疟疾是疟原虫感染所致的地方性传染病,主要在热带和亚热带地区流行。尽管世界卫生组织在2021年6月宣布我国通过了消除疟疾认证,但随着国际交流的日益频繁,我国面临的输入性疟疾的威胁将长期存在。为促进临床医师深入了解并合理治疗疟疾,提高疟疾诊治的水平,我们邀请国内感染性疾病及寄生虫病领域相关专家共同编写了“疟疾诊疗指南”(简称“指南”)。该指南对疟疾的病原学、流行病学、发病机制、临床表现、实验室检查、诊断及鉴别诊断、治疗、护理、预防等方面进行介绍,并重点强调了应对不同临床状况时的治疗方案,以便临床医师合理应用。
塔里木大学校医院于2020年6月收治1例男性绦虫病患者,患者自诉排便时发现粪便中有乳白色蠕动的虫体节片,有绦虫病史。经服南瓜子-槟榔合剂后排出1条乳白色带绦虫。收集排出的绦虫虫体,采用体视显微镜进行形态学观察,结合流行病学资料和饮食习惯,初步鉴定为牛带绦虫。基于绦虫线粒体nad1和rrnS基因位点对虫体DNA的PCR扩增结果显示,分别扩增出约为529 bp和357 bp大小的片段。基于nad1基因位点,BLAST比对显示其与肯尼亚人源牛带绦虫(GenBank登录号AM503345)序列一致性为100%;基于rrnS基因位点,其与日本人源牛带绦虫(GenBank登录号AB031355)序列一致性为99.7%,鉴定为牛带绦虫。分别于3、6个月后对患者进行随访,患者身体状况良好,无绦虫节片排出。
肆虐全球的新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)疫情促使我国运用全健康理念来解决健康问题和完善我国公共卫生治理体系。本文运用态势分析法(SWOT)对当前在中国发展全健康带来的机遇和挑战进行分析,结果显示,在中国全健康发展的优势为我国政府对全健康备加重视,中国学者努力推动全健康的发展;劣势为科研基础薄弱,发展不均衡;机遇为国际上对全健康理念越来越认同,且一些组织开始应用全健康理念;挑战为我国面临人才竞争力不足和影响力低等。为此提出了在中国发展全健康的策略和重点研究内容,为推动全健康在中国的发展提供思路。
血吸虫病在我国流行至少有2 000多年的历史,严重危害人民群众的身体健康,影响社会经济的发展。根据血吸虫病的流行特点,我国在不同的历史时期先后实施了不同的防治策略。在不同防治策略的指引下,我国血吸虫病防治取得了显著成效,2015年全国实现了血吸虫病传播控制目标。我国各时期血吸虫病防治策略的提出均遵循了一定的科学基础和科学规律。本文对血吸虫病不同防治策略提出的科学基础进行综述,并对“十四五”时期的血吸虫病干预策略提出思考与建议,以期对消除血吸虫病工作有所裨益。
全健康(One Health)是对健康概念的升级和优化,全健康理念强调人-动物-环境三者的共同健康,提倡使用跨学科协作、多部门协调和多组织协同的全健康研究方法解决科学问题。监测预警体系是应对突发公共卫生事件防控的基础,随着新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的全球大流行和新发传染病(EID)的不断出现,世界各国现有的监测预警体系面临新的挑战。本文从全健康理念出发,通过阐述全健康理念基础下的组织架构、人兽共患病和环境科学等监测网络、EID报告流程、教育和政策等层面的支持与保障,构建新型EID综合监测预警体系,并对构建的EID综合监测预警体系提出实践和应用前景,以便为COVID-19和今后可能出现的EID的预防和控制提供指导性建议。
湘南学院附属医院于2021年9月收治1例58岁男性患者,自诉发现右颈部肿块伴疼痛1周,有长期生食三文鱼、生腌虾等饮食习惯。查体:颈软,气管居中,双侧甲状腺未扪及肿物,右侧胸锁乳突肌可扪及肿物大小约5 cm × 5 cm × 3 cm,质地中等,形状规则,边界欠清,活动度差,不随吞咽上下活动,右颈部及锁骨上窝可扪及多发肿大淋巴结,大者约2 cm × 1 cm,质地中等,活动度可。血常规示嗜酸粒细胞计数2.1 × 109/L(0.02 × 109/L~0.52 × 109/L),嗜酸粒细胞百分比10.4%(0.4%~8.0%);粪常规未见明显异常。血清裂头蚴IgG抗体阳性。颈部彩超示右侧胸锁乳突肌内探及多发囊实性混合回声区,范围约60 mm × 25 mm × 53 mm,形态欠规则,边界欠清,内部回声欠均匀;肿物包膜完整,内似有蜷曲的条索状物,包膜周围血供丰富。颈部增强CT示:右侧胸锁乳突肌下端明显膨大,密度不均,其内可见多发低密度区,增强时实质部分可见环形强化。术中探查见右侧胸锁乳突肌肿物具有完整包膜,切开囊内有无色液体流出、3条白色寄生虫缓慢蠕动。虫体乳白色、长带状,长约15 cm,头节细小、呈匙形,背腹面各有1条窄而深凹的吸槽,体前端有凹陷且稍大,体不分节但具有横皱褶,尾部细。结合虫体形态学鉴定和患者流行病学史,诊断为阔节裂头蚴感染。术后予吡喹酮(总剂量120 mg/kg,分5日服,一日3次)驱虫治疗,3月后随访未见异常。
目的 了解我国棘球蚴病疫情分布状况及流行病学特点,为优化防治策略提供依据。 方法 收集2004—2020年国家传染病报告信息管理系统中全国棘球蚴病报告病例的数据,采用Microsoft Office 2016软件对报告病例的时间分布、地区分布、人群分布进行描述性统计分析。 结果 2004—2020年全国31个省(直辖市、自治区)共报告棘球蚴病病例66 040例,其中9个流行省份[新疆(包括新疆生产建设兵团)、四川、青海、甘肃、宁夏、西藏、内蒙古、陕西和云南]报告65 340例,占全国总报告病例数的98.9%,22个非流行省份报告700例,占全国报告病例的1.1%。男性31 494例,女性34 546例。全国报告棘球蚴病例数从2004年的991例上升至2020年的3 650例,呈逐年增多的趋势(z = 2.27,P < 0.05)。非流行省份报告棘球蚴病例数从2004年的17例上升至2020年的56例,亦呈逐年增多趋势(z = 4.1675,P < 0.05)。报告病例年龄分布主要以≥ 20岁年龄组为主,占91.3%(60 271/66 040),年龄不足1岁11例,≥ 85岁200例;职业分布中牧民和农民占全国报告病例数的72.8%(48 074/66 040),其他主要为家务及待业者(5.5%,3 606/66 040),学生(4.6%,3 034/66 040)。2020年非流行区共报告56例,河南报告最多(16例);其中输入性病例38例,由新疆输入24例;10个省份存在疑似本地感染病例。 结论 我国西部9个省份的棘球蚴病流行仍然十分严重,报告病例数呈增多趋势。牧民和农民、青中年为高发人群。
疟疾是威胁全球人类健康的重要传染病之一。如何抑制疟疾的传播,仍然是一个亟待解决的问题。当疟原虫入侵宿主细胞后,会在胞内生长、繁殖,造成严重的病理损伤。而纳虫空泡膜作为宿主细胞与疟原虫直接接触的界面,对疟原虫生存状态有重要意义。本文简要介绍了疟原虫纳虫空泡膜的形成及其与疟原虫细胞质质膜、管状囊泡网络之间的关联,对红内期、肝内期与有性期纳虫空泡膜相关蛋白及其功能进行归纳总结,并对疟疾防治策略提出了展望。
收集整理寄生虫病防治信息管理系统中2022年全国31个省(直辖市、自治区,未包括台湾、香港和澳门地区)疟疾疫情数据资料,对疟疾疫情特征进行统计分析。2022年全国报告疟疾病例845例,较2021年(799例)增加了5.8%;其中境外输入性病例844例,长潜伏期再燃三日疟病例1例(由广东省报告);中国籍820例(占97.0%,820/845),外国籍25例(占3.0%,25/845);男女性别比为17.0:1,50~59岁年龄组的病例最多(占29.5%,249/845);恶性疟494例(占58.5%,494/845),间日疟204例(占24.1%,204/845),卵形疟108例(12.8%,108/845),三日疟31例(占3.7%,31/845),混合感染8例(占0.9%,8/845)。26个省(直辖市、自治区)报告疟疾病例,病例数位居前5位的省份依次为广东(182例)、云南(136例)、四川(72例)、浙江(64例)和河南(59例),合计报告513例(占60.7%,513/845)。全国报告疟疾危重症病例36例(占4.3%,36/845),死亡病例6例(占0.7%,6/845)。虽然我国已连续6年无本土原发蚊传疟疾病例报告,但依然存在聚集性输入和输入再传播风险,消除后应继续加强疟疾监测与响应,及时发现、准确诊断和规范治疗疟疾病例,减少危重症或死亡,防止出现本地再传播。
目的 明确影响肝细粒棘球蚴病患者病灶活性状态的主要因素,为提高细粒棘球蚴病的诊疗效果提供决策依据。 方法 收集2018年1月至2020年6月在新疆医科大学第一附属医院行手术治疗的251例肝细粒棘球蚴病患者的人口学信息和临床相关资料,应用影像学技术,并结合其生物学特性将病灶CE1、CE2、CE3分为活性组,病灶CE4、CE5分为无活性组,以病灶有无活性为因变量进行单因素分析,根据单因素分析结果,构建非条件logistic回归模型,分析影响病灶活性状态的独立影响因素。使用SPSS 26.0统计软件进行统计学分析。 结果 本研究符合纳入标准的251例肝细粒棘球蚴病手术患者中,女性占57.0%(143例),高于男性的43.0%(108例);年龄为4~85岁,平均年龄为(41.31 ± 15.05)岁;患者文化程度偏低,高中及以下文化程度占79.3%(199例);居住乡村占比为66.9%(168例),高于居住城市的33.1%(83例);汉族占42.2%(106例),其他少数名族占57.8%(145例);初发占比为78.1%(196例),高于复发的21.9%(55例);有活性病灶占比为76.9%(193例),高于无活性病灶的23.1%(58例)。单因素分析结果显示,不同年龄、民族、有无复发、病灶数、病灶大小以及血液检查指标红细胞、凝血酶原时间、直接胆红素和碱性磷酸酶与肝细粒棘球蚴病患者的病灶活性状态差异有统计学意义(χ2 = 17.110、7.797、2.906、4.702、16.520,Z = -1.989、2.446、2.003、1.914;P < 0.1)。非条件logistic回归结果显示,影响肝细粒棘球蚴病患者病灶活性状态的主要因素为年龄和病灶大小, 年龄越小、病灶越大其病灶活性占比越高(P < 0.05)。 结论 通过对251例肝细粒棘球蚴病手术患者的临床资料分析显示,年龄越小和病灶越大是影响肝细粒棘球蚴病患者病灶活性状态的独立影响因素。
目的 对1例罕见原发性阿米巴脑膜脑炎病例进行实验室诊断。 方法 收集患者病例资料,采集患者脑脊液,采用直接涂片和瑞氏-姬姆萨染色后镜检,提取患者脑脊液基因组DNA,采用耐格里属特异性引物和耐格里阿米巴种特异性引物PCR扩增内转录间隔区1(ITS1)-5.8S-ITS2序列,测序后在GenBank中进行BLAST比对,使用MEGA5软件以邻接法构建系统进化树;患者脑脊液送杭州金域医学检验所有限公司进行DNA-病原微生物宏基因组检测。 结果 患者,男,42岁,宁波象山人,全身严重烧伤卧床20年。2022年7月21日因发热、寒战、头痛、咽痛、恶心、呕吐等至浙江省宁波市象山县第一人民医院就诊,查体:体质量45 kg,体温40.5 ℃,神志不清,双眼上翻,结膜充血,两侧瞳孔直径3 mm,等大等圆,牙关紧闭,颈部强直,鼾声呼吸,四肢抽搐,肌肉痉挛,小便失禁,皮肤、黏膜潮红等多种临床症状。头颅和胸部CT未见明显异常。腰椎穿刺脑脊液压力为39 cmH2O(1 cmH2O = 0.098 kPa)。脑脊液检测结果,直接涂片镜检可见快速连续呈阿米巴样运动的阿米巴滋养体,瑞氏-姬姆萨染色涂片镜检可见阿米巴滋养体;属和种特异性引物分别扩增出183 bp和311 bp的片段;DNA-病原微生物宏基因组检出福氏耐格里阿米巴序列21 534条,相对丰度为99.8%,未检出其他病原微生物的序列。序列比对结果显示,扩增获得的ITS1-5.8S-ITS2序列与福氏耐格里阿米巴Na 420c株(GenBank登录号为AJ132028)的一致性为99%,在系统进化树上与耐格里属阿米巴聚在同一支上。确诊该病例为福氏耐格里阿米巴感染。给予美罗培南抗感染、甲硝唑抗阿米巴、氟康唑抗真菌治疗,20%甘露醇脱水降颅压治疗,但因患者病情急剧恶化引起呼吸及心力衰竭,于2022年7月23日抢救无效死亡。 结论 综合该患者的临床症状、脑脊液的病原学检查和分子生物学检测,确诊为福氏耐格里阿米巴感染。
患者,男,46岁,于2021年12月在体检中行肠镜检查时,发现其回盲部寄生一条似寄生虫,可蠕动,予活检钳取出。肠镜下,虫体寄生部位的肠黏膜未见异常,肠腔内未见异常。取出的虫体经形态学鉴定,初步确定为简单异尖线虫;提取虫体DNA,进行PCR检测,所得扩增片段约为1 000 bp,测序后经BLAST比对分析,与简单异尖线虫的序列一致性达99%;经系统进化树分析,与简单异尖线虫聚为一簇。确认该患者回盲部寄生的虫体为简单异尖线虫。患者自述,长期居住于东南沿海城市,有多年食生海鲜制品史。取出虫体后未诉有不适感,故未行其他检查和治疗。
目的 探究刚地弓形虫棒状体蛋白16(ROP16)在小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S细胞)中的表达及其对细胞极化和凋亡的影响和相关机制。 方法 利用携带绿色荧光标签的ROP16过表达慢病毒转染MH-S细胞,构建稳定表达ROP16的ROP16-MH-S细胞株(过表达组),同时设空载体慢病毒转染对照组(空载体组)和无转染对照组(对照组)。转染72 h后免疫荧光法检测ROP16-MH-S中ROP16的表达及其在细胞中的定位。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的转录水平为内参照,RT-qPCR检测ROP16-MH-S细胞中促炎(M1)因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-18、IL-6、IL-12和抗炎(M2)因子IL-10、转化生长因子-β(TGF-β),以及抑凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和促凋亡基因Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)、Caspase 9等mRNA的相对转录水平;Western blotting检测ROP16-MH-S细胞中极化蛋白精氨酸酶1(Arg-1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、705位点磷酸化(pTyr705)-STAT3、STAT6、pTyr641-STAT6和凋亡蛋白Caspase 9、Caspase 3、Bcl-2、Bax蛋白的相对表达水平;流式细胞术检测ROP16-MH-S细胞的凋亡情况。组间比较采用单因素方差分析。 结果 转染后72 h,空载体组和过表达组90%以上的细胞可见较强的绿色荧光,过表达组细胞中可见明显红色荧光聚集在ROP16-MH-S细胞核及其周围。RT-qPCR结果显示,过表达组ROP16 mRNA的相对转录水平为8 023.459 ± 39.325,高于空载体组(5.540 ± 0.001)(F = 83 188,P < 0.01);Western blotting检测结果显示,过表达组ROP16蛋白的相对表达水平为16.349 ± 0.746,高于空载体组(1.291 ± 0.333)(F = 831.7,P < 0.01)。RT-qPCR结果显示,过表达组促炎(M1)因子IL-1β、TNF-α、IL-18、IL-6、IL-12 mRNA的相对转录水平分别为0.495 ± 0.002、0.337 ± 0.007、0.378 ± 0.014、0.474 ± 0.035和0.730 ± 0.021,均低于空载体组(0.994 ± 0.043、1.165 ± 0.034、0.943 ± 0.005、1.153 ± 0.028、0.926 ± 0.031)(F = 261.7、536.5、1 682.0、225.0、78.5,P < 0.01);抗炎(M2)因子IL-10、TGF-β mRNA的相对转录水平分别为7.013 ± 0.032和1.608 ± 0.024,均高于空载体组(0.790 ± 0.031、1.091 ± 0.027)(F = 23 835.0、200.1,P < 0.01)。Western blotting检测结果显示,过表达组Arg-1、pTyr705-STAT3、pTyr641-STAT6蛋白相对表达水平分别为2.337 ± 0.089、3.471 ± 0.046、3.905 ± 0.045,均高于空载体组(0.871 ± 0.014、1.482 ± 0.071、1.514 ± 0.050)(F = 640.8、1 608.0、3 528.0,P < 0.01)。流式细胞术检测结果显示,过表达组细胞凋亡率为(2.990 ± 0.042)%,低于对照组(6.480 ± 0.071)%和空载体组(5.655 ± 0.290)%(F = 219.7,P < 0.01)。Western blotting检测结果显示,过表达组促凋亡蛋白Bax、Caspase 3、Caspase 9的相对表达水平分别为0.558 ± 0.005、0.640 ± 0.011、0.593 ± 0.026,Bax/Bcl-2为0.453 ± 0.011,均低于空载体组(0.991 ± 0.010、0.926 ± 0.006、0.963 ± 0.012、0.834 ± 0.008)(F = 2 850.0、1 200.0、359.3、2 337.0,P < 0.01)。RT-qPCR检测结果显示,过表达组促凋亡基因Bax、Caspase 3、Caspase 9 mRNA的相对转录水平分别为0.588 ± 0.086、0.563 ± 0.025和0.403 ± 0.014,Bax/Bcl-2为0.158 ± 0.008,均低于空载体组(0.924 ± 0.016、0.937 ± 0.041、0.807 ± 0.032、0.779 ± 0.014)(F = 24.7、78.6、154.9、265.5,P < 0.01);过表达组抑凋亡基因Bcl-2 mRNA的相对转录水平为3.702 ± 0.362,高于空载体组(1.186 ± 0.006)(F = 104.1,P < 0.01)。 结论 ROP16蛋白在ROP16-MH-S细胞中(主要位于细胞核及其周围)稳定表达,可激活STAT3、STAT6,磷酸化Tyr705-STAT3、Tyr641-STAT6,进而调控细胞向M2极化,抑制细胞凋亡。
在全球范围内,大多数微小隐孢子虫亚型为人兽共感染虫株。奶牛是微小隐孢子虫自然感染的重要宿主,也是人隐孢子虫病的重要传染来源。本文阐述了奶牛源微小隐孢子虫分子流行病学研究进展,分析中国奶牛源微小隐孢子虫Ⅱd亚型的分布特征和多样性分布规律,探讨Ⅱd亚型变异发展趋势,这对微小隐孢子虫病的防控具有重要意义。
目的 分析比较亚洲璃眼蜱(Hyalomma asiaticum)和小亚璃眼蜱(H. anatolicum)新疆地理株不同发育阶段生物学特性和形态差异。 方法 2019年4—5月,于新疆奇台和吐鲁番2个蜱流行地采集硬蜱,利用形态学特征鉴定蜱种,提取全蜱总DNA,PCR扩增蜱虫线粒体细胞色素氧化酶亚基1(CO1)基因保守片段,使用pEASY®-T1载体系统对目的基因进行克隆,挑取单菌落无菌扩大培养,培养后的菌液进行测序。采用NCBI中Blast在线分析软件,对测序后的靶基因序列与其他序列的同源性进行比对,分析CO1基因序列并进行系统进化树分析。将12只新西兰大白兔随机均分为2组,每组6只,分别供血饲喂不同发育阶段的亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱,分别为幼蜱(200只)、若蜱(150只)和成蜱(50只),每个发育期分别取2只大白兔进行供血饲喂。采用饲蜱装置将蜱接种于兔子耳部饲血,每天对吸血蜱进行观察,直至各发育期蜱饱血脱落,记录各个阶段的发育时间,观察各蜱种不同发育期的生物学特性。 结果 于奇台和吐鲁番两地共采集317和291只硬蜱,分别为亚洲璃眼蜱(317只)和小亚璃眼蜱(291只)。经生物学特性的比较发现,亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱完成一个生活史分别平均需要131.5和112.5 d。在卵期,亚洲璃眼蜱的产卵和卵孵化周期(27.5 d和31.5 d)长于小亚璃眼蜱(12.0 d和20.5 d);在幼蜱期,亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱吸血、蜕皮分别需要5.5、18.5 d和9、18.5 d;在若蜱期,亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱吸血、蜕皮分别需要10.5、19.0 d和4.5、30.0 d;在成蜱期,亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱雌蜱吸血、产卵前期分别需要8.5、10.5 d和13.0、5.0 d。经形态学比较发现,除亚洲璃眼蜱卵期出现“卵斑”(后期发育成肛门)的时间(19 d)晚于小亚璃眼蜱(14 d),两蜱种间幼蜱和若蜱的差异不明显;成蜱间差异主要体现在颈沟(亚洲璃眼蜱雄蜱:长且深,向后延伸超出盾板中部;小亚璃眼蜱雄蜱:短而浅)、肛侧板与肛下板(亚洲璃眼蜱雄蜱:肛侧板窄长,前尖窄后钝圆,内缘凸角较宽呈尖三角型,副肛侧板中等大小,肛下板略小,呈乳头状;小亚璃眼蜱雄蜱:肛侧板中部稍宽,前端尖窄,后缘略圆钝,内缘突角宽短,肛下板不明显)、气门板(亚洲璃眼蜱雄蜱:呈曲颈瓶形,前端似卵圆形,背突稍窄且长;小亚璃眼蜱雄蜱:类似勺形,背突稍宽且长,末端至背板边缘。亚洲璃眼蜱雌蜱:似长椭圆形,背突稍宽且长,呈直角向背部,末端至背板边缘;小亚璃眼蜱雌蜱:似长矩形,背突稍宽且长,向前近直角弯曲)、足基节(亚洲璃眼蜱雌蜱:足Ⅰ基节外距稍长于内距,基节外距粗短,按节序渐小;小亚璃眼蜱雌蜱:足Ⅰ基节外距大于内距,足Ⅱ~Ⅳ基节没有内距,外距短小)及足上的淡黄色环带及纵带(亚洲璃眼蜱雄蜱:明显;小亚璃眼蜱雄蜱:不明显)等,其中雄蜱之间主要鉴别要点为肛侧板、肛下板和气门板;雌蜱间的主要鉴别要点为足和气门板。基于CO1基因的系统进化树分析,本研究获得的新疆奇台株亚洲璃眼蜱(GenBank登录号MW217459)与内蒙古(GenBank登录号JX051135)、哈萨克斯坦(GenBank登录号KU364324)、甘肃武威(GenBank登录号MK292004)、新疆尉犁(GenBank登录号KF527441)的基因序列聚为一簇,新疆吐鲁番株小亚璃眼蜱(GenBank登录号MW221948)与哈萨克斯坦(GenBank登录号MN853167)、甘肃(GenBank登录号JQ737067)、新疆其他株(GenBank登录号MN268557、KF583576)的基因序列聚为另一簇,亚洲璃眼蜱奇台株和小亚璃眼蜱吐鲁番株亲缘关系存在明显差异。 结论 亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱新疆地理株在生活周期、形态特征和分子生物学等3个方面均存在差异。
目的 探讨骨桥蛋白(OPN)表达水平对多房棘球蚴原头节生长发育的影响。 方法 从感染多房棘球蚴的长爪沙鼠体内分离原头节,体外培养3 d后,分为沉默EmOPN(LV-EmOPN-734)组、沉默对照(LV3-NC)组、过表达EmOPN(LV-EmOPN-0423)组、过表达对照(LV5-NC)组等4组,每组设置3个平行孔,每孔含原头节约5 000个。LV-EmOPN-734组中加入LV-EmOPN-734慢病毒稀释液(终浓度为1.4 × 107 TU/ml)、LV-EmOPN-0423组中加入LV-EmOPN-0423慢病毒稀释液(终浓度为4.83 × 108拷贝/ml),相应对照组加入等量的慢病毒稀释液(空质粒)。感染后72 h,荧光显微镜下观察各组原头节的荧光强度,蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测原头节中OPN的相对表达量,半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)检测试剂盒检测原头节Caspase-3活性,EdU细胞成像试剂盒检测原头节增殖能力。感染后72 h,将原头节与大鼠肝癌细胞共培养8~12周,扫描电镜下观察多房棘球蚴囊泡生发层的显微结构。采用t检验对组间差异进行统计学分析。 结果 慢病毒感染原头节后72 h,荧光显微镜下可见慢病毒侵入原头节内,呈环状或点状分布。Western blotting结果显示,LV-EmOPN-734组EmOPN相对表达量为0.43 ± 0.04,低于LV3-NC组的0.80 ± 0.07(t = 8.623, P < 0.01);LV-EmOPN-0423组EmOPN相对表达量为1.18 ± 0.21,高于LV5-NC组的0.73 ± 0.06(t = 3.333, P < 0.05)。Caspase-3活性检测结果显示,LV-EmOPN-734组Caspase-3活性为(61.55 ± 1.64)μmol/L,高于LV3-NC组的(28.20 ± 2.16)μmol/L(t = 24.57, P < 0.01);LV-EmOPN-0423组Caspase-3活性为(50.11 ± 6.45)μmol/L,低于LV5-NC组的(78.22 ± 16.43)μmol/L(t = 3.185,P < 0.05)。EdU细胞成像试剂盒检测结果显示,LV-EmOPN-734组EdU+原头节数/总原头节数为0.47 ± 0.06,低于LV3-NC组的0.72 ± 0.10(t = 3.663, P < 0.05);LV-EmOPN-0423组EdU+原头节数/总原头节数为0.81 ± 0.09,高于LV5-NC组的0.54 ± 0.06(t = 4.309, P < 0.05)。扫描电镜观察结果显示,LV-EmOPN-734组囊泡生发层细胞出现塌陷、皱缩、脱落,失去正常结构;LV-EmOPN-0423组囊泡生发层细胞膜完整,形态饱满,形成生发小囊并长出小蒂与生发层相接。 结论 OPN表达水平的升高/降低可促进/抑制多房棘球蚴原头节的生长发育。
江西省人民医院于2021年10月17日收治1例69岁男性“胸腔积液、肺部感染”患者,患者诉右侧肋弓部疼痛7 d,有牙周病病史及脑梗死个人史。入院后查体:右侧胸部叩诊呈浊音,右肺呼吸音未及,左肺可闻及干啰音。胸部彩超提示双侧胸腔积液;胸部X光和CT检查提示右侧胸腔积液,右肺感染;胸水涂片和瑞氏-吉氏染色涂片查见滴虫;胸水高通量测序结果为口腔毛滴虫。结合患者病史及辅助检查结果,诊断为口腔毛滴虫感染、肺部感染。住院期间予患者胸腔闭式引流,甲硝唑、奥硝唑静脉输液(0.5 g/次,2次/d)及胸腔内注射(0.5 g/次,1次/d)共治疗14 d,同时联合哌拉西林他唑巴坦(4.5 g/次,3次/d)抗感染治疗23 d,分别于10月30日、10月31日、11月2日胸腔内注射尿激酶(20万单位/次)消除胸膜腔分隔,治疗后患者症状好转,复查胸水未见滴虫,胸部CT提示胸腔积液较前减少,余无特殊异常遂出院。出院1月后复诊,患者无特殊不适,行胸部CT检查未见胸腔积液,余无明显异常。
目的 结合重组酶聚合酶扩增技术(RPA)和侧流层析试纸条(LFD),建立一种快速、便捷的曼氏血吸虫核酸可视化检测方法,并初步评价其检测效能。 方法 以曼氏血吸虫细胞色素c氧化酶亚基1(SmCOX1)基因为靶序列,利用Primer Primer 5软件结合手工辅助,设计特异性引物和探针并进行筛选,建立曼氏血吸虫核酸LFD-RPA检测方法。制备不同浓度(1 ng/μl、100 pg/μl、10 pg/μl、1 pg/μl、100 fg/μl、10 fg/μl、1 fg/μl、0.1 fg/μl)的曼氏血吸虫成虫基因组DNA和含有不同拷贝数浓度(105、104、103、102、101、100、10-1拷贝/μl)的SmCox1重组质粒DNA,评价所建立方法的敏感度。以曼氏血吸虫成虫、日本血吸虫成虫、埃及血吸虫虫卵、感染曼氏血吸虫双脐螺(阳性双脐螺)和阴性双脐螺、感染日本血吸虫钉螺(阳性钉螺)和阴性钉螺、华支睾吸虫成虫、大片形吸虫成虫、卫氏并殖吸虫成虫基因组DNA为模板,评价所建立方法的特异性。将30只雌性BALB/c小鼠随机分为40尾感染组、80尾感染组和健康对照组,每组10只,建立感染小鼠模型,提取感染后1~8周的小鼠粪样和血样DNA,评价LFD-RPA方法检测曼氏血吸虫早期感染的效能。 结果 以SmCox1基因片段为靶标建立的曼氏血吸虫LFD-RPA检测方法以39 ℃、20 min为最佳反应温度和时间。敏感度检测结果显示,SmCox1-LFD-RPA方法对曼氏血吸虫成虫基因组、SmCox1重组质粒的检出限分别为10 fg/μl和10拷贝/μl。特异性检测结果显示,SmCox1-LFD-RPA方法仅对曼氏血吸虫和阳性双脐螺DNA特异,与其他吸虫DNA无交叉反应。SmCox1-LFD-RPA方法对感染小鼠1~8周血样及粪样DNA的检测结果显示,40尾组小鼠自感染后3周开始出现阳性条带,80尾组小鼠自感染后1周开始出现阳性条带,且条带颜色随感染时间延长逐渐加深。 结论 建立了曼氏血吸虫LFD-RPA检测方法,其检出限低、特异性强,操作简单快捷。
野生动物疫源性疾病不但威胁人类健康,还严重影响全球的生物多样性保护。我国青藏高原东部牧区是世界范围内已知人棘球蚴病患病率最高的地区。当地多样的野生和家养哺乳动物构成了棘球蚴病复杂而稳定的传播链。本文概述了青藏高原牧区棘球蚴病的流行病学研究现状,并从宿主动物群落结构和动态、宿主行为生态学特征、人类活动干扰等3个方面探讨影响青藏高原棘球蚴病传播的生态学原理。并在此基础上,就青藏高原棘球蚴病的综合防治及高原生态系统的保护和可持续发展提出建议。
间日疟原虫是世界上分布最广泛的疟原虫,也是造成非洲以外地区人群感染疟疾的主要原因。间日疟原虫优先入侵网织红细胞,呈现高度的种特异性。间日疟原虫网织红细胞结合蛋白(PvRBP)家族作为入侵配体,介导了间日疟原虫入侵网织红细胞的新途径,是重要的免疫靶点。其中PvRBP2b与转铁蛋白受体1(TfR1),PvRBP2a与CD98的相互作用对间日疟原虫入侵网织红细胞至关重要。Pvrbp家族具有高度多态性并且可产生免疫逃避,能够增加间日疟入侵的效率和致病的严重程度。随着对间日疟原虫入侵分子机制研究的日益加深,研究产生高滴度抗体的疟疾疫苗将成为有效预防和控制疟疾的关键方法。本文就网织红细胞在间日疟原虫感染中的作用,以及PvRBP家族在人群产生免疫应答的研究进展作一综述。