恶性疟原虫感染的红细胞膜表面蛋白1模拟肽的筛选及鉴定

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2005, Vol. 23 ›› Issue (6): 2-391.

恶性疟原虫感染的红细胞膜表面蛋白1模拟肽的筛选及鉴定

郝文波,李明,徐伟文,王萍,陈白虹

南方医科大学生物技术学院,广州 510515

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2005-12-30 发布日期:2005-12-30

Screening and Preliminary Identification of Mimetic Peptides of Plasmodium falciparum-Infected Erythrocyte Membrane Surface Protein 1

HAO Wen-bo,LI Ming,XU Wei-wen,WANG Ping,CHEN Bai-hong

Tropical Disease Department,the Southern Medical University, Guangzhou 510515,China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2005-12-30 Published:2005-12-30

摘要/Abstract

摘要： 目的筛选恶性疟原虫感染的红细胞膜表面蛋白1（PfEMP?鄄1）的噬菌体表位模拟肽。方法细胞间粘附分子ICAM-1模拟12肽（KLYLIAEGSVAA）能模拟ICAM-1分子与疟原虫感染红细胞结合的功能，以展示该短肽的噬菌体为靶，采用差减筛选法（subtraction method）对噬菌体环7肽库进行3轮筛选，通过ELISA、竞争抑制试验鉴定获得的噬菌体短肽与ICAM-1之间的结合特性。对阳性克隆进行DNA及氨基酸序列分析并与PfEMP-1氨基酸序列进行同源性比较。结果 ELISA筛选22个克隆有3个为阳性克隆，氨基酸序列分析显示2个克隆的展示的短肽序列为C-ITAVPVR-C，另1为C-DIMGGYN-C。同源性分析未发现2短肽序列与野生型MC株恶性疟原虫PfEMP-1的氨基酸序列有同源性。但竞争抑制试验显示3个阳性克隆均可与15.2单抗间互相竞争抑制与ICAM-1分子的结合。结论获得2种PfEMP-1噬菌体构象表位模拟肽，两短肽能与ICAM-1分子特异性结合。

关键词: 恶性疟原虫, 红细胞膜表面蛋白1, 噬菌体随机肽库, 表位模拟肽

Abstract: Objective To screen and identify mimetic peptides of Plasmodium falciparum-infected erythrocyte membrane surface protein 1 in order to explore anti-adhesive agent against cerebral malaria. Methods Phage-borne peptide KLYLIAEGSVAA was used as panning targets to select target binders in a disulfide-constrained heptapeptides library. Three rounds of biopanning were carried out and then ELISA and competitive ELISA were used to evaluate the binding character between phage-borne peptides and ICAM-1. The insert DNA sequences of positive clones were determined and their amino acid sequences were deduced. Results After three-round panning, 22 clones were randomly chosen from the third panning and analyzed. Three clones showed positive interaction with ICAM-1, and two of them possessed the amino acid sequence C-ITAVPVR-C, the other one was C-DIMGGYN-C. These peptides specifically inhibited the binding of 15.2 antibody to ICAM-1 detected by competitive ELISA. Conclusion Two kinds of mimetic peptides of PfEMP-1 have been obtained, which can bind with ICAM-1 specifically.

Key words: Plasmodium falciparum, Erythrocyte membrane surface protein 1, Phage-displayed random peptide library, Mimetic peptide

郝文波;李明;徐伟文;王萍;陈白虹. 恶性疟原虫感染的红细胞膜表面蛋白1模拟肽的筛选及鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2005, 23(6): 2-391.

HAOWen-bo;LIMing;XUWei-wen;WANGPing;CHENBai-hong. Screening and Preliminary Identification of Mimetic Peptides of Plasmodium falciparum-Infected Erythrocyte Membrane Surface Protein 1[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2005, 23(6): 2-391.

[1]	周瑞敏, 纪鹏慧, 李素华, 杨成运, 刘颖, 钱丹, 邓艳, 鲁德领, 赵玉玲, 赵东阳, 张红卫. 河南省自赤道几内亚输入的恶性疟原虫抗药性基因多态性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(5): 593-600.
[2]	徐少杰, 陈绅波, 陈军虎. 恶性疟原虫重复散布家族基因转录调控的研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(3): 374-379.
[3]	田斌, 廖瑜, 文岚, 肖芳, 张兵, 申晓君. 长沙市122例输入性恶性疟原虫多药抗性基因1拷贝数变异分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(1): 127-131.
[4]	石明丽, 肖波, 江陆斌. 恶性疟原虫var基因的表达调控机制研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(6): 719-724.
[5]	史善美, 陈军虎. 恶性疟原虫RIFIN蛋白的结构和功能研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(2): 249-255.
[6]	张苍林, 聂仁华, 徐丹, 吕高伟, 王剑, 杨亚明, 邓艳, 刘言, 周红宁. 中缅边境地区恶性疟原虫Pfcrt、Pfmdr和PfK13基因多态性与体外药物敏感性相关性的分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(5): 580-588.
[7]	叶升玉, 成依依, 李曼, 周红宁. 我国恶性疟原虫主要药物抗性研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(5): 631-636.
[8]	周水茂, 涂祖武, 杨燕, 陈芳, 贾西帅. 环介导等温扩增检测恶性疟原虫与其他疟原虫的效果评价[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(4): 423-428.
[9]	叶升玉, 成依依, 李曼, 周红宁. 恶性疟原虫抗药性分子标记检测方法研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(4): 490-495.
[10]	李仁清, 王小梅, 孙玉兰, 吕燕宁, 窦相峰, 王全意. 宏基因组学二代测序技术在输入性疟疾诊断中的应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(6): 727-729.
[11]	牟畇珊, 李璐杰, 吴银娟, 李学荣. 疟原虫青蒿素耐药分子机制探索[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(6): 636-642.
[12]	刘纯, NdoumadiambaALFRED, MounzieGouGNONDA. 胶体金恶性疟原虫检测试剂盒在非洲加蓬的临床应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(6): 679-680.
[13]	毛强, 裴福全, 岑咏珍, 刘梦然, 张豪, 邓卓晖. 广东省1例输血性恶性疟病例的实验室检测和溯源调查[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(5): 529-533.
[14]	王志华, 魏春燕, 王恒. 恶性疟原虫非编码RNA的研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(4): 409-413.
[15]	董莹1*，邓艳1，徐艳春1，陈梦妮1，毛祥华1，孙艾明2，王剑1. 不同感染来源恶性疟原虫裂殖子表面蛋白3基因多态性分析及抗原表位预测[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(3): 3-210-217.