目的 探索刚地弓形虫感染对早孕期母胎界面蜕膜免疫细胞内吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达水平的影响,并分析其与不良妊娠结局的关系。方法 40只C57BL/6野生型孕鼠分为野生型对照组(20只)和感染组(20只),IDO基因敲除(IDO-/-)孕鼠(20只)为IDO-/-感染组。孕8 d时,2个感染组小鼠分别腹腔注射250个弓形虫RH速殖子(悬于250 µl PBS),野生型对照组小鼠腹腔注射等量PBS。孕14 d时,观察各组孕鼠的精神状态,取孕鼠胎盘、胎鼠并称重,计算异常胎鼠率。取自愿终止妊娠的健康人早孕期蜕膜组织,采用人淋巴细胞分离液制备人蜕膜单个核细胞悬液。取细胞悬液,分为对照组和弓形虫感染组(每组1.5 × 107个细胞),对照组不处理,感染组按弓形虫速殖子与细胞1:3的比例感染,培养20 h后收集两组细胞。采用流式细胞术检测蜕膜自然杀伤(dNK)细胞、蜕膜巨噬细胞(dMϕ)、蜕膜树突状细胞(dDC)和蜕膜髓源性抑制细胞(dMDSC)内IDO的表达水平。利用CD3-CD56+、CD14、DC、CD33磁珠分选试剂盒分别分离纯化dNK细胞、dMϕ、dDC和dMDSC,各类细胞均设对照组和弓形虫感染组(每组1 × 107个细胞),对照组不处理,感染组按弓形虫速殖子与细胞1:3的比例感染,培养20 h后收集两组细胞并提取蛋白。采用蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测各类蜕膜免疫细胞内IDO的表达水平。采用GraphPad Prism 10.1.2软件进行统计学分析,组间数据分析采用独立样本Student’s t检验。结果 IDO-/-感染组孕鼠较野生型感染组孕鼠不良妊娠结局明显加重,精神更萎靡,行动更迟缓,胎盘淤血更严重、干瘪塌陷无弹性,且胎鼠发育不良,伴有吸收胎出现。野生型感染组孕鼠的胎盘、胎鼠质量分别为(55.73 ± 5.52)、(106.88 ± 37.33)mg,均低于野生对照组的(81.73 ± 9.35)、(198.66 ± 26.58)mg(t = 6.329、5.299,均P < 0.01);IDO-/-感染组孕鼠的胎盘胎鼠质量分别为(39.87 ± 4.24)、(51.67 ± 19.75)mg,均较野生型感染组孕鼠减轻(t = 5.726、3.241,P < 0.01)。野生型对照组未出现异常胎鼠;野生型感染组异常胎鼠率为(40.60 ± 20.69)%,高于野生型对照组(t = 5.193,P < 0.01);IDO-/-感染组异常胎鼠率为(93.33 ± 10.80)%,高于野生型感染组(t = 5.600,P < 0.01)。流式细胞术检测人蜕膜单个核细胞结果显示,感染组dNK细胞内IDO的阳性细胞率为(8.02 ± 3.20)%,与对照组的(9.65 ± 2.62)%差异无统计学意义(t = 2.025,P > 0.05);感染组dMϕ、dDC、dMDSC内IDO的阳性细胞率分别为(27.50 ± 6.24)%、(20.23 ± 3.20)%、(3.14 ± 0.57)%,均低于对应细胞对照组的(35.07 ± 8.11)%、(24.80 ± 4.13)%、(6.81 ± 0.88)%(t = 5.830、5.533、5.644,均P < 0.05)。感染后,IDO的阳性细胞率在dMDSC内下降幅度最大,下降了(53.20 ± 11.56)%;在dMϕ内次之,下降了(21.45 ± 3.65)%;在dDC和dNK细胞内分别下降了(18.22 ± 4.17)%、(17.84 ± 15.54)%。Western blotting结果显示,感染组dNK细胞、dMϕ、dDC、dMDSC中IDO的相对表达水平分别为0.91 ± 0.10、0.62 ± 0.12、0.75 ± 0.11、0.47 ± 0.06,均低于对应细胞对照组的1.04 ± 0.11、1.14 ± 0.09、1.11 ± 0.06、1.05 ± 0.03(t = 13.360、12.930、7.482、13.960,P < 0.05或 < 0.01)。感染后,IDO的相对表达水平在dMDSC内下降幅度最大,下降了(55.22 ± 16.12)%;在dMϕ内次之,下降了(46.30 ± 6.98)%;在dDC和dNK细胞内分别下降了(33.53 ± 7.78)%、(12.74 ± 0.67)%。结论 早孕期弓形虫感染可下调母胎界面中dNK细胞、dMϕ、dDC和dMDSC内IDO的表达水平,进而加重不良妊娠结局的发生,提示IDO表达下调与不良妊娠结局的发生密切相关。