目的 探讨多房棘球蚴感染早期对小鼠肝组织自然杀伤T(NKT)细胞数量、亚群及其功能的影响。方法 C57BL/6N小鼠随机分为对照组和感染组。感染组小鼠经肝门静脉注射2 000个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量生理盐水。感染后4周,取小鼠肝组织,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,免疫荧光染色观察肝组织NKT细胞变化。取肝组织制备淋巴细胞悬液,流式细胞术分析对照组和感染组小鼠肝组织NKT细胞及其不同亚群百分比,并检测NKT细胞及其不同亚群中抑制性受体[自然杀伤细胞凝集素样受体2族成员A(NKG2A)和程序性死亡受体(PD-1)]、激活性受体(NKG2D)、趋化因子受体[C-X-C基序趋化因子受体3(CXCR3)和CXCR6]、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达变化。结果 感染多房棘球蚴后4周,HE染色显示感染组小鼠肝组织内可见具有生发层结构的病灶,周围聚集大量的炎性细胞。免疫荧光染色显示,感染组小鼠肝组织每个视野的平均NKT细胞数为(1.20 ± 0.53)个,低于对照组的(3.73 ± 0.50)个(t = 6.01,P < 0.01)。流式细胞术结果显示,感染组小鼠肝组织NKT细胞、CD69+NKT细胞的占比分别为(11.83 ± 1.19)%、(76.93 ± 3.06)%,均低于对照组的(23.20 ± 0.20)%、(88.47 ± 1.53)%(t = 16.28、5.84,均P < 0.01)。感染组分泌IFN-γ和IL-10的肝组织NKT细胞的比例分别为(17.50 ± 5.04)%和(4.54 ± 0.20)%,均低于对照组的(61.90 ± 2.25)%和(10.24 ± 1.37)%(t = 13.93、7.15,P < 0.01、0.05);感染组分泌TGF-β1的肝组织NKT细胞的比例为9.04%(8.01%, 9.62%),高于对照组的3.68%(3.48%, 3.68%)(t = 8.60,P < 0.05);感染组分泌TNF-α的肝组织NKT细胞的比例为(20.83 ± 5.75)%,与对照组的(19.20 ± 5.91)%相比差异无统计学意义(t = 0.34,P > 0.05)。感染组肝组织NKG2A+NKT、CXCR3+NKT和CXCR6+NKT细胞的百分比分别为(13.90 ± 3.18)%、(26.77 ± 6.00)%、(57.20 ± 7.63)%,均低于对照组的(22.37 ± 2.61)%、(55.40 ± 13.64)%、(86.73 ± 2.72)%(t = 3.57、3.33、6.31,P < 0.05、0.05、0.01);感染组肝组织PD-1+NKT细胞的百分比为(10.04 ± 1.01)%,高于对照组的(6.56 ± 0.10)%(t = 5.92,P < 0.05);感染组肝组织NKG2D+NKT细胞的百分比为1.58%(1.56%,2.14%),与对照组的1.25%(1.15%,1.31%)(Z = -1.96,P > 0.05)相比差异无统计学意义。感染组肝组织CD4+NKT细胞、CD69+CD4+NKT细胞的比例分别为(42.67 ± 4.15)%、(44.80 ± 2.27)%,均低于对照组的(60.97 ± 1.80)%、(62.30 ± 3.16)%(t = 7.01、7.79,均P < 0.01)。感染组肝组织CD4-CD8-(双阴性,DN)NKT细胞、CD69+DN NKT细胞的比例分别为(45.63 ± 3.61)%、(44.53 ± 2.23)%,均高于对照组的(32.57 ± 2.06)%、(32.17 ± 1.34)%(t = 5.44、8.23,均P < 0.01)。感染组肝组织分泌IL-10的CD4+NKT细胞、分泌IFN-γ和TNF-α的DN NKT细胞占比分别为(9.97 ± 4.38)%、(15.87 ± 2.57)%、(6.61 ± 2.69)%,均低于对照组的(52.00 ± 4.20)%、(59.80 ± 4.70)%、(30.57 ± 2.02)%(t = 11.99、14.20、12.33,均P < 0.01)。感染组肝组织分泌IL-10和TGF-β1的CD8+NKT细胞占比分别为(55.90 ± 13.68)%和(45.87 ± 5.95)%,均高于对照组的(10.10 ± 3.24)%和(19.69 ± 10.25)%(t = 5.64、3.83,P < 0.01、0.05)。感染组NKG2A+CD4+NKT和CXCR3+CD4+NKT细胞的占比分别为(37.87 ± 4.80)%和(40.40 ± 9.48)%,均低于对照组的(52.80 ± 5.17)%和(57.00 ± 3.90)%(t = 3.66、2.81,均P < 0.05)。感染组NKG2A+DN NKT细胞的占比为(55.63 ± 3.46)%,高于对照组的(41.43 ± 2.31)%(t = 5.91,P < 0.01)。结论 在多房棘球蚴感染早期,小鼠肝组织中NKT细胞整体呈功能抑制或耗竭状态;其亚群中,CD4+NKT细胞低表达,CD8+NKT细胞通过分泌IL-10和TGF-β1发挥作用,高比例活化的DN NKT细胞则因NKG2A的高表达导致其细胞因子分泌能力受损。