵山地生态区最高(1.27%,93/7 324)(χ2 = 44.91,P < 0.01)。全省88.75%(71/80)的华支睾吸虫感染者在南岭山地丘陵生态区。各调查县中乐安县钩虫感染率最高,为2.19%(23/1 052);信丰县华支睾吸虫感染率最高,为11.61%(70/603)。人群分布中,华支睾吸虫男性感染率为0.72%(63/8 799),高于女性的0.18%(17/9 356)(χ2 = 29.51,P < 0.01);土源性线虫女性感染率(1.10%,103/9 356)高于男性(0.68%,60/8 799)(χ2 = 8.95,P < 0.05)。各年龄组均有蠕虫感染者,以≥ 70岁年龄组感染率最高,为2.27%(110/4 849);10~19年龄组最低,为0.41%(6/1 446)。除散居儿童无寄生虫感染外,其余各职业均有感染者分布,农民的蠕虫、土源性线虫、鞭虫、钩虫和华支睾吸虫感染率均最高,分别为1.70%(227/13 354)、1.12%(150/13 354)、0.18%(24/13 354)、0.95%(127/13 354)和0.55%(74/13 354)。结论 江西省重点寄生虫人群感染率均已降至历史最低水平,60岁及以上老人感染钩虫、3~9岁儿童感染蛲虫和吃鱼生地区感染华支睾吸虫的问题仍较为突出。以健康教育为先导,以控制传染源为主的综合防治策略成效显著,应长期坚持。

    2017—2024年重庆市土源性线虫感染监测结果分析
    杨梦平, 石粤渝, 谢君, 王瑞鑫, 周爽, 罗飞
    2026, 44(3):  365-370.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.008
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    目的 了解2017—2024年重庆市居民土源性线虫感染状况,为科学制定防控策略及调整相关措施提供依据。方法 根据《全国肝吸虫病和土源性线虫病监测方案(试行)》要求,2017—2024年重庆市每年抽取部分县(区)作为监测点,各监测县按地理方位划分为东、西、南、北、中5个片区,每个片区随机抽取1个乡(镇)的1个行政村开展监测,每个行政村至少调查200人,每个监测县不少于1 000人。采集监测对象的粪样,采用改良加藤厚涂片法(一粪两检)检测土源性线虫虫卵,应用试管滤纸培养法对不同钩虫虫种进行鉴定,并分别统计各虫种的感染率与感染度,率的比较采用卡方检验。结果 2017—2024年,重庆市共检测61 430人,总感染率为3.05%(1 875/61 430),钩虫、蛔虫和鞭虫感染率分别为2.66%(1 636/61 430)、0.36%(220/61 430)和0.06%(35/61 430)。培养出钩蚴777份,美洲钩虫、十二指肠钩虫分别为500份、277份。2017—2024年各年份人群土源性线虫感染率分别为6.91%(424/6 132)、5.75%(354/6 157)、3.87%(238/6 149)、1.23%(76/6 155)、2.89%(236/8 159)、0.50%(56/11 093)、2.84%(258/9 069)、2.74%(233/8 516),各年份间差异有统计学意义(χ2 = 791.302,P < 0.01)。不同片区中,渝西地区土源性线虫感染率最高(4.63%,577/12 466),中心城区最低(0.89%,161/18 179)。男性和女性感染率分别为3.02%(873/28 881)、3.08%(1 002/32 549),差异无统计学意义(χ2 = 0.160,P > 0.05)。各年龄组中,≥ 70岁组土源性线虫感染率最高(6.01%,681/11 337);职业以农民感染率最高(4.77%,1 699/35 641);文化程度以文盲或半文盲人群感染率最高(5.08%,206/4 056)。不同片区、年龄、职业和文化程度间人群土源性线虫感染率差异均有统计学意义(χ2 = 535.934、833.397、850.287、534.637,均P < 0.05)。钩虫、蛔虫和鞭虫感染者均以轻度感染为主,钩虫轻度、中度、重度感染的比例分别为92.30%(1 510/1 636)、4.28%(70/1 636)、3.42%(56/1 636),钩虫、蛔虫、鞭虫感染度最高值分别为65 520、297 792、2 568个。结论 2017—2024年重庆市土源性线虫感染率总体呈下降趋势,渝西地区部分县(区)感染率仍较高,钩虫重度感染者集中在老年人群,需加强对重点地区、重点人群的防治和健康宣传工作。

    常山酮对蠕虫的体外杀伤作用研究
    宋润润, 李婷婷, 王萌, 付宝权, 张欢, 闫鸿斌, 李立, 张念章
    2026, 44(3):  371-377.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.009
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    目的 探究常山酮(Hal)对多房棘球蚴和旋毛形线虫(简称旋毛虫)的体外杀伤作用。方法 从多房棘球蚴感染小鼠体内分离多房棘球蚴包囊和原头节,从旋毛虫感染小鼠分离旋毛虫肌幼虫、成虫和新生幼虫,用DMEM培养基进行体外培养。多房棘球蚴原头节分别加入50、80、100 μmol/L终浓度Hal、1%二甲基亚砜(DMSO)和等体积培养基,干预24、48和72 h后观察原头节形态,并用0.1%亚甲基蓝染色计算各组原头节死亡率,计算Hal对原头节的半数有效浓度(EC50)。多房棘球蚴包囊分别加入100 μmol/L终浓度Hal和1%DMSO,干预72 h后通过扫描电镜观察包囊的超微结构。旋毛虫肌幼虫、成虫和新生幼虫分别加入50、80、100 μmol/L终浓度Hal、1%DMSO和等体积培养基,干预24、48和72 h后观察肌幼虫和成虫的虫体形态和活性,干预96、120和144 h后观察新生幼虫的虫体形态和活性。采用GraphPad Prism 9.5进行统计学分析,数据采用单因素方差检验。结果 干预48 h后,50、80和100 μmol/L浓度Hal组的多房棘球蚴原头节死亡率分别为(13.05 ± 1.43)%、(57.57 ± 2.57)%和(96.38 ± 2.16)%,均高于DMSO组的(1.08 ± 0.52)%(t = 13.587、37.254、74.430,均P < 0.01);EC50为73.96 μmol/L。100 μmol/L浓度Hal干预72 h后,扫描电镜下的多房棘球蚴原头节呈现体表破裂、微绒毛排列紊乱、吸盘破坏等结构性损伤;多房棘球蚴包囊角皮层表面出现不规则裂痕和孔洞,生发层大面积脱落,未成熟的原头节数量显著减少。干预72 h后,50、80和100 μmol/L浓度Hal组的旋毛虫肌幼虫死亡率分别为(83.59 ± 5.76)%、(87.57 ± 1.52)%、(95.42 ± 1.21)%,均高于DMSO组的(1.58 ± 0.38)%(t = 24.590、94.801、127.887,均P < 0.01);50、80和100 μmol/L浓度Hal组的成虫死亡率分别为(9.32 ± 0.96)%、(36.90 ± 3.08)%、(98.4% ± 1.42)%,均高于DMSO组的(1.77 ± 0.58)%(t = 13.201、19.698、115.971,均P < 0.01)。干预120 h后,50、80和100 μmol/L浓度Hal组的新生幼虫死亡率分别为(89.11 ± 1.40)%、(92.32 ± 1.17)%、(95.31% ± 2.31)%,均高于DMSO组的(1.68 ± 0.16)%(t = 107.394、133.302、70.129,均P < 0.01)。Hal干预后,旋毛虫肌幼虫、成虫和新生幼虫虫体均呈现典型的僵直死亡形态,无自主运动迹象。结论 体外Hal通过破坏虫体结构发挥高效杀蠕虫作用,有望成为治疗多房棘球蚴病和旋毛虫病的潜在药物。

    疟原虫感染红细胞源外泌体对实验性脑型疟免疫保护作用研究
    徐滨, 宋立国, 王洪璇, 单婷, 鲍博闻, 刘双春, 杜云婷, 陈光
    2026, 44(3):  378-387.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.010
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    目的 探究疟原虫感染红细胞源外泌体对实验性脑型疟(ECM)小鼠的免疫保护作用及机制。方法 从感染约氏疟原虫17XNL(P.y17XNL)的BALB/c小鼠外周血提取鉴定外泌体。将C57BL/6J小鼠随机分为ECM组、外泌体免疫组(Exos + ECM组)和阴性对照组(NC组)。Exos + ECM组分两次经尾静脉注射进行外泌体免疫;免疫后20 d,ECM组和Exos + ECM组小鼠经腹腔注射1 × 10⁶个伯氏疟原虫ANKA(P.bANKA)感染的红细胞,NC组腹腔注射同等体积生理盐水,动态观察红细胞感染率和小鼠生存率。取小鼠脑组织,伊文思蓝(EB)灌注后检测上清630 nm波长吸光度值(A630值)评估小鼠血脑屏障完整性。苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠脑组织病理变化,免疫组化染色观察脑微血管的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达。蛋白免疫印迹(Western blotting)和实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测小鼠脑组织炎症相关细胞因子的变化。结合蛋白质组学分析外泌体核心差异成分与脑组织炎症因子的调控关联。结果 ECM组和Exos + ECM组的红细胞感染率分别于感染后第11天和第15天达到峰值,分别为(25.0 ± 0.0)%和(17.2 ± 4.4)%,Exos + ECM组上升速度较慢;ECM组小鼠在感染后第13天全部死于脑型疟,Exos + ECM组小鼠感染后第15天生存率为83.3%。血脑屏障完整性检测结果显示,ECM组血脑屏障完整性被破坏、Exos + ECM组破坏不明显;NC组和Exos + ECM组上清液A630值为分别为(0.28 ± 0.04)和(0.62 ± 0.01),均低于ECM组的(0.89 ± 0.02)(t = 24.24、10.53,均P < 0.01)。脑组织HE染色和免疫组化结果显示,与ECM组相比,Exos + ECM组脑微血管中感染红细胞减少、炎性浸润减轻,ICAM-1和VCAM-1表达水平下调。qRT-PCR结果显示,Exos + ECM组小鼠脑ICAM-1、VCAM-1、白细胞介素-6(IL-6)、IL-17A、转移生长因子β(TGF-β)、IL-10的mRNA相对转录水平分别为4.05 ± 0.42、1.24 ± 0.14、0.48 ± 0.3、0.27 ± 0.31、1.39 ± 0.53、4.23 ± 3.29,均低于ECM组的8.11 ± 0.86、2.80 ± 0.33、1.38 ± 0.76、2.28 ± 0.26、2.94 ± 0.49、16.02 ± 3.56(t = 8.76、8.52、2.91、6.81、4.51、5.41,P < 0.01、0.01、0.05、0.01、0.05、0.01)。Western blotting结果显示,Exos + ECM组小鼠脑Toll样受体4(TLR4)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平分别为0.84 ± 0.06、0.81 ± 0.04、2.07 ± 0.72,均低于ECM组的1.24 ± 0.04、0.85 ± 0.03、6.06 ± 2.45(t = 7.07、1.27、3.12,均P < 0.05)。蛋白质组学结果显示,P.y17XNL感染小鼠和正常小鼠外泌体的差异蛋白主要富集在细胞核蛋白、细胞质蛋白、质膜蛋白以及线粒体蛋白上,与蛋白质输出、转运和氨基酸代谢有关。结论 外泌体免疫对ECM具有免疫保护作用,能够降低红细胞感染率、提高小鼠存活率。主要作用机制可能与降低脑部炎症、保护血脑屏障完整性、改善小鼠脑组织病理损伤有关。

    云南德宏2014—2025年间日疟复发趋势分析
    曾梦, 董朝良, 蔺应坤, 周先华, 李仕刚, 闫润仙, 江伟, 孙晓东, 郭天巧
    2026, 44(3):  388-392.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.011
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    目的 分析2014—2025年云南德宏间日疟的复发趋势,为疟疾防制策略提供依据。方法 采用回顾性横断面研究,从国家疾病预防控制信息系统收集2014—2025年德宏间日疟报告病例信息,使用其查重功能核查复发病例计算复发率,采用Shapiro-Wilk检验和Levene检验分别进行正态性和方差齐性检验,采用独立样本t检验分析2014—2019年复发率和2020—2025年复发率差异。采用中断时间序列(ITS)分析以“2020年云南省改用WHO捐赠的塞浦路斯产的伯氨喹根治间日疟和卵型疟”为干预断点的复发率变化趋势。结果 2014—2025年德宏共报告间日疟2 485例,其中境外输入2 454例(占98.75%),复发79例,复发率为3.18%(79/2 485)。2020—2025年复发率为(4.60 ± 1.82)%,与2014—2019年的(1.64 ± 1.40)%差异有统计学意义(t = -3.158,P < 0.05);2020—2025年复发率较2014—2019年平均升高2.96%[95%置信区间(CI):0.87%~5.04%]。2014—2025年德宏间日疟复发率总体呈波动变化,2020年为明显时间断点。ITS回归模型拟合结果显示,中心化时间变量、干预变量、交互项、延迟变量的回归系数分别为-0.363(95% CI:-1.890~1.163)、5.115(95% CI:-1.076~11.307)、0.078(95% CI:-1.840~1.996)、-0.069(95% CI:-0.872~0.734),差异均无统计学意义(t = -0.582、2.021、0.099、-0.210,P > 0.05)。提示2014—2019年和2020—2025年德宏间日疟复发率均呈下降趋势,且2020年干预节点复发率出现即时上升,2020年后复发率的下降趋势略有减缓。结论 德宏间日疟复发率变化趋势与更换国外产伯氨喹无关,复发率维持低水平,无需更换根治方案,但需加强监测。

    贵州省安顺市白纹伊蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性机制研究
    王丹, 张燕, 喻涛洪, 谢朋亮, 周敬祝, 师伟芳, 罗小龙, 梁文琴
    2026, 44(3):  393-401.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.012
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    目的 了解贵州省安顺市白纹伊蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性及代谢酶活性水平,以及其击倒抗性基因(kdr)的基因型及分布特点,为白纹伊蚊化学防控提供理论依据。方法 于2023年7月—2024年12月在安顺市不同方位的居民区小型积水容器中采集白纹伊蚊幼蚊,带回实验室饲养至F1~F2代。采用幼虫浸渍法分别测定敏感品系及野外品系Ⅲ龄末Ⅳ龄初幼蚊对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯及氯菊酯的抗药性,采用接触筒法测定野外品系羽化后3~5 d未吸血雌蚊对3种拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性。酶标仪法检测未经生物测定的幼蚊非特异性酯酶(NSE)、多功能氧化酶(MFO)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的活性。提取完成生物测定后单只成蚊基因组DNA,PCR扩增电压门控钠离子通道(vgsc)基因部分片段,测序后与NCBI参考序列进行比对,分析V1016、I1532、F1534、D1763位点突变及频率分布情况。采用SPSS 31.0专业版软件分析幼蚊对每种杀虫剂抗性级别,并对酶活力分布进行Shapiro-Wilk检验及Wilcoxon秩和检验,使用分类回归树算法(CART)预测代谢抗性机制与击倒抗性机制对白纹伊蚊抗药性产生的相对重要性。结果 白纹伊蚊幼蚊对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯及氯菊酯的抗性倍数分别为38.47、18.21、209.17倍,均呈中高抗性水平;成蚊死亡率分别为2.04%(2/98)、2.06%(2/97)和7.00%(7/100),均为抗性种群。白纹伊蚊野外品系NSE、MFO、GST活力分别为356.17(321.65~497.79)nmol α-萘酚/(min·mg pr)、12.88(11.17~18.01)nmol cyt c/mg pr、128.70(116.63~153.03)nmol/(min·mg pr),均呈正偏态分布,是敏感品系的1.26、0.45和1.65倍,差异有统计学意义(Z = -4.030、-8.191、-7.371,均P < 0.01)。安顺市白纹伊蚊kdr基因除1763位点未发生突变外,在V1016、I1532、F1534位点均检测到突变,其中1016及1532位点基因型均以野生型纯合子为主( 65.97%、98.61%)、野生/突变型杂合子次之(30.9%、1.39%)、突变型纯合子所占比例最低(3.13%、0),而1534位点有3种等位基因,即野生型(TTC/F)和突变型(TCC/S和TGC/C),其中突变型(TCC/S)的基因频率高于野生型(TTC/F),该位点突变型纯合子(S/S)的基因型频率最高,为61.11%,野生/突变型杂合子(F/S)次之,为28.47%,野生型纯合子(F/F)基因型频率为7.64%,突变型纯合子(C/C)的基因型频率最低,为2.78%。3个位点联合突变共检测到10种基因型组合,其中T1型(V/V + I/I + S/S)组合占比最高(60.76%,175/288)、T2型(V/G + I/I + F/S)组合次之(25.69%,74/288)。CART分析结果显示,安顺市白纹伊蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂抗药性产生的相对重要性顺序依次为:1534位点突变(100%)、MFO活性(96.7%)、GST活性(66.6%),NSE活性(21.4%)、1016位点突变(16.4%)、1532位点突变(1.2%)。结论 安顺市白纹伊蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂已产生不同程度的抗药性,体内NSE、MFO及GST活性尚未显示出代谢型抗药性特征,kdr基因以F1534位点突变为主,抗药性产生的机制是代谢解毒酶活性变化和基因突变协同作用。

    1种蚊虫人工智能监测方法与3种传统蚊媒监测方法的比较研究
    钟晨晖, 骆田斌, 郑涵, 罗明宇
    2026, 44(3):  402-407.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.013
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    目的 比较使用1种蚊虫人工智能(AI)监测方法(智能捕捉器法)开展蚊媒监测与诱蚊灯法、双层叠帐法、BG-trap诱捕器法等3种传统蚊媒监测方法的捕蚊效果,为蚊虫AI监测的探索提供科学依据。方法 2025年5—9月,选择嘉兴市秀洲区一个总户数超过500户且蚊密度较高的小区,每周选择1 d同时使用诱蚊灯法(19∶00-次日7∶00)、双层叠帐法(15∶00-17∶00)、BG-trap诱捕器法(15∶00-17∶00)开展蚊媒监测,智能捕捉器法全天候进行监测,分别计算灯诱指数、叮咬指数、诱蚊指数及同时段智能捕捉器的成蚊密度。采用Kruskal-Wallis H检验对智能捕捉器法与3种传统蚊媒监测方法的捕蚊情况进行统计学分析,并分析4种监测方法的成蚊密度变化趋势,计算智能捕捉器法的鉴定准确率。结果 监测期间,智能捕捉器法、双层叠帐法、BG-trap诱捕器法和诱蚊灯法分别捕获成蚊4 620只、23只、250只和3 564只,其中白纹伊蚊捕获数分别为299只、16只、247只和88只,分别占各自捕蚊总数的6.47%、69.57%、98.80%和2.47%。在开展3种传统蚊媒监测的监测日,智能捕捉器法白天同时段(15∶00-17∶00)共捕获雌性成蚊2只,平均成蚊密度为0.05只/h,夜间同时段(19∶00-次日7∶00)共捕获雌性成蚊219只,平均成蚊密度为9.95只/夜;双层叠帐法共捕获雌性成蚊21只,平均叮咬指数为0.95只/h;BG-trap诱捕器法共捕获雌性成蚊150只,平均诱蚊指数为6.82只/h;诱蚊灯法共捕获雌性成蚊1 104只,平均灯诱指数为25.09只/(灯·夜)。智能捕捉器法、双层叠帐法和BG-trap诱捕器法在白天同时段的成蚊平均捕获率(0.05只/h、0.95只/h、6.82只/h)差异有统计学意义(H = 39.559,P < 0.05);智能捕获器法的成蚊平均捕获率均低于双层叠帐法和BG-trap诱捕器法(均P < 0.05);智能捕获器法在夜间同时段的成蚊平均捕获率(9.95只/夜)低于诱蚊灯法[25.09只/(灯·夜)](H = 6.377,P < 0.05)。智能捕蚊器法下成蚊的密度消长趋势与诱蚊灯法相似,峰值均在6月24日(第8周),密度分别为29只/夜、118.5只/(灯·夜)。智能捕捉器5月1日至9月29日后台数据成蚊数(4 620)多于人工收集计数(3 339),蚊种鉴定准确率为88.71%(估算值),雌雄鉴定准确率为90.03%(估算值)。结论 智能捕捉器法的蚊媒消长趋势虽诱蚊灯法相近,但同时段成蚊捕获率明显低于诱蚊灯法、双层叠帐法和BG-trap诱捕器法等3种传统方法,且后台计数与人工计数有差距,需进一步优化。

    基于全健康理念构建消除地区血吸虫病监测预警体系的实践与评估
    徐青华, 樊海笑, 杨涛
    2026, 44(3):  408-412.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.014
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    目的 探讨基于全健康(One Health)理念的血吸虫病智慧化监测预警体系在消除地区的应用架构与实施成效,为同类地区巩固血吸虫病消除成果提供参考。方法 2024年浙江省常山县建立由政府主导、多部门协作的血吸虫病监测预警组织架构,上线血吸虫病智慧化监测预警系统,对“人-动物-环境”开展一体化监测预警,涵盖人群主动监测、医院就诊监测、宿主动物监测及螺情监测等4个模块。收集分析该体系2024—2025年的多源监测数据,并与历史基线数据进行对比。收集传播途径、传染源、防治能力、人群脆弱性、自然因素等5大类的22个指标,计算10个行政村的风险顺位,评估其在风险识别、预警响应、控制措施等方面的效果。结果 成功构建了“政府主导、多部门协同、数据共享、智能研判”的常山县血吸虫病智慧化多点触发监测预警体系。实现了对人、家畜、宿主动物、钉螺、环境和输入性风险因素的全天候、自动化监测与数据汇聚。系统累计自动采集医防协同数据15.4万条,累计筛查重点人群25 303人次,预警响应时间较传统模式平均缩短3 d,从数据触发到预警信息推送至管理人员的平均时长缩短至8 h以内,重点环境精准查灭螺效率提升约40%,家畜监测覆盖率达到96.7%,成功预警并处置输入性风险事件11起。10个行政村的血吸虫病传播风险顺位中4个高于0.2,5个介于0.1~0.2,1个低于0.1。结论 基于全健康理念的智慧化监测预警体系能够有效整合碎片化信息,显著提升消除地区对血吸虫病输入与再发风险的早期感知、快速研判和精准干预能力,是迈向并维持可持续消除的必然选择和有力工具。

    苯酰甲硝唑体内外抗弓形虫效果的系统评价
    包碧波, 翟斌涛, 孙万奎, 陈国辉, 李钦照, 张继瑜, 陈世明, 孙晓林, 王泽祥
    2026, 44(3):  413-420.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.015
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    目的 系统评价苯酰甲硝唑(BMZ)对抗刚地弓形虫(简称弓形虫)效果和安全性。方法 非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)分别加入不同浓度的BMZ(50、100、200、400、500、600、800、1 000 μg/mL),细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测BMZ对Vero细胞的毒性。Vero细胞接种弓形虫速殖子后分别加入不同浓度的BMZ(50、100、200、400、500、600、800、1 000 μg/mL),CCK-8法检测BMZ对弓形虫的杀伤作用。Vero细胞接种弓形虫速殖子后加入50 μg/mL BMZ,通过吉姆萨染色和扫描电镜观察弓形虫速殖子数量和形态变化。昆明小鼠随机分为低剂量BMZ组(LD-BMZ组)、中剂量BMZ组(MD-BMZ组)、高剂量BMZ组(HD-BMZ组)、磺胺嘧啶钠组(SD-Na组)和阴性对照组(NC组),经腹腔接种1 × 104 个/mL弓形虫速殖子,4 h后口服灌胃连续给药5 d:LD-BMZ组、MD-BMZ组和HD-BMZ组分别给终浓度为12.5、25和50 mg/kg的BMZ,SD-Na组给终浓度为50 mg/kg的SD-Na,NC组给等体积玉米油。感染后第7天记录小鼠生存率,血细胞计数板计算小鼠腹水荷虫量。收集MD-BMZ组和NC组小鼠的心、肝、脾、肺、肾和脑组织,提取DNA后qPCR反应检测各组织荷虫量,制成病理组织切片后HE染色观察各组织病理学变化。利用GraphPad Prism 9软件进行数据分析并作图,差异显著性分析采用独立样本t检验或单因素方差分析。结果 细胞毒性实验结果显示,BMZ对Vero细胞的CC50为155.67 μg/mL;BMZ浓度为50 μg/mL时细胞存活率为(108.78 ± 1.00)%,100 μg/mL时降至(81.22 ± 3.34)%,将50 μg/mL作为BMZ最大安全浓度。体外抗虫实验结果显示,BMZ可抑制细胞内弓形虫速殖子的增殖,抑制率随浓度升高呈上升趋势;BMZ浓度为50 μg/mL时对弓形虫的抑制率为14.3%。吉姆萨染色结果显示,BMZ组细胞中弓形虫速殖子数量降低。扫描电镜观察结果显示,正常弓形虫速殖子呈典型的梭形或新月形结构,虫体轮廓完整、形态饱满、表面光滑;经BMZ处理后,弓形虫虫体结构完全丧失,轮廓模糊不清,细胞膜完整性被破坏。体内抗虫实验结果显示,感染弓形虫后第7天,LD-BMZ组、MD-BMZ组、HD-BMZ组、SD-Na组和NC组的小鼠存活率分别为2/10、3/10、2/10、2/10和1/10,差异无统计学意义(χ2 = 3.19,P > 0.05);腹水荷虫量分别为(15.00 ± 5.00)× 104、(6.67 ± 2.89)× 104、(6.67 ± 2.89)× 104、(8.33 ± 2.89)× 104和(1 766.67 ± 2.33)× 104个/mL,差异有统计学意义[F(4,10) = 123 320,P < 0.01]。qPCR结果显示,感染后第7天MD-BMZ组小鼠的心、肝、脾、肺、肾和脑中弓形虫相对荷虫量分别为2.32 ± 0.85、2.32 ± 0.76、1.00 ± 0.45、1.00 ± 0.52、4.46 ± 0.98、1.59 ± 0.63,均低于NC组的7.28 ± 1.25、7.11 ± 1.18、3.46 ± 0.95、7.28 ± 1.22、9.37 ± 1.36、8.67 ± 1.29(t = 6.56、6.83、4.68、9.47、5.86、9.86,P < 0.01)。HE染色显示,BMZ治疗可显著减轻脾、肾、肝脏的炎性细胞浸润与肉芽肿病变,且未引起明显药物相关性损伤。结论 BMZ在体内外均具有良好的抗弓形虫活性,中剂量时疗效优于SD-Na且安全性较高。

    拉萨市淡水螺吸虫感染现状及其系统发育分析
    赵霞玲, 龙敏, 夏晨阳, 单曲拉姆, 唐文强, 石斌
    2026, 44(3):  421-428.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.016
    摘要 ( )   HTML ( )   PDF (3509KB) ( )  
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    目的 了解拉萨市淡水螺种类和吸虫感染现状,并分析淡水螺及吸虫的系统发育情况。方法 2024年6—7月,在拉萨市城关区、堆龙德庆区、林周县、达孜区、曲水县等5个县(区)采集淡水螺样品,分类鉴定后压片镜检观察吸虫形态及感染情况。分别提取淡水螺和吸虫总DNA,PCR扩增螺线粒体细胞色素c氧化酶1(CO1)及吸虫内转录间隔区2(ITS2)序列,对扩增产物进行测序。用DNASTAR软件将测序结果进行拼接,所获得的目的序列提交至NCBI数据库,采用BLAST进行序列比对分析。用MEGA 11.0 软件以邻接法和最大似然法分别构建系统进化树。结果 共采集淡水螺1 022只,经形态学鉴定分为8属。压片镜检观察到吸虫幼虫的毛蚴、胞蚴、雷蚴、尾蚴及囊蚴多期发育形态。PCR扩增结果显示,淡水螺CO1、吸虫ITS2片段分别约为740 bp和630 bp,与预期目的片段长度一致。基因测序及序列比对结果显示,测序得到9种淡水螺CO1序列,与尖膀胱螺、狭萝卜螺、铜锈环棱螺、小土蜗、扁蜷螺属、Orientogalba viridis、耳萝卜螺、Radix makhroviTibetoradix khamensis序列一致性较高,分别为98.66%、99.23%、99.29%、100%、98.78%、98.91%、99.38%、100%、99.65%;系统发育分析形成8个分支,各属物种均单独聚为一支。测序得到10种吸虫ITS2序列,分别与默氏复口吸虫、叙利亚杯尾吸虫、异幻属吸虫、具斑斜睾吸虫、肝片形吸虫、大片形吸虫及鹿同盘吸虫的序列一致性均达100%;与土耳其斯坦东毕吸虫、卷棘口吸虫、背孔科吸虫序列一致性较高,分别为99.80%、99.84%、98.78%;系统发育分析形成9个分支,各属物种单独聚为一支,各分支均具有较高自展支持率,构成稳定的单系进化支。5个县(区)的淡水螺吸虫总感染率为59.59%(609/1 022),曲水县最高(73.80%,138/187),城关区最低(39.24%,31/79)。达孜区淡水螺种类最为丰富(7种),堆龙德庆区和林周县吸虫种类最多(各9种),曲水县检出淡水螺(1种)及吸虫(2种)种类均为最少。结论 拉萨市高海拔水域中淡水螺物种丰富,其体内寄生吸虫种类多、感染率高。

    微小隐孢子虫、蓝氏贾第鞭毛虫和牛艾美球虫胶体金免疫层析快速检测方法的建立
    乌云其木格, 道嘉昊, 蔡然, 付松青, 阮星宇, 单雨玮, 付雅婷, 胡薇
    2026, 44(3):  429-436.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.017
    摘要 ( )   HTML ( )   PDF (2045KB) ( )  
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    目的 建立一种快速、便捷且可靠的免疫学检测方法,用于家畜肠道寄生虫性腹泻的现场筛查与早期检测,以满足基层诊断和防控工作的实际需求。方法 分别扩增微小隐孢子虫cgd2-420、蓝氏贾第鞭毛虫α-15贾第蛋白(α-15 giardin)和牛艾美球虫热休克蛋白90(hsp90)等特异性抗原基因片段,并构建重组质粒。在大肠埃希菌中表达重组抗原蛋白并纯化,将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,并进行胶体金标记。将特异性单克隆抗体和羊抗鼠IgG抗体固定于硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质控线,构建胶体金免疫层析试纸条。通过优化胶体金标记条件、抗体标记量以及检测线和质控线的包被浓度,对试纸条的检测性能进行系统评价,包括灵敏度、特异性、重复性及稳定性。结果 构建的重组质粒表达了微小隐孢子虫cgd2-420、蓝氏贾第鞭毛虫α-15 giardin和牛艾美球虫HSP90重组蛋白,其相对分子质量分别约为40 000、33 000和50 000,与预期结果一致,且均具有良好的免疫原性。经BALB/c小鼠免疫、细胞融合与筛选,分别获得针对3种病原的4株、5株和5株特异性单克隆抗体,并进一步筛选出反应性能最优的单克隆抗体克隆株HP2、CG5和JD5,用于试纸条构建。经反应条件优化,确定胶体金标记体系在加入5 μL、浓度为0.2 mol/L的K₂CO₃时稳定性最佳,抗体的最佳标记量为20 μg,检测线和质控线的最优包被浓度分别为2 mg/mL和1.5 mg/mL。性能评价结果显示,该免疫层析试纸条的阳性样品最低可检稀释倍数为1∶64,对非靶标病原体未出现交叉反应,批内及批间检测结果一致,在4 ℃干燥条件下保存60 d后仍可保持稳定的检测性能。对80份临床样品进行检测表明,试纸条检测结果与PCR方法具有较高一致性,其中牛艾美球虫、微小隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫的符合率分别为93.75%、96.25%和96.25%。结论 成功建立了一种基于胶体金免疫层析技术的家畜肠道原虫快速检测方法,该方法操作简便、检测快速且性能稳定,适用于微小隐孢子虫、蓝氏贾第鞭毛虫和牛艾美球虫的现场筛查与早期诊断,为家畜寄生虫性腹泻的早期识别和防控提供了有力的技术支持。

    教学研究
    全健康融入血吸虫病教学的课程优化:基于人-动物-环境整合框架的实证研究
    董珂, 黄洁雯, 李擎天, 吕超, 许静, 周晓农, 郭晓奎, 朱泳璋
    2026, 44(3):  437-442.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.018
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    目的 在我国血吸虫病防控进入新阶段而寄生虫学核心教学内容总体稳定的背景下,基于建构主义(constructivism)和情境学习(situated learning)等理论,探索在现有“人-动物-环境”教学框架基础上系统融入全健康理念的具体路径,论证其在认知建构与能力培养层面的依据,并形成可操作的教学设计范式。方法 依托现行人体寄生虫学课程,在不调整血吸虫病核心知识点与学时安排的前提下,以建构主义、情境学习及建构性对齐(constructive alignment)为指导,通过文献分析与教学现状梳理,围绕生活史、致病机制与公共卫生防控三个模块重组“人-动物-环境”相关内容,构建支持主动建构与情境化学习的知识结构与课堂活动链,并设计情境导入、案例分析、小组情景模拟与多元评价等环节。以各学年实验班与对照班在病原生物学期末试卷中“血吸虫病考题”得分/寄生虫学考题总分的百分比为评价指标;组间比较前进行方差齐性检验,组间均值比较采用Welch两独立样本t检验(双侧)。结果 构建以血吸虫生活史为主线、符合认知负荷分配的“污染源-水环境-螺栖生境-人/动物暴露-疾病负担”多层次表征图谱,在保留教材核心知识点的基础上,将人群、动物宿主与环境因素系统嵌入,为图式整合提供支撑;据此形成“人群-动物宿主-生态环境”三界融合的全健康授课框架,并在致病机制模块引入“生态致病机制”分析视角,作为联结病理生理与生态流行病学知识的教学工具。连续4个学年评价指标结果显示:2021年实验班为73.80%,与对照班的70.32%差异无统计学意义(t = 0.800,P > 0.05);2022—2024年实验班分别为82.04%、79.46%、73.06%,均高于对照班的75.78%、70.15%、65.16%(t = 2.059、2.604、2.645,均P < 0.05),实验班优势维持6~9个百分点。结论 在不改变血吸虫病基本教学内容的前提下,基于建构主义与情境学习对现有“人-动物-环境”框架进行结构化梳理与情境化强化,可将全健康理念转化为组织教学内容与学习活动的实施框架,而非简单叠加视角。与常规授课相比,该模式授课效果有明显优势,为提升系统性理解与综合防控思维提供了可行教学方案。

    研究简报
    广元市白纹伊蚊电压门控钠离子通道I1532T突变频率调查分析
    逯小强, 杨滨瑜, 赵琼瑶, 孔新明, 刘艳春, 贾永朝
    2026, 44(3):  443-447.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.019
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    为了解四川省广元市白纹伊蚊电压门控钠离子通道(vgsc)基因I1532T突变频率,于2024年6—7月在广元市7个县(区)居民区外以CO₂灯诱法采集白纹伊蚊成蚊,提取基因组DNA,聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测白纹伊蚊vgsc 1532位点的基因型。通过测序样品验证PCR-RFLP技术的检测效果。使用Genepop 4.7进行种群哈代温伯格平衡(HWE)检验。使用SPSS 25.0对各县(区)间等位基因频率进行Fisher精确检验。共检测白纹伊蚊208只。PCR结果显示,所有样品均扩增出约220 bp的条带,与预期大小相符。广元市vgsc野生型1532I/I纯合子、野生型/突变型1532I/T杂合子、抗性1532T/T纯合子频率分别为87.98%(183/208)、10.58%(22/208)和1.44%(3/208)。7个县(区)中,剑阁县、利州区、青川县、旺苍县、昭化区野生型/突变型1532I/T杂合子频率分别为12.50%(4/32)、9.38%(3/32)、17.86%(5/28)、28.13%(9/32)、1/16,朝天区和苍溪县未发现;利州区和旺苍县抗性1532T/T纯合子频率分别为6.25%(2/32)和3.13%(1/32),其他县(区)未发现。广元市vgsc野生型1532I和突变型1532T等位基因的频率分别为93.27%(388/416)、6.73%(28/416)。朝天区、苍溪县、剑阁县、利州区、青川县、旺苍县和昭化区突变型1532T等位基因频率分别为0(0/64)、0(0/72)、6.25%(4/64)、10.94%(7/64)、8.93%(5/56)、17.19%(11/64)、3.13%(1/32),差异有统计学意义(P < 0.05)。HWE检验显示,利州区种群显著偏离遗传平衡(P < 0.05),剑阁县、青川县和旺苍县种群均符合遗传平衡(P > 0.05),其余3个县(区)因未发现1532T突变(朝天区和苍溪县)或突变频率低(昭化区),不适合做HWE检验。验证结果显示,PCR-RFLP与Sanger测序结果符合率100%。本研究发现广元市白纹伊蚊种群vgsc I1532T突变频率较高,并在利州区和旺苍县检测到抗性纯合子个体。

    1例蓝氏贾第鞭毛虫感染者的病原诊断与遗传进化分析
    余树坤, 刘浪, 崔紫妍, 谭雅心, 黄顺楷, 陶志阳
    2026, 44(3):  448-453.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.020
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    为明确1例腹泻患者感染的蓝氏贾第鞭毛虫(简称“贾第虫”)的感染来源和遗传特征,收集该患者的新鲜粪样,综合采用镜检、实时荧光定量PCR和巢式PCR方法进行病原检测,对小亚基核糖体RNA(SSU rRNA)、磷酸丙糖异构酶(tpi)、谷氨酸脱氢酶(gdh)、β-贾第素(bg)和翻译延伸因子1α(ef1α)进行宏基因组测序并分析,通过序列比对及系统进化树构建分析,开展多位点基因分型与遗传进化研究。镜检与实时荧光定量PCR均确认贾第虫感染。巢式PCR中仅gdhef1α基因扩增成功,宏基因组测序成功检测到SSU rRNA基因序列。多位点基因分型显示,本研究获得的分离株DXH001为集聚体B型,未发现混合感染。系统发育分析表明,DXH001分离株的gdh基因与比利时人源株EU847734的序列一致性达100%,属BⅣ亚型;ef1α基因与澳大利亚人源分离株HQ179598的序列一致性达98.43%,SSU rRNA基因与美国人源株U09491的序列一致性达90.45%,均聚类于B型分支。SSU rRNA基因与人源参考序列U09491相比存在35个碱基替换和5个缺失,其序列差异可能主要与样本中目标序列丰度较低,导致测序数据量不足有关;gdhef1α基因的变异较为保守,未引起重要功能改变。本研究通过多位点基因分析鉴定DXH001株为蓝氏贾第鞭毛虫集聚体BⅣ亚型,提示该亚型存在跨地域传播风险。宏基因组测序在低丰度靶标检测中展现出较高灵敏度,可作为常规分子分型的有效补充。

    2024—2025年浙江省杭州市来华留学生疟原虫检测分析
    吕沁风, 陈明环, 廖静, 廖颖婷, 张静, 陈淑丹, 娄家怡, 何蕾, 罗鹏
    2026, 44(3):  454-456.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.021
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    收集2024—2025年夏秋季在杭州国际旅行卫生保健中心体检的疟疾高流行区首次来华留学生全血样品,采用疟原虫抗原胶体金法、血涂片镜检法及荧光定量PCR(qPCR)法进行检测,对阳性病例进行基础信息收集和流行病学调查。共检测来自尼日利亚等20个国家来华留学生530人,疟原虫抗原胶体金法检出阳性22例,阳性率4.2%(22/530),来源地分别为尼日利亚(16例),坦桑尼亚(2例),几内亚(2例),刚果民主共和国(1例),刚果共和国(1例)。22例阳性者中,qPCR检出恶性疟原虫阳性11例,血涂片镜检出恶性疟原虫阳性1例。流行病学调查显示,所有阳性病例体检时均体温正常、无临床症状。1例镜检阳性后住院治疗,1例体检后因发热住院治疗。疟疾流行区来华留学生存在无症状感染者,应加强疟疾流行区来华留学生疟疾监测和疟疾防治健康教育,早发现早治疗,降低疟疾境外输入风险。

    病例报告
    原发性卵巢细粒棘球蚴病误诊为腹腔细粒棘球蚴病1例
    李云璋, 谢娜娜, 柴金萍, 欧宏宇, 刘林勋, 潘洪帅, 阿吉德
    2026, 44(3):  457-460.  doi:10.12140/j.issn.1000-7423.2026.03.022
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    患者,女性,70岁,牧民,青海省共和县人。2025年11月8日因“下腹部疼痛不适2年,加重4 d”就诊于青海省人民医院。患者有明确长期牧区居住史。腹盆腔CT示:腹盆腔见巨大囊性占位,内多发子囊及条带状高密度影,最大截面约225 mm × 85 mm,右侧输尿管受压伴肾盂积水;胆囊结石;左肾囊肿。盆腔彩超示:剑突下至盆腔内可见大小约225 mm × 85 mm囊性包块,边界清,其内可见多个子囊,内呈“卷心菜”样改变。入院诊断为腹腔棘球蚴病、泌尿系感染、慢性乙型病毒性肝炎。结合影像学表现及临床症状,于2025年11月13日在全麻下行剖腹探查术 + 棘球蚴包囊完整切除术 + 盆腔粘连松解术。术中见腹盆腔巨大囊性肿物,大小约22 cm × 8 cm,囊壁厚,呈乳白色。探查发现肿物蒂部来源于右侧卵巢,包囊主体向上腹部生长,与大网膜、肝脏下缘、右肾及右侧输尿管致密粘连,子宫及左侧附件外观正常。术中诊断修正为右侧原发性卵巢棘球蚴病,遂行右侧卵巢棘球蚴包囊切除术。术后病理检查确诊为原发性卵巢棘球蚴病。患者术后恢复良好,于术后第9天出院,出院后规律口服阿苯达唑(200 mg/次,每日2次)并定期随访肝胆胰脾彩超及肝功能,随访至今无复发及手术相关并发症。