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    1. 基于SWOT分析的中国全健康发展策略研究
    李真, 郭晓奎, 王月祥, 郑彬, 周晓农
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (3): 271-277.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.03.001
    摘要624)   HTML442)    PDF(pc) (1302KB)(255)    收藏

    肆虐全球的新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)疫情促使我国运用全健康理念来解决健康问题和完善我国公共卫生治理体系。本文运用态势分析法(SWOT)对当前在中国发展全健康带来的机遇和挑战进行分析,结果显示,在中国全健康发展的优势为我国政府对全健康备加重视,中国学者努力推动全健康的发展;劣势为科研基础薄弱,发展不均衡;机遇为国际上对全健康理念越来越认同,且一些组织开始应用全健康理念;挑战为我国面临人才竞争力不足和影响力低等。为此提出了在中国发展全健康的策略和重点研究内容,为推动全健康在中国的发展提供思路。

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    2. 1例牛带绦虫感染的诊断和鉴定
    乔飞, 刘鏊, 余复昌, 齐萌
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (3): 285-287.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.03.022
    摘要616)   HTML15)    PDF(pc) (635KB)(95)    收藏

    塔里木大学校医院于2020年6月收治1例男性绦虫病患者,患者自诉排便时发现粪便中有乳白色蠕动的虫体节片,有绦虫病史。经服南瓜子-槟榔合剂后排出1条乳白色带绦虫。收集排出的绦虫虫体,采用体视显微镜进行形态学观察,结合流行病学资料和饮食习惯,初步鉴定为牛带绦虫。基于绦虫线粒体nad1rrnS基因位点对虫体DNA的PCR扩增结果显示,分别扩增出约为529 bp和357 bp大小的片段。基于nad1基因位点,BLAST比对显示其与肯尼亚人源牛带绦虫(GenBank登录号AM503345)序列一致性为100%;基于rrnS基因位点,其与日本人源牛带绦虫(GenBank登录号AB031355)序列一致性为99.7%,鉴定为牛带绦虫。分别于3、6个月后对患者进行随访,患者身体状况良好,无绦虫节片排出。

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    3. 我国血吸虫病防治策略的科学基础与“十四五”展望
    冯家鑫, 公衍峰, 罗卓韦, 汪伟, 曹淳力, 许静, 李石柱
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (4): 428-435.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.04.002
    摘要573)   HTML187)    PDF(pc) (1321KB)(208)    收藏

    血吸虫病在我国流行至少有2 000多年的历史,严重危害人民群众的身体健康,影响社会经济的发展。根据血吸虫病的流行特点,我国在不同的历史时期先后实施了不同的防治策略。在不同防治策略的指引下,我国血吸虫病防治取得了显著成效,2015年全国实现了血吸虫病传播控制目标。我国各时期血吸虫病防治策略的提出均遵循了一定的科学基础和科学规律。本文对血吸虫病不同防治策略提出的科学基础进行综述,并对“十四五”时期的血吸虫病干预策略提出思考与建议,以期对消除血吸虫病工作有所裨益。

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    4. 疟疾诊疗指南
    国家传染病医学中心撰写组
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (4): 419-427.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.04.001
    摘要565)   HTML174)    PDF(pc) (1239KB)(328)    收藏

    疟疾是疟原虫感染所致的地方性传染病,主要在热带和亚热带地区流行。尽管世界卫生组织在2021年6月宣布我国通过了消除疟疾认证,但随着国际交流的日益频繁,我国面临的输入性疟疾的威胁将长期存在。为促进临床医师深入了解并合理治疗疟疾,提高疟疾诊治的水平,我们邀请国内感染性疾病及寄生虫病领域相关专家共同编写了“疟疾诊疗指南”(简称“指南”)。该指南对疟疾的病原学、流行病学、发病机制、临床表现、实验室检查、诊断及鉴别诊断、治疗、护理、预防等方面进行介绍,并重点强调了应对不同临床状况时的治疗方案,以便临床医师合理应用。

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    5. 肝细粒棘球蚴病手术患者病灶活性状态的影响因素分析
    侯娇, 温浩, 王明坤, 蒋铁民, 房彬彬, 李静, 张传山, 王慧
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (3): 309-314.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.03.005
    摘要559)   HTML8)    PDF(pc) (853KB)(66)    收藏

    目的 明确影响肝细粒棘球蚴病患者病灶活性状态的主要因素,为提高细粒棘球蚴病的诊疗效果提供决策依据。 方法 收集2018年1月至2020年6月在新疆医科大学第一附属医院行手术治疗的251例肝细粒棘球蚴病患者的人口学信息和临床相关资料,应用影像学技术,并结合其生物学特性将病灶CE1、CE2、CE3分为活性组,病灶CE4、CE5分为无活性组,以病灶有无活性为因变量进行单因素分析,根据单因素分析结果,构建非条件logistic回归模型,分析影响病灶活性状态的独立影响因素。使用SPSS 26.0统计软件进行统计学分析。 结果 本研究符合纳入标准的251例肝细粒棘球蚴病手术患者中,女性占57.0%(143例),高于男性的43.0%(108例);年龄为4~85岁,平均年龄为(41.31 ± 15.05)岁;患者文化程度偏低,高中及以下文化程度占79.3%(199例);居住乡村占比为66.9%(168例),高于居住城市的33.1%(83例);汉族占42.2%(106例),其他少数名族占57.8%(145例);初发占比为78.1%(196例),高于复发的21.9%(55例);有活性病灶占比为76.9%(193例),高于无活性病灶的23.1%(58例)。单因素分析结果显示,不同年龄、民族、有无复发、病灶数、病灶大小以及血液检查指标红细胞、凝血酶原时间、直接胆红素和碱性磷酸酶与肝细粒棘球蚴病患者的病灶活性状态差异有统计学意义(χ2 = 17.110、7.797、2.906、4.702、16.520,Z = -1.989、2.446、2.003、1.914;P < 0.1)。非条件logistic回归结果显示,影响肝细粒棘球蚴病患者病灶活性状态的主要因素为年龄和病灶大小, 年龄越小、病灶越大其病灶活性占比越高(P < 0.05)。 结论 通过对251例肝细粒棘球蚴病手术患者的临床资料分析显示,年龄越小和病灶越大是影响肝细粒棘球蚴病患者病灶活性状态的独立影响因素。

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    6. 2004—2020年全国棘球蚴病疫情分析
    韩帅, 蒉嫣, 薛垂召, 张雅兰, 张本光, 李启扬, 王婷, 戴洋, 袁熠, 陶薇, 朱爱娅, 李正祥, 王子江, 唐磊, 吴文婷, 谢汉国, 姚立农, 杨益超, 伍卫平
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (4): 475-480.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.04.009
    摘要526)   HTML217)    PDF(pc) (1321KB)(154)    收藏

    目的 了解我国棘球蚴病疫情分布状况及流行病学特点,为优化防治策略提供依据。 方法 收集2004—2020年国家传染病报告信息管理系统中全国棘球蚴病报告病例的数据,采用Microsoft Office 2016软件对报告病例的时间分布、地区分布、人群分布进行描述性统计分析。 结果 2004—2020年全国31个省(直辖市、自治区)共报告棘球蚴病病例66 040例,其中9个流行省份[新疆(包括新疆生产建设兵团)、四川、青海、甘肃、宁夏、西藏、内蒙古、陕西和云南]报告65 340例,占全国总报告病例数的98.9%,22个非流行省份报告700例,占全国报告病例的1.1%。男性31 494例,女性34 546例。全国报告棘球蚴病例数从2004年的991例上升至2020年的3 650例,呈逐年增多的趋势(z = 2.27,P < 0.05)。非流行省份报告棘球蚴病例数从2004年的17例上升至2020年的56例,亦呈逐年增多趋势(z = 4.1675,P < 0.05)。报告病例年龄分布主要以≥ 20岁年龄组为主,占91.3%(60 271/66 040),年龄不足1岁11例,≥ 85岁200例;职业分布中牧民和农民占全国报告病例数的72.8%(48 074/66 040),其他主要为家务及待业者(5.5%,3 606/66 040),学生(4.6%,3 034/66 040)。2020年非流行区共报告56例,河南报告最多(16例);其中输入性病例38例,由新疆输入24例;10个省份存在疑似本地感染病例。 结论 我国西部9个省份的棘球蚴病流行仍然十分严重,报告病例数呈增多趋势。牧民和农民、青中年为高发人群。

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    7. 基于全健康理念的新发传染病综合监测预警体系:结构与创新
    李慧敏, 刘婧姝, 王希涵, 赵翰卿, 解艺, 尹静娴, 吕超, 周楠, 蒋天哥, 谷思雨, 殷堃, 周晓农, 郭晓奎, 胡沁沁
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (5): 572-578.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.05.002
    摘要522)   HTML187)    PDF(pc) (1767KB)(279)    收藏

    全健康(One Health)是对健康概念的升级和优化,全健康理念强调人-动物-环境三者的共同健康,提倡使用跨学科协作、多部门协调和多组织协同的全健康研究方法解决科学问题。监测预警体系是应对突发公共卫生事件防控的基础,随着新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的全球大流行和新发传染病(EID)的不断出现,世界各国现有的监测预警体系面临新的挑战。本文从全健康理念出发,通过阐述全健康理念基础下的组织架构、人兽共患病和环境科学等监测网络、EID报告流程、教育和政策等层面的支持与保障,构建新型EID综合监测预警体系,并对构建的EID综合监测预警体系提出实践和应用前景,以便为COVID-19和今后可能出现的EID的预防和控制提供指导性建议。

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    8. 食生三文鱼致感染阔节双叶槽绦虫1例
    欧阳兵, 李仁喜
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (3): 295-298.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.03.023
    摘要504)   HTML54)    PDF(pc) (1795KB)(149)    收藏

    湘南学院附属医院于2021年9月收治1例58岁男性患者,自诉发现右颈部肿块伴疼痛1周,有长期生食三文鱼、生腌虾等饮食习惯。查体:颈软,气管居中,双侧甲状腺未扪及肿物,右侧胸锁乳突肌可扪及肿物大小约5 cm × 5 cm × 3 cm,质地中等,形状规则,边界欠清,活动度差,不随吞咽上下活动,右颈部及锁骨上窝可扪及多发肿大淋巴结,大者约2 cm × 1 cm,质地中等,活动度可。血常规示嗜酸粒细胞计数2.1 × 109/L(0.02 × 109/L~0.52 × 109/L),嗜酸粒细胞百分比10.4%(0.4%~8.0%);粪常规未见明显异常。血清裂头蚴IgG抗体阳性。颈部彩超示右侧胸锁乳突肌内探及多发囊实性混合回声区,范围约60 mm × 25 mm × 53 mm,形态欠规则,边界欠清,内部回声欠均匀;肿物包膜完整,内似有蜷曲的条索状物,包膜周围血供丰富。颈部增强CT示:右侧胸锁乳突肌下端明显膨大,密度不均,其内可见多发低密度区,增强时实质部分可见环形强化。术中探查见右侧胸锁乳突肌肿物具有完整包膜,切开囊内有无色液体流出、3条白色寄生虫缓慢蠕动。虫体乳白色、长带状,长约15 cm,头节细小、呈匙形,背腹面各有1条窄而深凹的吸槽,体前端有凹陷且稍大,体不分节但具有横皱褶,尾部细。结合虫体形态学鉴定和患者流行病学史,诊断为阔节裂头蚴感染。术后予吡喹酮(总剂量120 mg/kg,分5日服,一日3次)驱虫治疗,3月后随访未见异常。

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    9. 中国奶牛源微小隐孢子虫分子流行病学及其亚型分布
    陈远才, 黄建营, 李俊强, 张龙现
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (3): 278-284.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.03.002
    摘要477)   HTML55)    PDF(pc) (1028KB)(88)    收藏

    在全球范围内,大多数微小隐孢子虫亚型为人兽共感染虫株。奶牛是微小隐孢子虫自然感染的重要宿主,也是人隐孢子虫病的重要传染来源。本文阐述了奶牛源微小隐孢子虫分子流行病学研究进展,分析中国奶牛源微小隐孢子虫Ⅱd亚型的分布特征和多样性分布规律,探讨Ⅱd亚型变异发展趋势,这对微小隐孢子虫病的防控具有重要意义。

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    10. 2022年全国疟疾疫情特征分析
    张丽, 易博禹, 尹建海, 夏志贵
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2023, 41 (2): 137-141.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2023.02.002
    摘要471)   HTML54)    PDF(pc) (1550KB)(339)    收藏

    收集整理寄生虫病防治信息管理系统中2022年全国31个省(直辖市、自治区,未包括台湾、香港和澳门地区)疟疾疫情数据资料,对疟疾疫情特征进行统计分析。2022年全国报告疟疾病例845例,较2021年(799例)增加了5.8%;其中境外输入性病例844例,长潜伏期再燃三日疟病例1例(由广东省报告);中国籍820例(占97.0%,820/845),外国籍25例(占3.0%,25/845);男女性别比为17.0:1,50~59岁年龄组的病例最多(占29.5%,249/845);恶性疟494例(占58.5%,494/845),间日疟204例(占24.1%,204/845),卵形疟108例(12.8%,108/845),三日疟31例(占3.7%,31/845),混合感染8例(占0.9%,8/845)。26个省(直辖市、自治区)报告疟疾病例,病例数位居前5位的省份依次为广东(182例)、云南(136例)、四川(72例)、浙江(64例)和河南(59例),合计报告513例(占60.7%,513/845)。全国报告疟疾危重症病例36例(占4.3%,36/845),死亡病例6例(占0.7%,6/845)。虽然我国已连续6年无本土原发蚊传疟疾病例报告,但依然存在聚集性输入和输入再传播风险,消除后应继续加强疟疾监测与响应,及时发现、准确诊断和规范治疗疟疾病例,减少危重症或死亡,防止出现本地再传播。

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    11. 疟原虫纳虫空泡膜功能及其相关蛋白的研究进展
    葛洁云, 刘蕾, 孙毅凡, 程洋
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (3): 402-410.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.03.019
    摘要461)   HTML60)    PDF(pc) (2258KB)(83)    收藏

    疟疾是威胁全球人类健康的重要传染病之一。如何抑制疟疾的传播,仍然是一个亟待解决的问题。当疟原虫入侵宿主细胞后,会在胞内生长、繁殖,造成严重的病理损伤。而纳虫空泡膜作为宿主细胞与疟原虫直接接触的界面,对疟原虫生存状态有重要意义。本文简要介绍了疟原虫纳虫空泡膜的形成及其与疟原虫细胞质质膜、管状囊泡网络之间的关联,对红内期、肝内期与有性期纳虫空泡膜相关蛋白及其功能进行归纳总结,并对疟疾防治策略提出了展望。

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    12. 青藏高原棘球蚴病的传播生态学
    左清秋, 郑佳鑫, 王刚, 王旭, 王小明, 王正寰
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (4): 524-535.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.04.017
    摘要456)   HTML195)    PDF(pc) (1351KB)(90)    收藏

    野生动物疫源性疾病不但威胁人类健康,还严重影响全球的生物多样性保护。我国青藏高原东部牧区是世界范围内已知人棘球蚴病患病率最高的地区。当地多样的野生和家养哺乳动物构成了棘球蚴病复杂而稳定的传播链。本文概述了青藏高原牧区棘球蚴病的流行病学研究现状,并从宿主动物群落结构和动态、宿主行为生态学特征、人类活动干扰等3个方面探讨影响青藏高原棘球蚴病传播的生态学原理。并在此基础上,就青藏高原棘球蚴病的综合防治及高原生态系统的保护和可持续发展提出建议。

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    13. 福建省人感染异尖线虫1例
    黄姝玲, 林诗涵, 邱希斌, 陈永煊, 林陈鑫
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (4): 556-558.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.04.023
    摘要449)   HTML11)    PDF(pc) (1193KB)(117)    收藏

    患者,男,46岁,于2021年12月在体检中行肠镜检查时,发现其回盲部寄生一条似寄生虫,可蠕动,予活检钳取出。肠镜下,虫体寄生部位的肠黏膜未见异常,肠腔内未见异常。取出的虫体经形态学鉴定,初步确定为简单异尖线虫;提取虫体DNA,进行PCR检测,所得扩增片段约为1 000 bp,测序后经BLAST比对分析,与简单异尖线虫的序列一致性达99%;经系统进化树分析,与简单异尖线虫聚为一簇。确认该患者回盲部寄生的虫体为简单异尖线虫。患者自述,长期居住于东南沿海城市,有多年食生海鲜制品史。取出虫体后未诉有不适感,故未行其他检查和治疗。

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    14. 间日疟原虫入侵网织红细胞相关蛋白的研究进展
    石天琪, 陈军虎
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (3): 396-401.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.03.018
    摘要447)   HTML10)    PDF(pc) (679KB)(91)    收藏

    间日疟原虫是世界上分布最广泛的疟原虫,也是造成非洲以外地区人群感染疟疾的主要原因。间日疟原虫优先入侵网织红细胞,呈现高度的种特异性。间日疟原虫网织红细胞结合蛋白(PvRBP)家族作为入侵配体,介导了间日疟原虫入侵网织红细胞的新途径,是重要的免疫靶点。其中PvRBP2b与转铁蛋白受体1(TfR1),PvRBP2a与CD98的相互作用对间日疟原虫入侵网织红细胞至关重要。Pvrbp家族具有高度多态性并且可产生免疫逃避,能够增加间日疟入侵的效率和致病的严重程度。随着对间日疟原虫入侵分子机制研究的日益加深,研究产生高滴度抗体的疟疾疫苗将成为有效预防和控制疟疾的关键方法。本文就网织红细胞在间日疟原虫感染中的作用,以及PvRBP家族在人群产生免疫应答的研究进展作一综述。

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    15. 骨桥蛋白表达水平对多房棘球蚴原头节生长发育的影响
    卓怡呈, 杨海成, 刘程豪, 张宝财, 多小勇, 张示杰
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (3): 299-304.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.03.004
    摘要445)   HTML17)    PDF(pc) (2036KB)(55)    收藏

    目的 探讨骨桥蛋白(OPN)表达水平对多房棘球蚴原头节生长发育的影响。 方法 从感染多房棘球蚴的长爪沙鼠体内分离原头节,体外培养3 d后,分为沉默EmOPN(LV-EmOPN-734)组、沉默对照(LV3-NC)组、过表达EmOPN(LV-EmOPN-0423)组、过表达对照(LV5-NC)组等4组,每组设置3个平行孔,每孔含原头节约5 000个。LV-EmOPN-734组中加入LV-EmOPN-734慢病毒稀释液(终浓度为1.4 × 107 TU/ml)、LV-EmOPN-0423组中加入LV-EmOPN-0423慢病毒稀释液(终浓度为4.83 × 108拷贝/ml),相应对照组加入等量的慢病毒稀释液(空质粒)。感染后72 h,荧光显微镜下观察各组原头节的荧光强度,蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测原头节中OPN的相对表达量,半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)检测试剂盒检测原头节Caspase-3活性,EdU细胞成像试剂盒检测原头节增殖能力。感染后72 h,将原头节与大鼠肝癌细胞共培养8~12周,扫描电镜下观察多房棘球蚴囊泡生发层的显微结构。采用t检验对组间差异进行统计学分析。 结果 慢病毒感染原头节后72 h,荧光显微镜下可见慢病毒侵入原头节内,呈环状或点状分布。Western blotting结果显示,LV-EmOPN-734组EmOPN相对表达量为0.43 ± 0.04,低于LV3-NC组的0.80 ± 0.07(t = 8.623, P < 0.01);LV-EmOPN-0423组EmOPN相对表达量为1.18 ± 0.21,高于LV5-NC组的0.73 ± 0.06(t = 3.333, P < 0.05)。Caspase-3活性检测结果显示,LV-EmOPN-734组Caspase-3活性为(61.55 ± 1.64)μmol/L,高于LV3-NC组的(28.20 ± 2.16)μmol/L(t = 24.57, P < 0.01);LV-EmOPN-0423组Caspase-3活性为(50.11 ± 6.45)μmol/L,低于LV5-NC组的(78.22 ± 16.43)μmol/L(t = 3.185,P < 0.05)。EdU细胞成像试剂盒检测结果显示,LV-EmOPN-734组EdU+原头节数/总原头节数为0.47 ± 0.06,低于LV3-NC组的0.72 ± 0.10(t = 3.663, P < 0.05);LV-EmOPN-0423组EdU+原头节数/总原头节数为0.81 ± 0.09,高于LV5-NC组的0.54 ± 0.06(t = 4.309, P < 0.05)。扫描电镜观察结果显示,LV-EmOPN-734组囊泡生发层细胞出现塌陷、皱缩、脱落,失去正常结构;LV-EmOPN-0423组囊泡生发层细胞膜完整,形态饱满,形成生发小囊并长出小蒂与生发层相接。 结论 OPN表达水平的升高/降低可促进/抑制多房棘球蚴原头节的生长发育。

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    16. 刚地弓形虫ROP16蛋白对MH-S细胞极化和凋亡的影响及其相关机制
    李佳铭, 王艺璇, 杨宁爱, 马慧慧, 兰敏, 刘春兰, 赵志军
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (5): 579-586.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.05.003
    摘要439)   HTML19)    PDF(pc) (1450KB)(108)    收藏

    目的 探究刚地弓形虫棒状体蛋白16(ROP16)在小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S细胞)中的表达及其对细胞极化和凋亡的影响和相关机制。 方法 利用携带绿色荧光标签的ROP16过表达慢病毒转染MH-S细胞,构建稳定表达ROP16的ROP16-MH-S细胞株(过表达组),同时设空载体慢病毒转染对照组(空载体组)和无转染对照组(对照组)。转染72 h后免疫荧光法检测ROP16-MH-S中ROP16的表达及其在细胞中的定位。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的转录水平为内参照,RT-qPCR检测ROP16-MH-S细胞中促炎(M1)因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-18、IL-6、IL-12和抗炎(M2)因子IL-10、转化生长因子-β(TGF-β),以及抑凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和促凋亡基因Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)、Caspase 9等mRNA的相对转录水平;Western blotting检测ROP16-MH-S细胞中极化蛋白精氨酸酶1(Arg-1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、705位点磷酸化(pTyr705)-STAT3、STAT6、pTyr641-STAT6和凋亡蛋白Caspase 9、Caspase 3、Bcl-2、Bax蛋白的相对表达水平;流式细胞术检测ROP16-MH-S细胞的凋亡情况。组间比较采用单因素方差分析。 结果 转染后72 h,空载体组和过表达组90%以上的细胞可见较强的绿色荧光,过表达组细胞中可见明显红色荧光聚集在ROP16-MH-S细胞核及其周围。RT-qPCR结果显示,过表达组ROP16 mRNA的相对转录水平为8 023.459 ± 39.325,高于空载体组(5.540 ± 0.001)(F = 83 188,P < 0.01);Western blotting检测结果显示,过表达组ROP16蛋白的相对表达水平为16.349 ± 0.746,高于空载体组(1.291 ± 0.333)(F = 831.7,P < 0.01)。RT-qPCR结果显示,过表达组促炎(M1)因子IL-1β、TNF-α、IL-18、IL-6、IL-12 mRNA的相对转录水平分别为0.495 ± 0.002、0.337 ± 0.007、0.378 ± 0.014、0.474 ± 0.035和0.730 ± 0.021,均低于空载体组(0.994 ± 0.043、1.165 ± 0.034、0.943 ± 0.005、1.153 ± 0.028、0.926 ± 0.031)(F = 261.7、536.5、1 682.0、225.0、78.5,P < 0.01);抗炎(M2)因子IL-10、TGF-β mRNA的相对转录水平分别为7.013 ± 0.032和1.608 ± 0.024,均高于空载体组(0.790 ± 0.031、1.091 ± 0.027)(F = 23 835.0、200.1,P < 0.01)。Western blotting检测结果显示,过表达组Arg-1、pTyr705-STAT3、pTyr641-STAT6蛋白相对表达水平分别为2.337 ± 0.089、3.471 ± 0.046、3.905 ± 0.045,均高于空载体组(0.871 ± 0.014、1.482 ± 0.071、1.514 ± 0.050)(F = 640.8、1 608.0、3 528.0,P < 0.01)。流式细胞术检测结果显示,过表达组细胞凋亡率为(2.990 ± 0.042)%,低于对照组(6.480 ± 0.071)%和空载体组(5.655 ± 0.290)%(F = 219.7,P < 0.01)。Western blotting检测结果显示,过表达组促凋亡蛋白Bax、Caspase 3、Caspase 9的相对表达水平分别为0.558 ± 0.005、0.640 ± 0.011、0.593 ± 0.026,Bax/Bcl-2为0.453 ± 0.011,均低于空载体组(0.991 ± 0.010、0.926 ± 0.006、0.963 ± 0.012、0.834 ± 0.008)(F = 2 850.0、1 200.0、359.3、2 337.0,P < 0.01)。RT-qPCR检测结果显示,过表达组促凋亡基因Bax、Caspase 3、Caspase 9 mRNA的相对转录水平分别为0.588 ± 0.086、0.563 ± 0.025和0.403 ± 0.014,Bax/Bcl-2为0.158 ± 0.008,均低于空载体组(0.924 ± 0.016、0.937 ± 0.041、0.807 ± 0.032、0.779 ± 0.014)(F = 24.7、78.6、154.9、265.5,P < 0.01);过表达组抑凋亡基因Bcl-2 mRNA的相对转录水平为3.702 ± 0.362,高于空载体组(1.186 ± 0.006)(F = 104.1,P < 0.01)。 结论 ROP16蛋白在ROP16-MH-S细胞中(主要位于细胞核及其周围)稳定表达,可激活STAT3、STAT6,磷酸化Tyr705-STAT3、Tyr641-STAT6,进而调控细胞向M2极化,抑制细胞凋亡。

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    17. 1例罕见原发性阿米巴脑膜脑炎病例的实验室诊断
    陈睿, 袁琼辉, 夏万宝
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (5): 616-621.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.05.008
    摘要434)   HTML20)    PDF(pc) (2302KB)(99)    收藏

    目的 对1例罕见原发性阿米巴脑膜脑炎病例进行实验室诊断。 方法 收集患者病例资料,采集患者脑脊液,采用直接涂片和瑞氏-姬姆萨染色后镜检,提取患者脑脊液基因组DNA,采用耐格里属特异性引物和耐格里阿米巴种特异性引物PCR扩增内转录间隔区1(ITS1)-5.8S-ITS2序列,测序后在GenBank中进行BLAST比对,使用MEGA5软件以邻接法构建系统进化树;患者脑脊液送杭州金域医学检验所有限公司进行DNA-病原微生物宏基因组检测。 结果 患者,男,42岁,宁波象山人,全身严重烧伤卧床20年。2022年7月21日因发热、寒战、头痛、咽痛、恶心、呕吐等至浙江省宁波市象山县第一人民医院就诊,查体:体质量45 kg,体温40.5 ℃,神志不清,双眼上翻,结膜充血,两侧瞳孔直径3 mm,等大等圆,牙关紧闭,颈部强直,鼾声呼吸,四肢抽搐,肌肉痉挛,小便失禁,皮肤、黏膜潮红等多种临床症状。头颅和胸部CT未见明显异常。腰椎穿刺脑脊液压力为39 cmH2O(1 cmH2O = 0.098 kPa)。脑脊液检测结果,直接涂片镜检可见快速连续呈阿米巴样运动的阿米巴滋养体,瑞氏-姬姆萨染色涂片镜检可见阿米巴滋养体;属和种特异性引物分别扩增出183 bp和311 bp的片段;DNA-病原微生物宏基因组检出福氏耐格里阿米巴序列21 534条,相对丰度为99.8%,未检出其他病原微生物的序列。序列比对结果显示,扩增获得的ITS1-5.8S-ITS2序列与福氏耐格里阿米巴Na 420c株(GenBank登录号为AJ132028)的一致性为99%,在系统进化树上与耐格里属阿米巴聚在同一支上。确诊该病例为福氏耐格里阿米巴感染。给予美罗培南抗感染、甲硝唑抗阿米巴、氟康唑抗真菌治疗,20%甘露醇脱水降颅压治疗,但因患者病情急剧恶化引起呼吸及心力衰竭,于2022年7月23日抢救无效死亡。 结论 综合该患者的临床症状、脑脊液的病原学检查和分子生物学检测,确诊为福氏耐格里阿米巴感染。

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    18. 基于重组酶聚合酶扩增的曼氏血吸虫核酸可视化检测技术的建立及初步评价
    王丽萍, 吕超, 秦志强, 许静, 邓王平
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (3): 337-343.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.03.009
    摘要429)   HTML6)    PDF(pc) (2195KB)(82)    收藏

    目的 结合重组酶聚合酶扩增技术(RPA)和侧流层析试纸条(LFD),建立一种快速、便捷的曼氏血吸虫核酸可视化检测方法,并初步评价其检测效能。 方法 以曼氏血吸虫细胞色素c氧化酶亚基1(SmCOX1)基因为靶序列,利用Primer Primer 5软件结合手工辅助,设计特异性引物和探针并进行筛选,建立曼氏血吸虫核酸LFD-RPA检测方法。制备不同浓度(1 ng/μl、100 pg/μl、10 pg/μl、1 pg/μl、100 fg/μl、10 fg/μl、1 fg/μl、0.1 fg/μl)的曼氏血吸虫成虫基因组DNA和含有不同拷贝数浓度(105、104、103、102、101、100、10-1拷贝/μl)的SmCox1重组质粒DNA,评价所建立方法的敏感度。以曼氏血吸虫成虫、日本血吸虫成虫、埃及血吸虫虫卵、感染曼氏血吸虫双脐螺(阳性双脐螺)和阴性双脐螺、感染日本血吸虫钉螺(阳性钉螺)和阴性钉螺、华支睾吸虫成虫、大片形吸虫成虫、卫氏并殖吸虫成虫基因组DNA为模板,评价所建立方法的特异性。将30只雌性BALB/c小鼠随机分为40尾感染组、80尾感染组和健康对照组,每组10只,建立感染小鼠模型,提取感染后1~8周的小鼠粪样和血样DNA,评价LFD-RPA方法检测曼氏血吸虫早期感染的效能。 结果SmCox1基因片段为靶标建立的曼氏血吸虫LFD-RPA检测方法以39 ℃、20 min为最佳反应温度和时间。敏感度检测结果显示,SmCox1-LFD-RPA方法对曼氏血吸虫成虫基因组、SmCox1重组质粒的检出限分别为10 fg/μl和10拷贝/μl。特异性检测结果显示,SmCox1-LFD-RPA方法仅对曼氏血吸虫和阳性双脐螺DNA特异,与其他吸虫DNA无交叉反应。SmCox1-LFD-RPA方法对感染小鼠1~8周血样及粪样DNA的检测结果显示,40尾组小鼠自感染后3周开始出现阳性条带,80尾组小鼠自感染后1周开始出现阳性条带,且条带颜色随感染时间延长逐渐加深。 结论 建立了曼氏血吸虫LFD-RPA检测方法,其检出限低、特异性强,操作简单快捷。

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    19. HIV合并人芽囊原虫和蓝氏贾第鞭毛虫感染1例
    朱名超, 朱娅
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (3): 315-318.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.03.024
    摘要425)   HTML45)    PDF(pc) (1900KB)(95)    收藏

    患者,女,64岁,农民,以“腰部间断性疼痛不适”入院。患者人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原/抗体检测结果为阳性,粪样常规生理盐水涂片显微镜镜检检出人芽囊原虫和蓝氏贾第鞭毛虫包囊,人芽囊原虫包囊呈圆形、卵圆形,大小不一,1~2颗颗粒状核;碘液染色虫体中间有空泡,在空泡与胞膜之间有不规则、闪亮、似月牙状的边缘,其内见多个小亮点;蓝氏贾第鞭毛虫包囊呈椭圆形,囊壁较厚,与虫体间有明显的间隙,碘液染色囊内轴柱明显,可见2~4个核,核位于轴柱两侧,苏木素染色后包囊内可见明显的4个紫红色的核。巢式PCR从患者粪样DNA中扩增出511 bp的条带,与蓝氏贾第鞭毛虫基因序列TSA417(GenBank登录号AF065606)的一致性为99%;用人芽囊原虫BhRDr和RD5特异引物PCR扩增核糖体小亚基基因,扩增出约600 bp的条带,测序结果为人芽囊原虫ST1型。结合患者饮生水史、使用非水冲式厕所、饲养猫、犬等流行病学史,诊断为HIV合并人芽囊原虫和蓝氏贾第鞭毛虫混合感染。给予甲硝唑(0.2 g/次,3次/d)治疗4 d后,患者症状缓解并出院。

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    20. 地塞米松对实验性脑型疟小鼠的免疫保护作用
    黄媛媛, 姚世杰, 卞致芳, 温易鑫, 郑丽, 曹雅明
    中国寄生虫学与寄生虫病杂志    2022, 40 (4): 446-453.   DOI: 10.12140/j.issn.1000-7423.2022.04.005
    摘要418)   HTML8)    PDF(pc) (2072KB)(83)    收藏

    目的 探讨地塞米松(DEX)对实验性脑型疟(ECM)小鼠的免疫保护作用。 方法 将C57BL/6小鼠随机分为感染组、DEX治疗组和对照组,每组20只。感染组和DEX治疗组小鼠经腹腔注射1 × 106个伯氏疟原虫ANKA感染红细胞,对照组小鼠不作任何处理。DEX治疗组小鼠在感染后第1、2天腹腔注射地塞米松磷酸钠(80 mg/kg)进行治疗,对照组和感染组则注射等体积生理盐水。感染后第3 天起,取感染小鼠尾静脉血制备血涂片,吉氏染色后计数感染红细胞,观察原虫血症变化情况。每日记录小鼠的存活和与ECM相关的神经体征。感染后第3、5天,取小鼠脾脏制备脾细胞悬液,流式细胞术检测脾Th1细胞,调节性T细胞(Tregs),表达程序性死亡受体-1(PD-1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)的CD4+ T细胞以及M1、M2型巨噬细胞的变化情况。取脾细胞悬液体外培养48 h后取上清,ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-10等促炎/抑炎相关因子的分泌水平。感染后第6天,伊文思蓝(EB)染色法评价DEX治疗后对小鼠血脑屏障的影响。流式细胞术和细胞因子检测结果的比较采用One-way ANOVA检验,小鼠原虫血症比较采用独立样本t检验,生存率的比较采用Log-Rank检验。 结果 感染后第3天,感染组和DEX治疗组小鼠外周血开始出现疟原虫感染红细胞,感染后第9天的原虫血症分别为(25.89 ± 1.97)%和(22.91 ± 3.21)%,二者差异无统计学意义(t = 1.12,P > 0.05)。感染组小鼠在感染后第6天开始出现死亡,伴有ECM神经症状,感染后第9天全部死亡;DEX治疗组小鼠在感染后第8天出现死亡,伴有ECM神经症状,第10天全部死亡。与感染组比较,DEX治疗延缓了脑型疟的发生(χ2 = 4.31,P < 0.05)。感染后第3、5天,DEX治疗组小鼠表达PD-1的脾CD4+ T细胞比例分别为(18.10 ± 0.52)%和(39.13 ± 0.91)%,高于对照组的(11.53 ± 1.00)%和(13.72 ± 1.78)%以及感染组的(14.87 ± 1.02)%和(35.87 ± 0.74)%(F = 41.41、378.00,P < 0.05、0.01);表达CTLA-4的脾CD4+ T细胞比例分别为(3.05 ± 0.12)%和(8.70 ± 1.01)%,高于对照组的(0.28 ± 0.02)%和(0.45 ± 0.10)%以及感染组的(0.44 ± 0.13)%和(0.68 ± 0.13)%(F = 730.20、191.80,P < 0.01)。感染后第3、5天,DEX治疗组小鼠脾细胞中Th1细胞的比例分别为(0.14 ± 0.04)%和(0.63 ± 0.06)%,低于感染组的(0.30 ± 0.06)%和(0.80 ± 0.04)%(F = 10.93、56.58,P < 0.05、0.01)。感染后第5天,DEX治疗组小鼠脾细胞中Tregs细胞的比例为(1.30 ± 0.08)%,高于对照组的(1.12 ± 0.08)%和感染组的(0.86 ± 0.03)%(F = 36.51,P < 0.01)。感染后第3天,DEX治疗组小鼠脾细胞中M1型巨噬细胞的比例为(0.43 ± 0.12)%,低于感染组的(1.03 ± 0.14)%(F = 29.81,P < 0.01)。感染后第5天,DEX治疗组小鼠脾细胞中M2型巨噬细胞比例为(1.56 ± 0.20)%,高于对照组的(0.49 ± 0.04)%和感染组的(0.87 ± 0.06)%(F = 60.21,P < 0.01)。感染后第3、5天,DEX治疗组小鼠脾细胞培养上清中TNF-α水平分别为(140.18 ± 27.38)和(328.23 ± 75.70)pg/ml,低于感染组的(247.34 ± 35.34)和(650.88 ± 43.56)pg/ml(F = 11.70、32.09,P < 0.01);IL-6水平分别为(40.03 ± 9.09)和(1 270.52 ± 83.75)pg/ml,低于感染组的(511.97 ± 41.70)和(4 131.31 ± 645.16)pg/ml(F = 299.40、93.11,P < 0.01);IL-10的水平分别为(283.06 ± 44.83)和(592.63 ± 51.69)pg/ml,高于感染组的(118.82 ± 8.47)和(424.49 ± 51.44)pg/ml(F = 36.04、73.95,P < 0.01)。感染后第6天,感染组小鼠的血脑屏障破坏严重,EB渗入脑组织,呈现深蓝色;对照组小鼠血脑屏障完好,未见明显的EB渗入;DEX治疗组小鼠仅有少量EB渗入脑组织。 结论 在ECM小鼠中,DEX通过提高CD4+ T细胞表面免疫抑制分子PD-1和 CTLA-4的水平调控Th1和Tregs细胞活化与应答强度,促进M1向M2型巨噬细胞极化,抑制促炎因子的分泌水平,减轻ECM小鼠血脑屏障的损伤,从而降低ECM的致病性。

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