收集、整理监测报告管理系统中2023年全国31个省（直辖市、自治区，未包括台湾、香港和澳门地区）和新疆生产建设兵团上报的疟疾流行病学个案调查表，对疟疾疫情特征进行统计分析。2023年全国报告疟疾病例2 488例，较2022年（845例）增加了194.4%。其中境外输入性病例2 487例，输血感染病例1例；恶性疟1 561例（占62.7%，1 561/2 488），间日疟615例（占24.7%，615/2 488），卵形疟234例（占9.4%，234/2 488），三日疟66例（占2.7%，66/2 488），混合感染12例（占0.5%，12/2 488）；中国籍2 313例（占93.0%，2 313/2 488），外国籍175例（占7.0%，175/2 488）；男女性别比为11.6∶1；30~39岁年龄组的病例最多（占29.1%，725/2 488）。31个省（直辖市、自治区）和新疆生产建设兵团均有疟疾病例报告，病例数位居前5位的省份依次为云南（398例）、河南（234例）、广西（195例）、山东（178例）和广东（174例），累计报告1 179例（占47.4%，1 179/2 488）。全国24个省份共报告危重症病例85例（占3.4%，85/2 488），死亡病例12例（占0.5%，12/2 488）。我国已连续7年无本土原发蚊传疟疾病例报告，但输入病例及其再传播风险持续存在。应继续加强监测与响应，及时发现和规范治疗疟疾病例，减少危重症或死亡病例，防止出现本地再传播。
新发传染病（EID）是指新出现的或既往已经存在但发病率或影响范围迅速增加的传染性疾病。受气候变化、病原体进化等因素影响，EID发生频率及形成大流行的风险在不断增加。新型冠状病毒感染等疾病的暴发已经对全球健康、经济和社会稳定造成了巨大冲击。这些疾病的全球大流行不仅直接影响人类健康，还给经济发展、贫困减少和教育等方面带来诸多负面影响。为了有效应对EID的挑战，国家和国际组织采取了一系列综合性防控策略，包括降低病原体溢出风险、建立综合性监测与预警系统、协调部门间的合作与信息共享以及以全健康（One Health）理念开展跨部门联防联控。当下EID防控依然面临诸多挑战，本文总结EID大流行所带来的挑战、国家及国际层面的应对防控策略以及当前防控的进展和具体案例，为将来应对EID大流行提供经验参考。
目的 了解2023年全国内脏利什曼病疫情状况，为制定防治策略和措施提供科学依据。 方法 收集2023年中国疾病预防控制中心传染病报告信息管理系统报告的全国内脏利什曼病病例信息，剔除疑似病例、重复病例和皮肤利什曼病病例，建立数据库。采用Microsoft Excel 2016软件对内脏利什曼病三间分布进行描述性流行病学分析。 结果 2023年全国15个省（自治区、直辖市）的125个县共报告内脏利什曼病病例299例，发病率为0.02/10万，较2022年上升25.1%；其中犬源型（山丘型）内脏利什曼病病例237例，野生动物源型（荒漠型）内脏利什曼病病例7例，人源型内脏利什曼病病例1例，非流行区输入性病例54例。报告病例主要分布于山西（114例）、河南（54例）和陕西（38例）等3个省，合计占全国报告病例总数的68.9%（206/299）。125个县中，74个县属于流行区，共报告本地感染病例245例；其余51个县属于非流行区，共报告输入性病例54例。74个流行县中，山西省平定县、阳泉市郊区、襄汾县，河北省井陉县，陕西省华州区，河南省林州市和新安县等7个县为内脏利什曼病主要流行县，分别报告病例24、16、10、13、12、12和10例，合计报告病例占全国总病例数的32.4%（97/299）。山西省洪洞、黎城、临县、石楼、五台，河北省曲阳、阜平、涞源、平山、涉县、唐县、易县，河南省嵩县、禹州，甘肃省成县、康县，北京市延庆和陕西省澄城等18个县为内脏利什曼病复燃流行县，共报告本地感染病例23例。内脏利什曼病发病高峰为3月。男女病例比为1:0.4。农民占全部病例数的57.2%（171/299）。病例主要分布于45~74岁年龄段 (占64.5%)。 结论 我国内脏利什曼病呈低度流行态势，但发病率呈快速上升趋势，流行区范围逐渐扩大，农民是我国内脏利什曼病高风险人群，应加强对内脏利什曼病的监测和防控。
目的 对分离自齐齐哈尔市嫩江流域淡水螺体内的4种吸虫幼虫进行分子生物学鉴定。 方法 2023年3—7月在齐齐哈尔市嫩江浏园段水域内采集淡水螺，分类鉴定后压碎螺壳，显微镜下观察内脏团，分离螺体内的吸虫幼虫。分别提取不同吸虫幼虫总DNA，PCR扩增吸虫幼虫内转录间隔区2（ITS2），对扩增产物进行测序，利用Contig Express软件拼接后在NCBI网站进行序列比对。用MEGA 11.0软件以邻接法构建系统进化树并计算遗传距离。 结果 共采集到7种淡水螺（2 771只），其中阳性螺3种，分别为黑龙江短沟蜷（282只）、中国圆田螺（709只）和绘环棱螺（142只）。共检出4种吸虫幼虫，每只淡水螺只寄生1种吸虫幼虫，分别为寄生于黑龙江短沟蜷和绘环棱螺体内的幼虫a（阳性率25.23%，107/424），寄生于中国圆田螺体内的幼虫b（阳性率2.82%，20/709），寄生于黑龙江短沟蜷体内的幼虫c（阳性率0.70%，2/282）和寄生于中国圆田螺体内的幼虫d（阳性率0.56%，4/709）。幼虫a~d的ITS2目的序列扩增长度分别约为523、701、960和554 bp。基因测序及序列比对结果显示，幼虫a ITS2序列与Notocotylus ephemera（GenBank：OP720890.1）序列一致性最高，为98.49%；与N. ephemera和Notocotylidae sp.的遗传距离最近，均为0.014，推测幼虫a为背孔科吸虫。幼虫b ITS2序列与卷棘口吸虫（GenBank：GQ463130.1）序列一致性最高，为94.56%；与卷棘口吸虫的遗传距离最近，为0.085，推测幼虫b为棘口科棘口属吸虫。幼虫c ITS2序列与Echinochasmus suifunensis（GenBank：MT447049.1）序列一致性最高，为99.82%；与E. milvi的遗传距离最近，低于0.001，推测幼虫c为棘口科棘隙属吸虫。幼虫d ITS2序列与马尔科维奇侧殖吸虫（GenBank：OP106430.1）序列一致性最高，为92.36%；与Asymphylodora parasquamosa的遗传距离最近，为0.090，推测幼虫d为单睾科侧殖属吸虫。 结论 齐齐哈尔嫩江流域内淡水螺体内可能寄生有背孔科吸虫、棘口科棘口属和棘隙属吸虫、单睾科侧殖属吸虫，提示可能危害鱼类、家禽及哺乳动物健康。
目的 了解我国多个地区麦穗鱼体内华支睾吸虫囊蚴的感染情况及其形态学和分子生物学鉴定。 方法 2022年8月至2024年1月，在华东、华南、华中、西北和西南地区水域的12个采样点采集麦穗鱼。消化鱼肉后，分离吸虫囊蚴进行形态学鉴定。每个采样地点选取部分阳性麦穗鱼中的囊蚴，提取单个囊蚴DNA，PCR扩增16S rDNA并测序，采用BLAST进行序列比对，用MEGA7和Fasttree2以最大似然法构建系统进化树。取镜检吸虫囊蚴阳性的麦穗鱼饲喂12只SD大鼠（约200个囊蚴/鼠）和10只昆明小鼠（约100个囊蚴/鼠）。感染后25、90、300 d，分别收集大鼠和小鼠粪样中的虫卵和肝胆管中的成虫，并进行鉴定形态。采用Microsoft Excel 2021软件对数据进行统计学分析，组间比较采用Fisher精确检验。 结果 共采集麦穗鱼665尾，检出吸虫囊蚴感染277尾，感染率为41.6%。麦穗鱼囊蚴感染率较高的地区分别为广西横州（6/6）、河南濮阳（100%，22/22）、山东烟台（98.4%，122/124）、安徽阜阳（75.0%，24/32）、陕西汉中（49.2%，95/193）、福建宁德（5/19）。分离的吸虫囊蚴经形态学鉴定为华支睾吸虫囊蚴。PCR扩增和测序结果显示，扩增出的约400 bp大小条带为华支睾吸虫16S rDNA。序列比对结果显示，与华支睾吸虫（GenBank登录号：MT607652.1）16S rDNA序列一致性为100%。系统进化树结果显示，获得的囊蚴与华支睾吸虫聚为一支。感染后25、90 d，小鼠粪样中未检出虫卵，胆管和胆囊中未检出成虫；大鼠粪样中检出虫卵。感染后300 d，2只大鼠粪样检出虫卵，3只大鼠肝胆管中分离到成虫。虫卵和成虫均符合华支睾吸虫形态学特征。 结论 广西横州、河南濮阳、山东烟台、安徽阜阳、陕西汉中和福建宁德地区的麦穗鱼存在不同程度的华支睾吸虫感染。16S rDNA基因结合形态学特征可以鉴定麦穗鱼中的华支睾吸虫囊蚴。
患者，男，40岁，上海市居民。2018年7月因“急性腹泻”就诊于同济大学附属杨浦医院急诊内科。患者自述水样便腹泻1 d。患者发病前1个月有巴拿马旅行史，无饮生水和食生肉史。血常规检查结果C反应蛋白升高（16.17 mg/L），其余指标正常，提示感染。患者粪样涂片镜检查见蓝氏贾第鞭毛虫包囊和滋养体。间接免疫荧光试验检测结果显示，蓝氏贾第鞭毛虫滋养体被患者血清（1∶50）识别，虫体表面有较强的荧光染色。提取患者粪样DNA，PCR扩增出147 bp的蓝氏贾第鞭毛虫特异性18S核糖体基因片段，该片段序列与蓝氏贾第鞭毛虫集聚体A（GenBank登录号：KY706490）的序列一致性为100%，在邻接法构建的系统进化树上与蓝氏贾第鞭毛虫集聚体A聚在同一分支上。结合患者临床表现和相关检查结果，诊断患者为蓝氏贾第鞭毛虫感染。临床给予患者甲硝唑（每日20 mg/kg，分3次口服，连服7 d）治疗。2周后复查血常规和粪便常规，均恢复正常，患者病情好转。
目的 了解2017—2022年山东省输入性疟疾流行病学特征，为进一步做好防止输入再传播工作提供科学依据。方法 从中国疾病预防控制信息系统传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统中收集2017—2022年山东省输入性疟疾疫情、病例流行病学个案调查等资料，建立数据库，采用SPSS 26.0软件对疟疾病例分类、感染来源、流行病学特征、病例诊治情况等进行统计分析，率的比较采用χ2检验，时间间隔分布的比较用非参数检验，利用SaTScan v10.1软件对疟疾病例的空间聚集性进行扫描分析，利用GraphPad Prism 8.3.0软件进行绘图。结果 2017—2022年，山东省共报告输入性疟疾820例，均为境外输入性病例。新冠疫情前（2017—2019年）、新冠疫情期间（2020—2022年）分别报告670例、150例。820例均为实验室确诊病例，恶性疟、卵形疟、间日疟、三日疟病例分别占69.5%（570/820）、19.0%（156/820）、7.3%（60/820）和4.1%（34/820），无混合感染和未分型病例。感染来源地以非洲为主（95.9%，786/820）。全省16个市均有病例报告，济宁、烟台、威海、青岛和济南5个市共报告511例，占62.3%（511/820）。空间扫描分析发现7个病例聚集区，其中威海环翠、烟台牟平等13个县（市、区）为一类聚集区（相对危险度 = 3.98，P < 0.01）。 按报告地统计，全省共191例跨地区就诊病例，占23.3%（191/820）。全省18所疟疾救治定点医疗机构共报告本市就诊病例421例（55.3%，421/762）。患者发病到初诊、初诊到确诊时间间隔中位数分别为1、0 d。患者初诊单位为省级、市级、县级、县级以下医疗机构的分别占9.9%（81/820）、36.1%（296/820）、31.5%（258/820）和16.6%（136/820），疟疾诊断正确率分别为88.9%（72/81）、84.1%（249/296）、76.4%（197/258）和5.2%（7/136）；初诊单位为其他机构（疾控机构、检验检疫机构等）的占6.0%（49/820），诊断正确率为87.8%（43/49）。不同机构疟疾诊断正确率差异有统计学意义（χ2 = 321.959，P < 0.01）。共报告重症疟疾74例，占9.0%（74/820），死亡病例5例。结论 2017—2022年，山东省输入性疟疾病例多、分布广，存在输入再传播的风险。
目的 分析云南大理地区人群带绦虫感染和囊尾蚴抗体的流行特征及影响因素，为带绦虫和囊尾蚴病的防控提供科学依据。 方法 2023年10—11月，在大理州带绦虫病和囊尾蚴病历史流行区选择大把关村、伙山村、金刚村和清水沟村开展调查，采用整群随机抽样的方法，抽取调查村3周岁以上常住居民为调查对象。通过问卷调查收集是否有排节片史、皮下结节、癫痫和剧烈头痛等症状以及饮食习惯、卫生行为和居住环境等信息；采集究对象粪样进行改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法，一粪两检）检测，对粪检阳性或近一年有排节片史者采用槟榔南瓜子法进行药物诊断性驱虫。以粪检阳性或驱出虫体者为阳性感染者，计算带绦虫感染率。用囊尾蚴（猪带绦虫）IgG抗体检测试剂盒检测血清囊尾蚴特异性抗体。采用卡方检验、Fisher确切概率法和logistic回归分析对人群带绦虫感染和血清囊尾蚴抗体阳性的影响因素进行统计学分析。 结果 4个村共1 842人参与问卷调查，近一年排节片者39人（占2.1%）。粪检1 533人，粪检阳性者25人（占1.6%）。共38人接受诊断性驱虫，33人驱出完整虫体（1名粪检阳性者未驱出虫体），人群带绦虫感染率为1.8%（34/1 842）。金刚、伙山、大把关和清水沟村人群带绦虫感染率分别为2.1%（10/475）、1.3%（6/450）、2.7%（12/450）、1.3%（6/467），差异无统计学意义（χ2 = 3.31，P > 0.05）。男性感染率为2.6%（22/848），女性为1.2%（12/994）（χ2 = 4.90，P < 0.05）；30~59岁年龄组（2.8%，24/862）、苗族（1/2）和农牧民（3.0%，28/944）等人群的感染率在各组中均为最高（χ2 = 10.10，P < 0.01；Fisher = 26.04，P < 0.01；χ2 = 13.47，P < 0.01）。人群血清囊尾蚴抗体阳性率为9.2%（82/887）。清水沟、大把关、伙山和金刚村的血清抗体阳性率分别为12.7%（20/157）、4.7%（11/236）、10.4%（26/251）、10.3%（25/243），差异有统计学意义（χ2 = 8.88，P < 0.05）。男性阳性率为9.2%（36/393），女性为9.3%（46/494）（χ2 = 0.01，P > 0.05）。60岁以上年龄组（2.8%，24/862）、农牧民（11.2%，61/546）和文盲（15.0%，35/234）等人群的血清抗体阳性率在各组内均为最高（χ2 = 8.66、12.37、6.47，P < 0.05 或 0.01）。单因素分析结果显示，不同性别、年龄、民族、职业和食用生猪制品（生猪皮、猪肉、猪肝）是带绦虫感染的影响因素（χ2 = 4.86、10.10、26.04、13.48、5.72，均为P < 0.05）。每月食用生猪制品的次数与带绦虫感染率之间存在正相关关系[OR = 1.135，95% CI：（1.023，1.259）]；不同年龄、文化程度、职业、是否使用自来水及食用生猪制品是血清囊尾蚴抗体阳性率的影响因素（χ2 = 8.66、12.37、6.47、3.58、2.20，均为P < 0.05）。多因素分析结果显示，男性[OR = 2.047，95% CI：（1.001，4.189）]、食用生猪制品[OR = 4.986，95% CI：（1.166，21.321）]是人群感染带绦虫的危险因素，低文化程度[OR = 2.051，95% CI：（1.183，3.557）]是人群血清囊尾蚴抗体阳性的危险因素，使用自来水[OR = 0.320，95% CI：（0.124，0.824）]是人群血清囊尾蚴抗体阳性的保护因素。 结论 云南大理地区人群带绦虫感染率和血清囊尾蚴抗体阳性率较高，食用生猪制品和男性是带绦虫感染的危险因素；自来水的使用和高文化程度是血清囊尾蚴抗体阳性的保护因素。
目的 分析上海市公共卫生临床中心输入性疟疾病例流行病学特征，为上海市疟疾消除后输入性疟疾的监测与防治提供科学依据。方法 收集上海市公共卫生临床中心信息管理系统中2012—2022年的疟疾报告病例资料，采用描述性流行病学方法对报告病例的感染虫种、感染来源、三间分布、就诊和确诊情况等进行分析。结果 2012—2022年上海市公共卫生临床中心共报告疟疾病例248例，均为境外输入病例。中国籍病例228例（占91.9%），外国籍病例20例（占8.1%）。报告病例以恶性疟为主（83.9%，208/248），2017年报告病例数最多（16.5%，41/248）。报告病例感染来源主要为非洲国家（229例，占92.3%），其余为亚洲国家（13例，占5.2%）、南美洲国家（1例，占0.4%）和未知地区（5例，占2.0%）。各月均有病例报告，输入病例数量无季节性分布。报告病例现住址在外地的为126例，上海114例，未知地区8例，其中上海以浦东新区（24例）、闵行区（14例）和松江区（11例）的疟疾报告病例数居前3位。男性报告病例234例（占94.4%），女性报告病例14例（占5.6%），男女性别比为17∶1；报告病例年龄主要集中在20~49岁，占81.9%（203/248）；职业分布以外出务工人员为主，占75.4%（187/248）。于非上海市医院和上海市医院就诊的病例总数分别为14、234例，其中上海市三甲医疗机构的疟疾诊出率为96.3%（154/160），上海市三甲以下医疗机构疟疾诊出率为81.1%（60/74）。248例报告病例从发病到初诊的时间间隔均数为4.5 d，中位数为2（0，4）d，其中3 d以内的189例（占76.2%），4~10 d的51例（占20.6%），10 d以上的8例（占3.2%），不同年份病例从发病至初诊中位时间差异有统计学意义（F = 6.39，P < 0.05）。248例报告病例从初诊至确诊时间间隔均数为1.2 d，中位数为1（0，2）d，初诊当天确诊112例，3 d内确诊共223例，超过3 d确诊25例，不同年份病例从初诊至确诊中位时间差异无统计学意义（F = 1.24, P > 0.05）。结论 2012—2022年上海市公共卫生临床中心报告的疟疾病例均为境外输入病例，以恶性疟为主，感染来源主要为非洲国家。上海市应持续加强输入性病例监测和处置，提升医疗机构诊治能力，加强出境人员健康教育，以巩固消除疟疾成果。
目的 了解云南省洱源县人群芽囊原虫和卡耶塔环孢子虫的感染情况及其分子特征，为寄生虫病防治工作提供参考。方法 2022年7—8月在云南省洱源县5个村庄采用简单随机抽样法抽取1岁以上的常住居民作为调查对象，采集调查对象新鲜粪样，收集其社会人口学信息。提取粪样DNA，使用普通PCR和巢式PCR分别扩增芽囊原虫和卡耶塔环孢子虫的核糖体小亚基RNA（SSU rRNA）基因，分析人群感染情况。对阳性PCR扩增产物进行双向测序，在NCBI进行BLAST比对分析，鉴定虫种和基因亚型，采用MEGA 11.0软件以邻接法构建系统进化树。用SPSS 21.0软件进行统计学分析，感染率的比较采用χ2检验或Fisher确切概率法。结果 共采集100份居民粪样。芽囊原虫感染率为14.0%（14/100）。其中，男性、女性芽囊原虫感染率分别为14.6%（6/41）和13.6%（8/59）；60岁以上的居民和家庭人口数为6人及以上的感染率最高，分别为18.5%（5/27）、3/15；未接受过教育和小学文化者感染率较高，分别为2/11和17.0%（8/47）；感染者均为农民。不同性别、年龄、家庭人口数、教育水平和职业等人群的芽囊原虫感染率差异均无统计学意义（χ2 = 0.023、2.730、2.235、1.404、1.668，均P > 0.05）。卡耶塔环孢子虫感染率为2.0%（2/100），感染者均为女性农民。未查见芽囊原虫和卡耶塔环孢子虫的混合感染。14份芽囊原虫阳性样本中扩增出ST1和ST3亚型序列各7条，其中7条ST1序列有25个核苷酸差异，5条与芽囊原虫（GenBank：ON932511、KU147348、MK801408、MW728079、OR754904）的序列一致性分别为100%，2条为新序列（GenBank：PP439288、PP439289），与芽囊原虫（GenBank：OP725964、KU147333）一致性为99.8%；7条ST3序列有1个核苷酸差异，与芽囊原虫（GenBank：KU147372、MK801366）的序列一致性分别为100%。扩增获得的2条卡耶塔环孢子虫序列相同，与卡耶塔环孢子虫（GenBank：KY770755）的序列一致性为100%。系统进化树显示，本研究中芽囊原虫分别与ST1和ST3亚型聚在一大分支上，卡耶塔环孢子与人源卡耶塔环孢子虫聚在同一分支上。结论 云南省洱源县人群存在芽囊原虫和卡耶塔环孢子虫感染。芽囊原虫感染率较高，感染亚型为ST1和ST3亚型，ST1的遗传变异程度较高。
目的 从单细胞水平探究细粒棘球蚴感染小鼠不同时期肝组织微环境细胞中T细胞亚型组成及其转录谱特征。 方法 从课题组前期细粒棘球蚴感染后1个月（1只）、3个月（1只）和6个月（2只）的BALB/c小鼠和健康小鼠（1只，对照组）肝组织的单细胞转录组测序数据集（中国国家生物信息中心组学原始数据归档库：CRA008416）（https://ngdc.cncb.ac.cn/gsa）中提取测序数据进行质控。采用统一流形逼近与投影（UMAP）算法对单细胞群聚类进行可视化作图，采用共享最近邻相似度（SNN）聚类算法分析最优细胞分群。采用SingleR软件包基于immgen参考数据集对细胞亚群进行细胞类型注释。使用Seurat软件包的FindMarkers函数分析不同时期感染小鼠和对照组小鼠的调节性T细胞（Treg）和CD8+ T细胞的差异表达基因（DEG）。利用基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分别对DEG进行功能富集分析和通路富集分析。 结果 质控后获得37 760个细胞，人工优化后分为8种类型细胞。对T细胞重聚类后获得12个细胞群。注释后鉴定获得7种T细胞，包括CD4+初始T细胞、CD4+效应T细胞、Treg、CD8+初始T细胞、CD8+ T细胞、增殖性T细胞、γδ T细胞。在细粒棘球蚴感染1个月后T细胞各亚群占比无明显变化，感染后3个月增殖性T细胞（11.91%，56/470）和Treg（13.40%，63/470）占比均高于对照组（3.51%，38/1 082；4.34%，47/1 082），感染后6个月CD8+ T细胞占比（30.20%，1 145/3 791）高于对照组（15.43%，167/1 082）。Treg在感染后3个月高表达肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8（Tnfaip8）、Maf、伊卡洛斯家族锌指3（Ikzf3）等维持Treg的基因；CD8+ T细胞在感染后6个月高表达白细胞表面分化抗原40配体（Cd40lg）、类几丁质酶3（Chil3）、分泌型磷蛋白1（Spp1）等耗竭性基因。GO分析结果显示，感染后3个月Treg的DEG主要富集于转化生长因子β受体复合物组装、正调节T细胞活化、环磷酸腺苷介导的信号传导等通路；感染后6个月CD8+ T细胞的DEG主要富集调节血管内皮生长因子受体、色氨酸分解代谢过程、细胞外基质细胞信号等通路。KEGG分析结果显示，感染后3个月Treg的DEG主要参与原发性免疫缺陷和Ras信号传导途径等通路；感染后6个月CD8+ T细胞DEG主要参与脂肪酸代谢、谷胱甘肽代谢、叶酸代谢等通路。 结论 细粒棘球蚴感染后3个月、6个月小鼠的肝组织T细胞亚型存在差异，感染后3个月Treg占比增加，感染后6个月CD8+ T细胞占比增加，Treg、CD8+ T细胞的DEG及其主要富集的通路存在差异。
目的 分析云南中缅边境地区恶性疟原虫抗叶酸类药物磺胺多辛-乙胺嘧啶抗性基因的多态性和抗性回复突变趋势。方法 收集2010—2018年中缅边境恶性疟病例滤纸血样品，巢式PCR扩增恶性疟原虫二氢叶酸还原酶（pfdhfr）基因和恶性疟原虫二氢蝶酸合酶（pfdhps）基因，采用Geneious Prime软件比对测序结果，Microsoft Excel 2016和GraphPad prism 8.0.2软件分析突变频率和单体型分布差异，卡方检验分析抗性相关基因位点单核苷酸多态性特征和不同年份单体型分布差异，Haploview软件分析pfdhfr和pfdhps基因连锁不平衡情况。结果 共收集中缅边境地区190份恶性疟样品，PCR扩增出pfdhfr 180份、pfdhps 178份。测序结果显示，pfdhfr和pfdhps均出现等位基因的多重感染，其中pfdhfr检出17个多重感染，突变位点分别位于第51、59、108、164位氨基酸密码子，其表型为51I/59R/108N/164L；pfdhps检出4个多重感染，突变位点分别位于第436、437、540、581位氨基酸密码子，其表型为436A/437A/540E\N/581G（“\”表示并列关系）。pfdhfr第N51I、C59R、S108N、I164L位点的突变率分别为57.8%（108/187）、90.1%（172/191）、93.3%（168/180）、59.6%（109/183）；pfdhps第S436A\C、A437G、K540E\N、A581G位点抗性突变率分别为54.7%（99/181）、86.5%（154/178）、84.9%（152/177）、28.7%（51/178）。pfdhfr单体型主要集中在三点、四点突变型（51I59R108N/59R108N164L、51I59R108N164L），分别占44.9%（84/187）和36.9%（69/187）。pfdhfr和pfdhps野生型在2010年均未检出。2011年的pfdhfr三点、四点突变单体型（同上）分布频率分别为35.9%（23/64）、37.5%（24/64），均小于2010年的46.2%（30/65）、49.23%（32/65）（P < 0.05），与2014—2018年的53.4%（32/58）、22.4%（13/58）比较差异有统计学意义（P < 0.05）。2014—2018年的pfdhps三点突变单体型（436A\C437G540E\N，437G540E\N581G）分布频率为62.1%（36/58），小于2010年的82.3%（51/62）和2011年的78.7%（48/61）（均P < 0.05）。连锁不平衡分析显示，pfdhfr C59R与S108N基因关联性强（D’= 1，r2 = 0.8），pfdhps S436A与A581G关联性强（D’= 1，r2 = 0.6），且S108N与 K540E存在较强关联性（D’= 0.8，r2 = 0.2）。结论 云南中缅边境恶性疟原虫pfdhfr和pfdhps基因的抗性分子突变单体型仍是优势基因，且随着停药时间延长突变频率逐渐降低。
目的 建立一种基于环介导等温扩增（LAMP）微流控芯片技术的快速检测蚊媒携带登革病毒的方法。方法 根据登革病毒衣壳蛋白（C）、前膜蛋白（prM）和非结构蛋白2A（NS2A）基因片段构建pUC-GW-Amp-CprM和pUC-GW-Amp-NS2A质粒，设计多组环介导等温扩增特异性引物组。制备LAMP微流控芯片，以靶基因质粒、登革病毒核酸为模板进行检测，根据起峰时间、相对荧光单位、假阳性、重复实验稳定性、检测灵敏度等指标筛选最优引物组。用最优引物组分别检测埃及伊蚊、白纹伊蚊等主要登革热传播媒介和常见的致倦库蚊、中华按蚊、摇蚊的cDNA，并与寨卡病毒、流行性乙型脑炎病毒、恶性疟原虫、黄热病毒等常见蚊媒传播病原体进行交叉检测，评价LAMP法的特异性。评价LAMP法检测CprM和NS2A靶基因质粒的灵敏度，分别与PCR、实时荧光定量PCR（qPCR）检测结果进行比较。用登革病毒RNA与传播媒介埃及伊蚊、白纹伊蚊RNA分别以1∶10、1∶100和1∶1 000混合，模拟媒介携带登革病毒的样品进行LAMP微流控芯片检测。对采集自宁德市三都岛、西安市、上海朱家角、长兴岛和五角场等5地的白纹伊蚊的cDNA进行检测。结果 引物组筛选结果显示，CprMG2和NS2AG1引物组起峰时间早，相对荧光单位高，灵敏度最高，为最优引物组。CprMG2引物组可检测浓度低至10-6 ng/μl的pUC-GW-Amp-CprM质粒，最低检测限为1.3 × 103拷贝；NS2AG1引物组可检测浓度低至10-9 ng/μl的pUC-GW-Amp-NS2A质粒，最低检测限为1拷贝。最优引物组CprMG2、NS2AG1对埃及伊蚊、白纹伊蚊、中华按蚊、致倦库蚊、摇蚊等蚊虫cDNA无非特异性扩增，与寨卡病毒、流行性乙型脑炎病毒、恶性疟原虫、黄热病毒核酸无交叉反应。LAMP微流控芯片检测CprM靶基因的最低检测限为1.3 × 103拷贝，较PCR检测的最低检测限（1.3 × 104拷贝）高1个数量级；LAMP微流控芯片检测CprM和NS2A靶基因的最低检测限分别为1.3 × 103拷贝、1拷贝，与qPCR检测的最低检测限（1.3 × 103拷贝、1拷贝）相当。LAMP微流控芯片检测模拟现场样品的结果显示，CprMG2可检出与埃及伊蚊、白纹伊蚊RNA 1∶10、1∶100和1∶1 000混合的登革病毒RNA，NS2AG1最低可检出1∶100混合的登革病毒，特异性均为100%。LAMP微流控芯片检测5地现场采集白纹伊蚊的结果均为阴性。结论 建立了基于LAMP微流控芯片检测登革病毒的方法，该法敏感性和特异性高，检测时间短，可用于现场蚊媒携带登革病毒的检测。
建立一种基于环介导等温扩增（LAMP）检测利什曼原虫的方法，为内脏利什曼病防治提供技术支持。根据利什曼原虫动基体5.8S核糖体RNA（GenBank：OP829811）序列，设计合成LAMP扩增特异性引物，建立LAMP法。用LAMP法检测恶性疟原虫、间日疟原虫、三日疟原虫、卵形疟原虫感染者和健康人血样DNA，以及日本血吸虫、刚地弓形虫和杜氏利什曼原虫前鞭毛体DNA，评价LAMP法的特异性评价特异性；杜氏利什曼原虫前鞭毛体DNA稀释为1 ng/μl、100 pg/μl、10 pg/μl、1 pg/μl、100 fg/μl、10 fg/μl、1 fg/μl，确定LAMP法的最低检测限及有、无钙黄绿素对检测限的影响。用建立的LAMP法和实时荧光定量PCR（qPCR）检测不明原因发热患者和健康人血样；取阳性患者骨髓涂片吉氏染色后镜检，查找利什曼原虫无鞭毛体。建立的LAMP法可检出杜氏利什曼原虫DNA，反应结果呈绿色；检测4种疟原虫感染者和健康人血样以及日本血吸虫、刚地弓形虫DNA的结果均为阴性，呈橙色。LAMP法检测健康人血样46份，均呈阴性，无交叉反应，特异性高。65 ℃反应60 min，未加和加钙黄绿素的检出限分别为1 pg/μl和1 ng/μl，浊度速率峰值均值分别为0.194、0.120，加钙黄绿素后出现浊度时间较未加钙黄绿素平均延迟23.6 min。LAMP法和qPCR法检测发热患者血样67份的结果一致，均检出相同的2份阳性，2份阳性血样对应的骨髓涂片镜检均查见利什曼原虫无鞭毛体。本研究建立的了检测利什曼原虫的LAMP法操作简便、灵敏度和特异性均较高，检测结果可视，具有较好的推广应用价值。
患者，女，58岁，江西省宜春市袁州区人，农民。2023年6月4日因胆管癌在宜春市第二人民医院行根治性胰十二指肠切除术，术后腹腔内出血，经输血等治疗后仍有活动性出血。6月9日行剖腹探查术，术后反复出现腹部隐痛，7月中下旬出现呕吐、发热，最高体温40 ℃。8月13日拟“腹腔感染”转入南昌大学第二附属医院，实验室检查：红细胞计数1.75 × 1012/L，血红蛋白49 g/L，重度贫血；总蛋白60.5 g/L，白蛋白31.4 g/L，低蛋白血症；总胆红素、直接胆红素、间接胆红素轻度增高；腹部CT检查显示脾大，脾多发梗死灶；颅脑弥散成像检查见双侧半卵圆中心、侧脑室旁多发梗死灶。8月15日血涂片吉氏染色镜检查见部分红细胞内可见环状体，考虑寄生虫感染。患者长期生活在袁州区农村，无国内外旅居史，起病前否认明确的蜱叮咬史。取8月17日和8月18日患者血样，经巴贝虫属特异性引物PCR扩增18S rRNA基因片段后测序，所获序列与田鼠巴贝虫（GenBank：JX962781.1）的序列一致性高达99.57%。确诊该患者为田鼠巴贝虫感染。给予克林霉素（0.45 g/次，3次/d）口服治疗，连续治疗5 d，症状缓解。9月30日复查血涂片仍查见巴贝虫，给予盐酸多西环素静脉滴注（0.1 g/次，1次/d），连续3 d；后继续予盐酸多西环素片（0.1 g/次，2次/d）口服治疗15 d。10月30日随访仅有轻微的上肢震颤。
目的 分析多房棘球蚴原头节感染小鼠外周血白细胞中髓源抑制性细胞（MDSC）及其亚型的比例动态变化，以及感染晚期小鼠血清中与MDSC增殖相关细胞因子的表达情况。方法 将24只BALB/c小鼠随机分为感染组和对照组，每组12只。感染组小鼠经腹腔注射1 200个原头节，对照组小鼠注射等量生理盐水。每组小鼠分别于感染后30、90和180 d随机各取3只，观察肝、脾组织形态学变化，并采集眼眶静脉丛外周血制备白细胞。外周血白细胞用外标抗体CD11b、Gr-1、Ly6G和Ly6C孵育后，流式细胞仪检测MDSC及其亚型多核MDSC（PMN-MDSC）和单核MDSC（M-MDSC）的占比。感染后180 d，采集感染组和对照组小鼠血清，ELISA检测白细胞介素6（IL-6）、IL-13、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）的浓度。使用GraphPad Prism 9.0软件进行制图与统计学分析，两组间比较采用独立样本t检验。结果 感染多房棘球蚴原头节后30 d，感染组小鼠肝组织出现囊泡，囊泡的体积随感染时间延长而增加；脾组织随感染时间延长逐渐肿大。流式细胞分析结果显示，感染后30、90和180 d，感染组小鼠外周血白细胞中MDSC占比分别为（13.2 ± 2.4）%、（15.7 ± 2.3）%和（41.3 ± 4.0）%，对照组小鼠的占比分别为（12.4 ± 3.2）%、（6.0 ± 0.9）%和（22.3 ± 1.1）%，感染后90和180 d感染组均高于对照组（t = 3.949、4.682，P < 0.05、0.01）；感染后30、90和180 d，感染组小鼠外周血白细胞中PMN-MDSC占比分别为（10.9 ± 2.1）%、（12.5 ± 2.4）%和（35.8 ± 3.6）%，对照组小鼠的占比分别为（9.6 ± 3.1）%、（4.5 ± 0.6）%和（18.5 ± 0.6）%，感染后90和180 d感染组均高于对照组（t = 3.237、4.788，P < 0.05、0.01）；感染后30、90和180 d，感染组小鼠外周血白细胞中M-MDSC占比分别为（1.8 ± 0.3）%、（1.1 ± 0.1）%和（4.6 ± 1.1）%，对照组小鼠的占比分别为（2.3 ± 0.2）%、（0.5 ± 0.1）%和（3.4 ± 0.9）%，感染后90 d感染组高于对照组（t = 3.246，P < 0.05）。感染后180 d，感染组小鼠血清中IL-6、IL-13、TNF-α和GM-CSF的浓度分别为（315.39 ± 13.58）、（339.41 ± 13.35）、（223.53 ± 27.49）和（262.31 ± 2.36） pg/ml，均高于对照组的（14.93 ± 0.55）、（50.74 ± 0.88）、（50.64 ± 1.64）和（115.28 ± 0.58） pg/ml（t = 22.100、21.580、6.277、60.460，P < 0.01或0.05）。结论 感染多房棘球蚴原头节后，小鼠外周血白细胞中MDSC比例随时间延长而增加，以PMN-MDSC增加为主。感染晚期小鼠血清中IL-6、IL-13、TNF-α和GM-CSF浓度升高，可能促进MDSC的增殖与活化。
棘球蚴病是一类严重危害人群健康和经济发展的人兽共患寄生虫病，主要由棘球绦虫的幼虫在中间宿主体内寄生和发育所导致。目前的研究进展显示，全球范围内被认定的棘球绦虫包含9个有效自然种，可导致4种类型的棘球蚴病。这种共识的认知过程伴随着研究方法和科学技术的发展，持续了超过两千年的时间。本文通过汇总和梳理参考资料，介绍了人类对于棘球绦虫和棘球蚴病的探索、识别和认知的整个过程，其中几个标志性事件是：1801年Rudolphi建立了棘球绦虫属，之后在全球范围内陆续发现了多个棘球绦虫物种；1953年Rausch基于生物学特征对棘球绦虫属进行重新分类，逐渐演变出棘球绦虫的亚种概念及其分类法；1967年Rausch提出棘球绦虫的株系概念，并在20世纪90年代被Bowles通过分子生物学方法加以证实；2013年Nakao提出系统发育物种的概念，棘球绦虫被修订为9个有效自然种，并沿用至今。此外，自1908年开始，我国先后报道了5种棘球绦虫，其中包括青藏高原地区特有的石渠棘球绦虫。本文系统性地回顾了棘球绦虫和棘球蚴病的认知历史全貌，为进一步了解棘球绦虫分类学研究进展提供了丰富的历史资料。
目的 对青海地区多房棘球绦虫和石渠棘球绦虫遗传分化特征进行分析，为青海省棘球蚴病的防控提供理论依据。 方法 在玉树、果洛、黄南藏族自治州等棘球绦虫主要自然疫源地捕捉小型哺乳动物，剖检采集包囊，提取包囊组织基因组DNA，PCR扩增细胞色素氧化酶1（cox1）基因并测序，运用DnaSP v6、Iqtree、BEAST v2.7.4等软件进行单倍型分析、核苷酸多态性分析、系统进化树构建及棘球绦虫属分化时间估算。 结果 从2 864只小型哺乳动物中共获得55份棘球蚴包囊。55份包囊DNA样品均扩增出长度约800 bp的cox1条带，其中37份为多房棘球绦虫，18份为石渠棘球绦虫，青海田鼠多房棘球蚴患病率为1.96%（37/1 884），高原鼠兔石渠棘球蚴患病率为1.84%（18/980）。37条多房棘球绦虫cox1序列共有单倍型5个，以EmH3单倍型为主（占33/37），单倍体多样性指数为0.207，核苷酸多样性指数为0.033 55，共有156个变异位点。18条石渠棘球绦虫cox1序列共有单倍型8个，以EsH2单倍型为主（占8/18），单倍型多样性指数为0.778，核苷酸多样性指数为0.060 52；共有14个变异位点。多房棘球绦虫和石渠棘球绦虫的13个单倍型上传GenBank，单倍型EmH1~EmH5的登录号依次为OR821706、OR821707、OR830343、OR830344、OR826123，EsH1~EsH8登录号依次为OR835156、OR835157、OR830376、OR830378、OR831110、OR875250、OR835161、OR841080。系统进化树分析显示，多房棘球绦虫的5个单倍型与多房棘球绦虫亚洲株聚为一支，石渠棘球绦虫的8个单倍型与GenBank中的石渠棘球绦虫聚为一支。基于cox1基因的分化时间结果显示，细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫、石渠棘球绦虫、少节棘球绦虫和伏氏棘球绦虫的共同祖先存在于约5.67百万年前（Mya）（95% CI：4.72~6.66 Mya），细粒棘球绦虫、石渠棘球绦虫和多房棘球绦虫的平均分化时间约为2.02 Mya（95% CI：1.51~2.49 Mya）。 结论 青海地区多房棘球绦虫和石渠棘球绦虫具有较高的遗传多样性，其中多房棘球绦虫以EmH3单倍型为主，石渠棘球绦虫以EsH2单倍型为主。
目的 了解浙江省华支睾吸虫感染流行现状。 方法 2013—2017年，每年选择浙江省1个曾有华支睾吸虫病例报告的县（市、区）为监测点，每个监测点选择3个乡（镇）开展人群监测，各乡（镇）选择至少100位3周岁以上当地居民采集静脉血，使用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测华支睾吸虫抗体，计算监测对象的抗体阳性率；对2013—2015年的监测对象开展影响华支睾吸虫感染率因素的问卷调查。2018—2022年，每年以宁波市宁海县为固定监测点、另选7~9个县（市、区）为流动监测点，每个监测点按地理位置划分为东、西、南、北、中等5个片区，每个片区抽取1个乡（镇）的1个行政村，整群抽取3周岁以上当地居民200人采集粪样（> 30 g），使用改良加藤厚涂片法检测华支睾吸虫虫卵，计算检测对象感染率。2013—2017年，每年在监测点的自然水体环境中采集淡水鱼；2018—2022年，每年在固定监测点和随机一个流动监测点的自然水体环境中采集淡水鱼，鉴定鱼种后采用压片法检查囊蚴感染情况。2018—2022年，每年在固定监测点和监测中间宿主的流动监测点采集猫、犬或猪粪样，用改良加藤厚涂片法检测华支睾吸虫虫卵。用SPSS 19.0进行数据统计分析，感染率的比较采用卡方检验。 结果 2013—2017年浙江省共监测1 516人，抗体阳性率为2.51%（38/1 516）；2018—2022年共监测52 626人，粪样中均未检出华支睾吸虫虫卵，感染率为0（0/52 626）。各监测点人群抗体阳性率以磐安县最高（6.00%，18/300），不同监测点间人群抗体阳性率差异有统计学意义（χ2 = 21.212，P < 0.01）。监测人群中3~17岁年龄组抗体阳性率最高（8.82%，6/68），不同年龄组间抗体阳性率差异有统计学意义（χ2 = 13.105，P < 0.05）。2013—2022年中间宿主囊蚴感染率为12.56%（476/3 791），感染率最高的为2018年的宁海县（33.47%，84/251），不同监测点间中间宿主感染率差异有统计学意义（χ2 = 242.727，P < 0.01）。逆鱼囊蚴感染率最高（75.00%，21/28），不同鱼种感染率差异有统计学意义（χ2 = 174.750，P < 0.01）。保虫宿主感染率为1.17%（3/257）。 结论 浙江省人群华支睾吸虫感染水平较低，但中间宿主和保虫宿主仍有感染，具有潜在流行风险，需加强监测防治和健康教育。
目的 探讨细粒棘球蚴抗原B（AgB）和钙结合蛋白1（CBP1）在小鼠免疫性血小板减少症（ITP）模型中基于TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的保护作用及机制。 方法 42只健康雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、ITP组、AgB组、AgB + ITP组、CBP1组、CBP1 + ITP组，每组7只。AgB组和AgB + ITP组小鼠每天腹腔注射AgB 100 μg（200 μl），CBP1组和CBP1 + ITP组小鼠每天腹腔注射CBP1 100 μg（200 μl），对照组和ITP组小鼠每天腹腔注射PBS 200 μl；均连续5 d。随后ITP组、AgB + ITP组、CBP1 + ITP组小鼠每天腹腔注射抗CD41单克隆抗体3 μg（200 μl）进行ITP造模，对照组、AgB组、CBP1组小鼠每天腹腔注射PBS 200 μl；均连续注射5 d。检测造模前1天（D0）、造模期间（D1~D5）、造模结束次日（D6）小鼠外周血血小板计数的变化；造模结束次日安乐死处死小鼠，取脾脏和肝脏，称重并计算脏器指数；逆转录实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测小鼠脾组织Toll样受体4（TLR4）、NOD样受体热蛋白结构域蛋白3（NLRP3）、凋亡点状蛋白（ASC）、IL-1β mRNA相对转录水平；蛋白质免疫印迹（Western blotting）检测小鼠脾脏TLR4、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、核因子κB（NF-κB）、天冬氨酸蛋白水解酶1（caspase-1）的相对表达水平。组间比较采用单因素方差分析，多组间两两比较采用LSD-t检验。 结果 ITP组小鼠D1~D6的血小板计数分别为（102.1 ± 6.8）× 109/L、（234.7 ± 18.1）× 109/L、（229.7 ± 45.8）× 109/L、（316.7 ± 26.8）× 109/L、（320.6 ± 60.5）× 109/L、（179.1 ± 22.2）× 109/L，均低于对照组的（526.6 ± 90.4）× 109/L、（679.3 ± 58.5）× 109/L、（828.0 ± 61.0）× 109/L、（855.3 ± 101.9）× 109/L、（784.1 ± 177.7）× 109/L、（877.4 ± 107.5）× 109/L（LSD-t = -4.2、-5.5、-6.9、-6.3、-3.9、-4.8，均P < 0.05）；AgB + ITP组和CBP1 + ITP组D6的血小板计数为（512.6 ± 100.5）× 109/L、（511.1 ± 114.8）× 109/L，均高于ITP组（LSD-t = 2.3、2.3，均P < 0.05）。ITP组小鼠脾脏指数为12.1 ± 1.2，高于对照组的6.3 ± 0.4（LSD-t = 6.8，P < 0.01）；AgB + ITP组脾脏指数为9.0 ± 0.3，较ITP组下降（LSD-t = -3.6，P < 0.01）。qRT-PCR结果显示，ITP组脾组织TLR4、NLRP3、ASC、IL-1β mRNA相对转录水平分别为7.5 ± 2.1、5.3 ± 1.5、3.6 ± 0.7、4.0 ± 0.9，均高于对照组的1.3 ± 0.3、1.2 ± 0.2、1.2 ± 0.3、1.0 ± 0.1（LSD-t = 4.8、4.5、4.2、5.2，均P < 0.01）；AgB + ITP组的相对转录水平为1.7 ± 0.3、0.6 ± 0.1、1.0 ± 0.3、0.7 ± 0.1，CBP1 + ITP组为1.7 ± 0.1、1.0 ± 0.3、1.1 ± 0.4、0.4 ± 0.1，均较ITP组下降（LSD-t = -4.6、-5.1、-4.5、-5.9， -4.5、-4.7、-4.4、-6.3，均P < 0.01）。Western blotting结果显示，ITP组脾组织TLR4、iNOS、NF-κB p65、caspase-1的相对表达水平为0.7 ± 0.1、0.5 ± 0.0、1.4 ± 0.2、1.5 ± 0.2，均高于对照组的0.2 ± 0.0、0.3 ± 0.0、0.9 ± 0.2、0.8 ± 0.2（LSD-t = 8.6、6.5、3.1、3.5，均P < 0.01）；AgB + ITP组相对表达水平为0.4 ± 0.0、0.4 ± 0.0、0.9 ± 0.1、1.0 ± 0.1，CBP1 + ITP组为0.2 ± 0.1、0.2 ± 0.0、0.6 ± 0.1、0.7 ± 0.1，均较ITP组下降（LSD-t = -6.1、-2.8、-3.1、-2.3，-8.9、 -7.1、-4.9、-4.2，均P < 0.05）。 结论 AgB和CBP1对小鼠ITP具有保护作用，其作用机制与TLR4/NF-κB/NLRP3通路的调节有关。
