我国发现首例现代确诊血吸虫病病例迄今已120年，经过几代人的努力，血吸虫病防治工作取得举世瞩目的成就。至2023年底，全国实现血吸虫病传播阻断目标，78.49%的流行县均达到了消除目标。但受气候变化、自然灾害、人口流动等因素影响，全国要实现血吸虫病消除目标并持续巩固消除成果仍面临挑战。各地应继续坚持“以传染源控制为主、强化重点环境钉螺控制”的综合防治策略，加强监测预警和风险评估，以科技赋能，创新防治手段，强化能力建设，高质量推进消除进程。

收集监测报告管理系统中2024年全国31个省（自治区、直辖市，未包括台湾、香港和澳门地区）和新疆生产建设兵团疟疾流行病学个案调查表，对疟疾疫情特征进行统计分析。2024年全国报告疟疾病例3 157例，较2023年（2 488例）增加了26.9%；其中境外输入性病例3 155例，输血感染病例2例；恶性疟2 008例（占63.6%，2 008/3 157），间日疟798例（占25.3%，798/3 157），卵形疟274例（占8.7%，274/3 157），三日疟65例（占2.1%，65/3 157），混合感染12例（占0.4%，12/3 157）。男女性别比为12.4∶1；30~39岁年龄组的病例最多（占28.3%，895/3 157）；以出境务工为主（占69.2%，2 183/3 155）。除西藏自治区和新疆生产建设兵团外，其余30个省份均有疟疾病例报告，病例数位居前5位的省份依次为云南（564例）、广东（246例）、河南（241例）、山东（232例）和四川（220例），累计报告1 503例（占47.6%，1 503/3 157）。全国报告疟疾危重症病例112例（占3.5%，112/3 157），死亡病例15例（占0.5%，15/3 157）。我国已经连续8年无本土原发蚊传疟疾病例报告，但境外输入性疟疾带来的风险持续存在，须提高监测系统敏感性，及时发现、救治病例，减少恶性疟发展为危重症甚至死亡，避免间日疟引起继发传播。

目的 结合环介导等温扩增（LAMP）技术与规则成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白12a（CRISPR/Cas12a）系统，建立一种高度敏感、特异的日本血吸虫核酸片段的快速检测方法。方法 选取Sj28S核糖体基因片段作为靶序列，设计LAMP引物、单链DNA（ssDNA）和CRISPR RNA（crRNA），确定各组分浓度，筛选最佳反应体系和条件，建立日本血吸虫核酸LAMP-CRISPR/Cas12a快速荧光检测方法。用不同浓度的日本血吸虫成虫基因组DNA（1 ng/μl、100 pg/μl、10 pg/μl、1 pg/μl、100 fg/μl、10 fg/μl、1 fg/μl）及构建的含Sj28S核糖体基因片段的重组质粒（10⁶、10⁵、10⁴、10³、10²、10¹、10⁰、10^-1拷贝/μl）评估该方法的敏感性，用日本血吸虫、曼氏血吸虫、华支睾吸虫、大片形吸虫、卫氏并殖吸虫、广州管圆线虫、多房棘球绦虫、湄公血吸虫感染的开放拟钉螺以及日本血吸虫感染湖北钉螺和阴性湖北钉螺基因组DNA评价其特异性。构建40、20、10条日本血吸虫尾蚴感染小鼠模型，采集感染后第3~6周小鼠粪样以及感染后第3天及第1~6周小鼠血浆样本，以qPCR法为平行对照，评价所建方法检测日本血吸虫感染鼠粪样与血浆DNA的效果。结果 选择crRNA-2建立LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法，筛选ssDNA、crRNA和Cas12a的最适终浓度分别为400、200、200 nmol/L，LAMP预扩增时间为30 min。该方法对日本血吸虫成虫基因组的最低检出限为10 fg/μl，对重组质粒的最低检出限为1拷贝/μl。该方法与曼氏血吸虫、华支睾吸虫、大片形吸虫、卫氏并殖吸虫、广州管圆线虫、多房棘球绦虫等常见寄生虫以及湄公血吸虫感染的开放拟钉螺和阴性湖北钉螺等中间宿主基因组DNA均无交叉反应。LAMP-CRISPR/Cas12a、qPCR法对感染小鼠混合粪样检测阳性率分别为85.42%（41/48）和51.02%（175/343）（χ² = 8.71，P < 0.05），且LAMP-CRISPR/Cas12a法最早可检出小鼠感染后第3周的粪样，早于qPCR法（可检出感染第4周粪样）。LAMP-CRISPR/Cas12a、qPCR法对感染小鼠血浆样本检测阳性率分别为58.3%（28/48）和27.11%（93/343）（χ² = 9.77，P < 0.05）；LAMP-CRISPR/Cas12a和qPCR方法均最早可检出小鼠感染后第3天血浆中的血吸虫循环DNA，阳性率分别为53.06%（26/49）、22.45%（11/49）（χ² = 9.77，P < 0.05）。结论 本研究建立了一种LAMP-CRISPR/Cas12a日本血吸虫核酸快速检测方法，操作简便快捷、高度敏感与特异，且具有较好的早期检测价值，有望为血吸虫病的现场检测提供新的工具。

目的 探讨Tsc22结构域家族成员3（Tsc22 domain family member 3，Tsc22d3）在日本血吸虫感染小鼠肝脏自然杀伤（natural killer，NK）细胞亚群中的表达及其对NK细胞杀伤功能的影响。方法 将42只C57BL/6 雌性小鼠经腹部贴片法感染日本血吸虫尾蚴（20 ± 1 条/只），分别在感染前、感染后第4、6周取6只小鼠剖杀，磁珠分选富集肝脏NK细胞，并进行单细胞测序，分析Tsc22d3在NK细胞的表达及活化的信号通路。其余24只小鼠随机均分为感染组和对照组，每组12只，感染后第4、6周各取6只小鼠进行麻醉，分离小鼠肝非实质细胞，流式细胞术检测Tsc22d3在对照组和感染组小鼠肝脏NK细胞中的表达变化。采用脂质体转染法将空载质粒、Tsc22d3表达质粒转染NK92细胞，获得空载质粒对照组（NC组）和Tsc22d3过表达NK92细胞组（Tsc22d3⁺NK92细胞组）；用可溶性虫卵抗原（SEA）刺激Tsc22d3⁺NK92组和NC组24 、48 h，流式细胞术和实时荧光定量PCR（qPCR）检测NK细胞中γ干扰素（IFN-γ）和穿孔素（Prf1）表达的变化。使用GraphPad Prism9软件进行统计学分析，两组比较采用t检验。结果 单细胞测序结果提示，与感染前小鼠（2.41）相比，感染后第4周（3.16）、第6周（3.76）Tsc22d3的表达持续增加，Tsc22d3高表达于NK的C3亚群，KEGG结果显示C3亚群中NK细胞介导的细胞毒性通路显著活化；流式细胞术结果显示，感染组第4、第6周小鼠肝脏NK细胞中Tsc22d3⁺NK的占比分别为（0.24 ± 0.01）%、（1.40 ± 0.14）%，高于对照组的（0.12 ± 0.02）%（t = 12.110、22.010，均P < 0.01）。SEA刺激24 h后Tsc22d3⁺NK92组中IFN-γ、Prf1的阳性细胞的占比分别为（1.66 ± 0.15）%、（53.23 ± 0.81）%，高于NC组的（0.88 ± 0.13）%、（29.93 ± 1.85）%（t = 6.800、20.010，均P < 0.01）。SEA刺激24 h后，Tsc22d3⁺NK92组中IFN-γ、Prf1的mRNA相对转录水平分别为1.53 ± 0.24、1.41 ± 0.04，均高于NC组的1.00 ± 0.07、1.00 ± 0.14（t = 3.573、4.973，均P < 0.05、0.01）；SEA刺激48 h后Tsc22d3⁺NK92组中IFN-γ、Prf1的mRNA相对转录水平分别为2.06 ± 0.39、1.54 ± 0.26，均高于NC组的1.06 ± 0.44、1.00 ± 0.04（t = 2.953、3.588，均P < 0.05）。结论 日本血吸虫感染进程中Tsc22d3高表达于肝脏NK的C3亚群，Tsc22d3高表达可增强NK细胞的杀伤功能。

目的 了解2004—2023年杭州市流动人群血吸虫病监测情况，对病例流行特征进行分析。方法 2004—2023年杭州市流动人群血吸虫病监测资料来源于杭州市疾病预防控制中心监测年报表、史料汇编和年度血吸虫病防治工作总结；疫情资料来源于中国疾病预防控制中心传染病报告信息管理系统直报数据、确诊病例流行病学个案调查表及调查报告等，采用主动结合被动的方式对来自血吸虫病流行区的流动人群进行监测。收集监测人数、血清学阳性人数、粪检人数、粪检阳性人数、尿检人数、尿检阳性人数及确诊病例性别、年龄、职业、原籍地、临床症状体征、疫水接触史、感染地及就诊情况等数据。运用SPSS26.0、R4.1.0软件进行统计学分析，采用描述性流行病学方法对病例三间分布、感染地、临床诊疗等情况进行分析。结果 2004—2023年杭州市流动人群血吸虫病年平均血清学阳性率为0.51%（1 188/234 415)，2004年最高，为1.37%（115/8 366）；2023年最低，为0.01%（1/8 160），呈逐年下降趋势（Z = -4.190，P < 0.05）；共确诊血吸虫病病例40例，均为输入性病例（境内34例，境外6例），其中急性日本血吸虫病8例、慢性日本血吸虫病26例，埃及血吸虫病3例、间插血吸虫病2例、曼氏血吸虫病1例。病例主要为男性（占85.0%，34/40），职业以学生、务工人员及农民为主（占65.0%，26/40）。2019—2023年病例均为境外输入，集中在临安区（3例）和西湖区（2例）。34例境内输入病例感染地主要为江西（占41.2%，14/34）、安徽（占29.4%，10/34）、湖北（占20.6%，7/34）；6例境外输入病例中，5例为非洲籍在杭留学生、1例为安徽籍援非务工人员，感染地分别为赤道几内亚（2例）、几内亚（1例）、赞比亚（1例）、尼日利亚（1例）及津巴布韦（1例）等非洲血吸虫病流行区。急性日本血吸虫病病例报告时间集中在7~9月，占7/8，症状以发热（8/8）、嗜酸粒细胞增多（7/8）为主。35.5%（11/31）的病例出现误诊或漏诊情况，省、市、县级医疗机构分别占4/11、2/11、5/11。结论 杭州市流动人群血吸虫血清学阳性率目前呈低水平，病例出现由境内输入转向境外输入为主，报告地由外来务工人员集中地向非洲籍留学生集中的高校转变，各级医疗机构仍存在误诊或漏诊情况。

目的 评价肝脏匀浆涂片镜检（病原学检测）、实时荧光定量PCR（qPCR）和环介导等温扩增（LAMP）（核酸检测）等3种方法检测野鼠日本血吸虫感染情况的效果，为野鼠血吸虫感染的监测提供较优的实验室检测方法。方法 从安徽省东至县收集115份野鼠肝脏样品（村A 63份，村B 52份），分别进行肝脏匀浆涂片镜检、qPCR和LAMP方法检测，统计并比较样品的阳性率；以镜检检测结果为标准，对qPCR和LAMP检测结果进行一致性分析，并对病原学检测与核酸检测结果一致性较低的样品随机抽取70%进行DNA测序验证。结果 肝脏匀浆涂片镜检共计发现54份阳性样品，阳性率为46.96%（54/115），其中村A和村B的阳性率分别为46.03%（29/63）和48.08%（25/52）（χ² = 0.001, P > 0.05）。qPCR检测样品的阳性率为69.57%（80/115），高于镜检阳性率（χ² = 11.175，P < 0.01）。村A的阳性率（66.67%，42/63）与村B的阳性率（73.08%，38/52）之间的差异无统计学意义（χ² = 0.340，P > 0.05）。LAMP检测样品的阳性率为56.52%（65/115），与镜检结果差异无统计学意义（χ² = 1.741，P > 0.05）。此外，LAMP检测村A的样品阳性率（71.43%，45/63）高于村B（38.46%，20/52）（χ² = 11.293，P < 0.01）。一致性分析结果显示，qPCR检测结果和镜检结果一致性较好（Kappa值 = 0.524 4），LAMP检测结果和镜检结果一致性较低（Kappa值 = 0.154 5）。从村A的24份镜检阴性但LAMP阳性的样品中随机抽取17份样品进行测序，其中15份与日本血吸虫28S核糖体DNA（GenBank登录号为JF721395.1）序列一致性≥ 98%，鉴定为阳性。结论 3种检测方法检测野鼠日本血吸虫感染敏感性存在差异，qPCR检测的阳性率最高，与镜检一致性较好；LAMP法操作便捷，但与镜检一致性较低。

目的 了解间日疟原虫VIR14蛋白与细胞间黏附分子-1（ICAM-1）受体的结合情况并分析其关键位点。方法 将重组质粒pET28a-VIR14转化至大肠埃希菌BL21（DE3），经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质免疫印迹（Western blotting）分析间日疟原虫重组VIR14蛋白的表达情况与纯度。通过表面等离子共振（SPR）技术验证VIR14蛋白或多肽与ICAM-1受体的结合情况。预测VIR14以及ICAM-1（28~480 aa）蛋白的结构，综合预测复合物建模分数（pTM）及局部距离差异测试分数（pLDDT），通过cluspro 2.0对接分析得分最高的VIR14和ICAM-1模型之间的相互作用。使用PDBePISA系统和pymol 3.0软件处理对接结果，分析对接位点。通过全球不同流行区数据分析结合位点氨基酸多态性。结合表位竞争抑制实验分析受体与配体相互作用的关键位点。结果 SDS-PAGE结果显示，成功表达并纯化相对分子质量（M_r）约为58 000的VIR14蛋白。SPR实验表明，不同浓度的VIR14蛋白与ICAM-1受体结合响应值呈浓度依赖上升，亲和力值为15.16 μmol/L。Alphafold2结构预测结果显示，VIR14蛋白最佳模型pLDDT和pTM评分分别为78.2和0.73；ICAM-1受体最佳模型pLDDT和pTM值分别为93.8和0.65。VIR14与ICAM-1蛋白之间形成极性键的区域集中在蛋白尾端（212~406 aa）。在含有预测结合位点的2条多肽中，仅P2多肽与ICAM-1结合，亲和力为48.99 μmol/L。竞争抑制实验表明，P2多肽能抑制VIR14蛋白与ICAM-1结合。将P2中的4个关键位点（ASP-310、ARG-314、LYS-316、ASP-318）突变为丙氨酸以改变它们的侧链后，P2丧失了抑制能力。P2多肽在全球338个地理株中高度保守。结论 间日疟原虫VIR14蛋白能与ICAM-1受体紧密结合，4个关键氨基酸位点发挥了重要作用，且在全球种群中具有高度保守性。

目的 探究华支睾吸虫外泌体中关键miRNA分子在肝纤维化中的作用，以期为华支睾吸虫致肝纤维化的机制提供新的线索。方法 从阳性家猫肝脏剖取华支睾吸虫成虫，体外培养，从排泄/分泌产物中提取外泌体，透射电子显微镜观察并对粒径分布进行鉴定。提取外泌体总RNA并测序，miRDeep2软件预测miRNA，与miRBase数据库中序列进行比对，测算比较每个miRNA的表达量并筛选。使用miRanda、miRDB、PITA软件分别对选定miRNA进行靶基因预测分析，topGO、clusterProfiler软件分别对靶基因的基因本体和信号通路进行富集分析。分别用浓度为5、10、20 μg/ml外泌体与肝星状细胞（HSC）共培养24、48 h，设置空白对照组；终浓度为50 nmol/L的选定miRNA（Csi-miR-125a）转染HSC 48 h，设置阴性对照组，均采用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测各组HSC增殖情况。使用小鼠抗人β-actin、兔抗人α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、兔抗人Ⅲ型胶原、兔抗人微管相关蛋白1A/1B-轻链3（LC3）、兔抗人p62、兔抗人细胞外信号调节激酶（ERK）、兔抗人p-ERK抗体（1∶1 000）作为一抗，辣根过氧化物酶（HRP）标记的山羊抗小鼠或抗兔IgG（1∶10 000）作为二抗，蛋白质免疫印迹（Western blotting）检测HSC的活化相关蛋白α-SMA、Ⅲ型胶原，自噬相关蛋白LC3、p62的表达水平及信号通路相关ERK蛋白磷酸化水平。结果 华支睾吸虫外泌体呈小泡状，具有磷脂双分子层结构，粒径分布主峰值为72 nm，分布范围主要为30~150 nm。外泌体中含有多种miRNA，选择表达量次高且与已知miRNA序列相似度高的Csi-miR-125a进行后续研究。Csi-miR-125a存在301个靶基因预测位点重合，主要富集在细胞质、胞浆等细胞组件，参与蛋白结合、离子结合等分子功能，涉及生物调节、系统发育、神经系统发育等生物过程；靶基因信号通路大多富集于Hedgehog信号通路、细胞外基质-受体互作的相关通路、NOD样受体信号通路等。CCK-8法检测结果表明，外泌体浓度为10 μg/ml、孵育24 h时A₄₅₀达最高，为1.707；Csi-miR-125a共孵育组A₄₅₀为1.122，高于阴性对照组（0.492）。Western blotting检测结果显示，阴性对照组及Csi-miR-125a组的α-SMA条带灰度值分别为0.588和0.904（t = 10.560，P < 0.01）；Ⅲ型胶原条带灰度值分别为0.783和0.997（t = 6.483，P < 0.05）。阴性对照组和Csi-miR-125a组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ条带灰度比值分别为1.093和2.215（t = 5.206，P < 0.05），p62条带灰度值分别为0.537和1.369（t = 13.100，P < 0.01），p-ERK/ERK条带灰度比值分别为0.791和1.037（t = 5.067，P < 0.05）。结论 华支睾吸虫外泌体中miRNA种类丰富多样，且涉及多种细胞功能和多条信号通路。Csi-miR-125a可能通过阻断HSC自噬流和激活ERK信号通路促进HSC增殖活化从而在肝纤维化的发生中发挥一定的作用。

目的 分析陕西省2016—2023年土源性线虫感染现状及变化趋势，为制定土源性线虫病防控策略提供科学依据。方法 根据《全国肝吸虫病和土源性线虫病监测方案（试行）》要求，每年抽取陕西省部分县（区）作为监测点，各监测点按地理方位划分为东、西、南、北、中5个片区，每片区抽取1个行政村开展监测，每个行政村至少调查200人，每个监测县至少调查1 000人。收集调查对象粪样，采用改良加藤厚涂片法检查土源性线虫虫卵（一粪二检）。感染率的比较采用χ²检验。结果 2016—2023年，陕西省累计设立76个监测点，共监测90 790人，土源性线虫总感染率为0.13%（115/90 790），仅查出蛔虫感染者。陕西省各年度土源性线虫感染率分别为0.70%（63/9 040）、0.20%（18/9 073）、0.17%（15/9 013）、0.07%（6/9 076）、0（0/9 334）、0（0/9 061）、0.06%（10/17 122）和0.02%（3/19 071）（χ² = 161.424，P < 0.01）。不同地市中，铜川市感染率最高（0.27%，11/4 042）（χ² = 110.412，P < 0.01）；不同生态区中，汾渭盆地生态区的感染率最高（0.17%，67/39 105）（χ² = 18.581，P < 0.01）。20~29岁年龄组人群的感染率最高（0.21%，13/6 071），职业分布以幼托儿童最高（0.21%，16/7 758），文化程度以学龄前儿童最高（0.21%，16/7 770），不同年龄组、职业和文化程度人群的感染率差异具有统计学意义（χ² = 13.245、11.243、16.737，均P < 0.05）。结论 2016—2023年陕西省土源性线虫感染处于低流行水平，主要感染虫种为蛔虫，不同地区和不同人群感染率差异较大。

目的 探讨孕期刚地弓形虫感染对滋养层细胞及蜕膜免疫细胞表面CD73表达的影响，并分析其与不良妊娠结局的关系。方法 收集健康早孕期正常流产的蜕膜和绒毛组织4个，采用聚蔗糖-泛影葡胺淋巴细胞分离液分离蜕膜单个核细胞，percoll法分离滋养层细胞，将纯化的蜕膜单个核细胞和滋养层细胞分别分为对照组和感染组，每组1 × 10⁷个，感染组按细胞与弓形虫3∶1感染，感染后24 h，采用流式细胞术检测滋养层细胞、蜕膜自然杀伤细胞（decidual natural killer，dNK)、蜕膜巨噬细胞（decidual macrophage，dMφ）和蜕膜树突状细胞（decidual dendritic cell，dDC）表面CD73表达。将分离的滋养层细胞分为对照组和感染组，每组1 × 10⁷个，感染组按细胞与弓形虫1∶1感染，感染后24 h提取蛋白，蛋白质免疫印记（Western blotting）分析弓形虫感染后滋养层细胞CD73蛋白的相对表达水平。野生型C57BL/6J雌鼠60只与雄鼠30只，CD73基因敲除（CD73^-/-）雌鼠60只与雄鼠30只均分别按雌雄比为2∶1随机合笼过夜。孕鼠随机均分为野生型对照组和野生型感染组，CD73^-/-对照组和CD73^-/-感染组，孕8 d，感染组孕鼠分别经腹腔注射400个弓形虫速殖子，对照组注射等量生理盐水。孕14 d，解剖子宫并观察胎盘、胎鼠情况，计算异常胎率。免疫组化染色检测胎盘组织中CD73的表达。采用GraphPad Prism 9.0软件进行统计学分析，组间数据分析采用独立样本Student’s t检验。结果 流式细胞术结果显示，对照组滋养层细胞表面CD73阳性细胞比例为（39.25 ± 1.43）%，高于感染组的（31.27 ± 2.79）%（t = 5.31，P < 0.05），对照组dDC、dMφ和dNK细胞表面CD73阳性细胞比例分别为（38.17 ± 7.71）%、（25.80 ± 6.85）%、（9.39 ± 0.75）%，高于感染组的（36.33 ± 7.64）%、（20.58 ± 5.18）%、（7.74 ± 1.08）%（t = 4.25、5.24、3.57，均P < 0.05）；Western blotting结果显示，对照组滋养层细胞CD73蛋白相对表达水平为0.79 ± 0.07，较感染组的0.38 ± 0.05显著下调（t = 24.80，P < 0.01）；免疫组化结果显示，野生型对照组胎盘组织阳性细胞呈棕色集中表达在胎盘侧，尤其近血管处，野生型感染组阳性细胞较对照组少。野生型感染组小鼠胎盘组织CD73表达灰度值为9.79 ± 0.30，较野生型对照组的20.20 ± 4.60显著降低（t = 3.89，P < 0.05）。野生型对照组和CD73^-/-对照组胎盘胎鼠发育良好，有光泽，子宫圆润饱满，野生型感染组和CD73^-/-感染组孕鼠明显缺血，伴有严重淤血，胎鼠与胎盘不成形，出现吸收胎鼠现象，胎盘发育不良。野生型感染组小鼠胎盘和胎鼠体质量分别为（0.05 ± 0.01）g和（0.07 ± 0.03）g，低于野生型对照组的（0.07 ± 0.01）g和（0.13 ± 0.08）g（t = 3.22、5.36，均P < 0.01）；CD73^-/-对照组分别为（0.07 ± 0.04）g 和（0.12 ± 0.01）g，与野生型对照组差异无统计学意义（t = 0.62、0.13，均P > 0.05）；CD73^-/-感染组分别为（0.03 ± 0.00）g 和（0.01 ± 0.00）g，较野生型感染组显著减轻（t = 3.10、5.08，均P < 0.01）。野生型对照组和CD73^-/-对照组异常胎率均为0，野生型感染组为（55.73 ± 0.18）%，较野生型对照组显著增加（t = 7.79，P < 0.01），CD73^-/-感染组为（76.00 ± 0.20）%，较野生型感染组显著增加（t = 2.44，P < 0.05）。结论 孕早期刚地弓形虫感染可显著下调母胎微环境中滋养层细胞及蜕膜免疫细胞（dNK、dMφ和dDC）表面CD73的表达，且CD73表达下调与弓形虫感染致不良妊娠的发生密切相关。

目的 基于成簇规律间隔短回文重复序列核酸酶技术（CRISPR/Cas9）构建刚地弓形虫ME49株缓殖子形成缺陷基因2（bfd2）缺陷虫株并进行表型分析，探讨弓形虫BFD2对虫体分化和增殖作用。方法 运用E-CRISPR数据库设计bfd2向导RNA（SgRNA），并使用Q5定点基因敲除试剂盒突变pSAG1::CAS9-U6::SgUPRT质粒上的SgRNA，构建pSAG1::CAS9-U6::SgBFD2质粒。将乙胺嘧啶抗性基因、bfd2基因上下游序列连接成供体DNA（donorDNA）并克隆于pUC19质粒上，PCR扩增donorDNA。以ME49虫株为背景，pSAG1::CAS9-U6::SgBFD2质粒和donorDNA片段电穿孔共转染ME49弓形虫速殖子，电转后悬液接种至人包皮成纤维细胞（HFF），3 μmol/L乙胺嘧啶单克隆筛选电转虫株。将筛选出的单克隆虫株接种HFF细胞，培养传代后，PCR鉴定虫株∆bfd2敲除情况。通过体外增殖试验观察虫株在HFF内的增殖情况，噬斑试验观察虫株在HFF细胞上形成噬斑的能力，苏木精-伊红（HE）染色观察虫株感染小鼠的肝脏病理情况。采用GraphPad Prism 9进行统计学分析，实验数据使用双尾非成对Student t检验和ANOVA检验。结果 成功构建pSAG1::CAS9-U6::SgBFD2质粒和donorDNA质粒，编码乙胺嘧啶抗性基因（DHFR）序列成功插入靶位点，经PCR鉴定、筛选出∆bfd2基因敲除单克隆虫株（ME49 ∆bfd2株）。增殖试验结果显示，ME49株感染的HFF内，每个纳虫泡中 > 16、= 16和 ≤ 8个速殖子的纳虫泡数量占比分别为（55.33 ± 5.03）%、（27.00 ± 3.00）%和（17.67 ± 4.04）%，ME49 ∆bfd2株感染的分别为（25.33 ± 4.16）%、（42.67 ± 3.06）%和（32.00 ± 6.93）%，ME49株感染的HFF中 > 16个速殖子的纳虫泡数量高于ME49 ∆bfd2虫株（t = 6.337，P < 0.01）。噬斑试验结果显示，接种100、1 000、10 000个ME49株速殖子感染的HFF分别形成（13.50 ± 3.11）、（119.75 ± 4.86）和（264.25 ± 28.61）个噬斑，均高于ME49 ∆bfd2株感染的（1.25 ± 0.96）、（6.75 ± 0.96）和（22.00 ± 5.72）个（t = 7.415、57.72、18.04，均P < 0.01）。HE结果显示，ME49 ∆bfd2株感染小鼠肝脏炎症较ME49株感染小鼠减轻。结论 基于CRISPR/Cas9技术成功构建BFD2缺陷虫株，且BFD2的缺失可抑制弓形虫的分化、增殖，并减轻小鼠肝脏炎症。

目的 原核表达细粒棘球绦虫钙网蛋白，并对其功能进行初步探索。方法 以细粒棘球绦虫原头节cDNA为模板，PCR扩增目的基因，连接至pET-28a（+）载体，构建重组质粒pET28a-CRT，将测序正确的重组质粒转化至表达菌BL21诱导表达，经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺（SDS-PAGE）电泳以及蛋白质免疫印迹（Western blotting）分析鉴定rEgCRT；应用在线生物信息学分析软件分析EgCRT表达蛋白理化性质及部分生物学功能；rEgCRT免疫小鼠制备多克隆抗体，并用间接ELISA和Western blotting检测其抗体效价及反应原性；应用间接免疫荧光分析CRT在原头节和成虫体内的分布以及rEgCRT与犬小肠上皮细胞的结合；应用RT-qPCR方法分析crt基因在虫体不同发育阶段转录水平及rEgCRT（实验组，PBS为对照组）对犬小肠上皮细胞凋亡、焦亡的影响。结果 CRT蛋白分子式为C₂₀₃₃H₃₀₅₁N₅₁₁O₆₅₀S₉，预测EgCRT蛋白α-螺旋占24.05%、无规则卷曲占60.00%，延伸链结构占15.95%。EgCRT与多房棘球绦虫和猪带绦虫的CRT在系统进化树上聚在一大分支。成功诱导表达纯化获得纯度较高且相对分子量约为50 000的rEgCRT；免疫学特性鉴定表明rEgCRT具有较好的抗原特异性；间接免疫荧光试验发现EgCRT可分别定位于原头节表皮层和成虫表皮层及部分实质组织。RT-qPCR分析结果显示，成虫阶段EgCRT的表达水平（24.83 ± 0）高于原头节阶段（27.05 ± 0.008）（t = 45.76，P < 0.01）。间接免疫荧光分析结果显示，rEgCRT共孵育的犬小肠上皮细胞有绿色荧光聚集。RT-qPCR结果显示，培养24 h后实验组和对照组Bax相对转录水平分别为31.63 ± 0.001、24.17 ± 0.027（t = 7.94，P < 0.01），表达上调；Bcl-2相对转录水平分别为34.55 ± 0.070、19.65 ± 0.042（t = 15.70，P < 0.01），表达下调；IL-18相对转录水平分别为25.62 ± 0.067、20.93 ± 0.014（t = 5.05，P < 0.01），表达下调；IL-1β相对转录水平分别为28.18 ± 0.001、28.71 ± 0.020（t = 0.26，P > 0.05），表达下调。结论 rEgCRT具有良好的抗原性，EgCRT在细粒棘球绦虫不同虫期均有表达，且其可能在细粒棘球绦虫固着、定植或生长发育中具有重要的作用；此外，rEgCRT与犬SIECs发生黏附并调节细胞的凋亡、焦亡，可能参与感染过程或宿主免疫应答，具有作为潜在疫苗候选分子、药物靶标的应用前景。

目的 分析2023年新疆棘球蚴病流行病学特征及空间分布特征，为制定防治策略提供参考依据。方法 通过传染病网络直报系统收集2023年新疆新发现棘球蚴病报告病例数据。采用Microsoft Excel 2016软件进行数据统计分析和图表制作；采用ArcGIS 10.8软件，基于新发现棘球蚴病报告病例数绘制三维趋势图，分析报告病例数在空间上的分布和变化趋势；基于个案数据间的空间关系，绘制冷热点地图，分析不同地理位置的病例间聚集模式；基于冷热点分析结果，采用反距离插值法获取2023年新疆棘球蚴病冷热点预测图，分析新疆未来可能的高风险地区。结果 2023年新疆共报告新发现棘球蚴病病例958例，14个地州（市）均有病例报告，其中伊犁州报告病例数最多，为309例（占总报告病例数的32.25%）。男性病例506例（占52.82%），女性452例（占47.18%）；病例年龄最小2岁，最大99岁，平均45.0（20.0，56.0）岁，其中6~11岁（占10.54%，101/958）、12~17岁（占10.86%，104/958）和48~53岁（占14.41%，138/958）年龄段报告病例数占比较高；职业分布以农牧民占比最高，为46.66%（447/958）。空间描述性分析显示，新疆96个县（市）平均报告病例例数为6.0（2.0，13.5）例，新发现报告病例数呈现从西到东先增后降、从南向北逐渐增高的趋势。空间自相关分析结果表明，2023年新疆棘球蚴病存在空间自相关性（Moran’s I = 0.028，Z = 2.584，P < 0.05），即存在空间聚集现象。冷热点分析可见，北疆报告病例数较多，较多区（县）呈现出高值聚集，是发病热点区域；南疆报告病例数较少，呈现出较多低值聚集，是发病冷点区域。结论 新疆棘球蚴病呈空间聚类分布，总体呈现北疆高于南疆，北疆的西南部地区是棘球蚴病发病热点区域，以此为中心向东南方向辐射，需在该类地区开展重点防控。

目的 鉴定黑龙江扎龙自然保护区丹顶鹤体内分离的吸虫，并以核糖体内转录间隔区（ITS）和28S序列为标记基因分析该吸虫的亲缘关系。方法 自黑龙江扎龙自然保护区自然死亡的丹顶鹤肠道内分离吸虫，使用盐酸卡红进行染色，观察虫体形态学特征。提取虫体DNA，PCR扩增ITS和28S序列，测序后进行序列分析、相似性分析和重复序列分析，以最大简约法构建系统进化树。结果 分离的吸虫具有虫体肥大、头领发达、头领呈二侧叶状等特征。该吸虫ITS序列长1 007 bp，其中ITS1、5.8S、ITS2的长度分别为389、161、457 bp；ITS序列G + C含量为52.14%。28S序列长983 bp，G + C含量为56.79%。ITS2序列有2个11 bp正向重复序列，28S无重复序列。本研究分离的吸虫ITS和28S序列与二叶冠缝吸虫（GenBank：ON141931，KT956945）的序列相似性为分别为94.39%和98.27%，与冠缝属吸虫处于同一小分支，鉴定为二叶冠缝吸虫。结论 黑龙江扎龙自然保护区丹顶鹤体内分离的吸虫为二叶冠缝吸虫。

截至目前，有关非洲的弓形虫感染和弓形虫病的研究报道较有限。本文在PubMed中使用关键词“弓形虫”“弓形虫病”和“非洲”系统检索2015—2024年报道的非洲一般人群的弓形虫感染状况、非洲孕妇的弓形虫感染状况、非洲儿童的弓形虫感染状况和先天性弓形虫病、非洲HIV阳性者/艾滋病患者和肿瘤患者的弓形虫感染状况、非洲的弓形虫虫株基因型和地理分布，以及非洲弓形虫感染的危险因素和感染方式的文献报道，以期为相关研究提供参考。

海南岛位于中国热带地区，气候和自然环境条件适宜多种土源性线虫病传播。本文回顾和总结了海南岛近70年土源性线虫的感染率变化、土源性线虫病的防控措施及效果。海南岛人群土源性线虫感染率自1991年的94.7%下降至2023年的4.1%。3次全国人体寄生虫病调查和省级监测结果显示，海南岛土源性线虫感染在空间分布上呈中部山区高于其他区域；人群分布中，女性感染率高于男性，5~9岁儿童、10~14岁青少年和60~69岁、70岁及以上老年人群感染率高于其他年龄组人群，农民、学生和学龄前儿童感染率高于其他职业人群。海南岛土源性线虫病防治历程先后经历了小规模群查群治试点防治、大规模群防群治和重点人群防治等3个阶段，主要防治措施包括大规模寄生虫感染情况调查、群体服药驱虫、改水改厕、群众健康教育和示范区试点等。当前海南岛土源性线虫感染率已处于较低水平，但传播控制和传播阻断工作仍需要持续开展，今后将采取包括扩大监测范围等多项措施实现精准防治。

随着以青蒿素为基础的联合疗法在恶性疟治疗中的广泛应用，恶性疟原虫对青蒿素及其衍生物逐渐产生了部分耐药性，成为当前全球疟疾防控最严峻的挑战之一。近年来，恶性疟原虫青蒿素耐药分子机制研究和分子标记鉴定取得较大进展。目前已发现的恶性疟原虫青蒿素耐药相关基因有Kelch13（pfk13）、泛素特异性蛋白酶1（pfubp1）、衔接蛋白复合体2-μ亚基（pfap2μ）和冠状蛋白（pfcoronin）等。分子监测结果显示，恶性疟原虫青蒿素耐药相关突变在东南亚地区已普遍存在，非洲、南美洲和大洋洲也已陆续出现了独立起源的耐药突变虫株。高通量测序技术和分子检测技术的发展为恶性疟原虫青蒿素耐药分子监测提供了强大助力。本文就恶性疟原虫青蒿素耐药分子监测的研究进展作一综述，以期为恶性疟原虫青蒿素耐药监测和控制提供参考。

华支睾吸虫作为一种食源性寄生虫，其成虫寄生于宿主肝胆管内，可导致宿主肝胆管病变，甚至诱发胆管癌。华支睾吸虫于2009年被世界卫生组织国际癌症研究署列为Ⅰ类致癌物。微小RNA（miRNA）作为一类内源性的非编码RNA，在细胞内具有多种重要的调节作用。华支睾吸虫分泌的miRNA在肝胆管癌发生发展中扮演着重要的角色。本文综述了华支睾吸虫miRNA在肝胆管癌中的作用，以期为华支睾吸虫感染诱发的胆管癌防治提供新的策略。

蓝氏贾第鞭毛虫是一种呈世界性分布的人兽共患寄生虫，感染可引起以腹泻和腹痛为主要临床症状的贾第虫病。该病对儿童和免疫功能低下人群的健康构成严重威胁。基于贾第虫病在治疗选择的局限性以及没有临床可用疫苗的事实，该病在全球范围内已引起越来越多的关注。本文概述了自1924年我国首次报告贾第虫病以来人体贾第虫感染情况，以及水源和食源污染情况，以期为我国人体贾第虫病防控策略的制定提供参考。

从传染病网络直报系统、医院等收集香格里拉市有既往病例，以本地感染病例为线索，选择患病率高的建塘、小中甸和格咱镇为调查点。根据2019—2021年香格里拉市三个乡镇传染源犬监测数据，行政村的犬粪抗阳性率分为高、中、低3层，每层随机抽取1~3个自然村作为研究点。2022年6月采用整群随机抽样法，每户采集1条犬粪样，随机采集路边无主犬/流浪犬粪样，每个乡（镇）调查犬200只以上，采用ELISA法犬粪抗原检测，家犬进行感染因素分析。共调查犬1 587只，阳性64只，阳性率为4.03%（64/1 587），其中家犬和无主犬或流浪犬棘球绦虫抗原阳性率分别为3.16%（35/1 107）和6.04%（29/480）（χ² = 6.265，P < 0.05）。建塘、小中甸和格咱镇阳性率分别为4.60%（41/891）、3.18%（14/440）和3.52%（9/256），各乡镇棘球绦虫粪抗原阳性率差异有统计学意义（χ² = 12.030，P < 0.05）。家犬感染以及其因素分析中，家犬公母阳性率分别是3.48%和2.68%，犬年龄组10周岁以上阳性率为4.11%，家犬性别和年龄组差异无统计学意义（χ² = 1.184、2.384，均P > 0.05）。狼狗阳性率为5.56%，放养犬阳性率为36.36%，近3个月内没有驱虫犬阳性率为3.79%，投喂过病变脏器犬阳性率为17.20%。家犬品种、犬饲养方式和近3个月内是否驱过虫的犬和是否投喂过病变脏器的犬阳性率差异有统计学意义（χ² = 15.431、49.121、5.291、65.391，均P < 0.05），Logistic回归分析显示4个因素均与犬棘球绦虫感染有显著关系。香格里拉市犬棘球绦虫感染率处于较高水平，应当着重强化对传染源犬的防控工作。

掌握大连市疟疾流行特征，为防止疟疾消除后再传播提供依据。从国家传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统收集大连市2014—2023年疟疾报告病例流行病学个案调查资料，采用描述性和分析性流行病学方法分析病例特征。2014—2023年大连市共报告疟疾病例125例，均为境外输入性病例，其中2例死亡。报告病例中恶性疟占85.6%（107/125），卵形疟占10.4%（13/125），三日疟占3.2%（4/125），间日疟占0.8%（1/125）。2014—2023年大连市年平均报告病例数12.5例，其中2017年报告病例数最多（25例）。各月均有病例报告，1月报告病例数最多（16.0%，20/125），无季节特征；各县（区）的常住居民均有病例报告，甘井子区最多（18.4%，23/125）。报告病例的感染来源分布于非洲的20个国家，输入数量最多的国家为尼日利亚（13.6%，17/125）。报告病例的男女性别比为10.36∶1，中位年龄为42岁；30~39岁年龄组的报告病例最多（28.0%，35/125），文化程度以初中学历最多（39.2%，49/125），职业分布为工人最多（31.2%，39/125）。报告病例自回国到发病时间间隔的中位数为7 d，自发病到确诊时间间隔的中位数为4 d。发病1 d内确诊的报告病例仅占4.8%（6/125），超过7 d确诊的占24.0%（30/125）。经市级医疗机构确诊的报告病例占88.0%（110/125）。大连市存在一定数量的境外输入性疟疾病例，以恶性疟为主。应加强输入性疟疾防控，提高临床医生诊断能力和居民对疟疾的认知，持续巩固消除疟疾成果。

为探讨重庆市荣昌区务农种植人员钩虫感染现状及其危险因素，于2024年以随机整群抽样方法抽取重庆市荣昌区东、西、南、北、中的5个自然村的务农种植人员为调查对象，通过问卷调查收集社会人口学特征、居住环境、农业劳作方式及卫生习惯等信息。采集调查对象粪便样品（> 30 g），改良加藤厚涂片法（一粪两检）检测钩虫感染情况。采集中度和重度感染者家庭土壤样品（每户户外田地或菜园土样和厕所周边阴凉处土样各1份）进行钩蚴分离，以美洲钩虫ITS2序列和十二指肠钩虫5.8S rRNA序列为分子靶标进行多重PCR扩增，邻接法（NJ）构建系统进化树。感染率的比较方法采用χ²和χ²_趋势检验，独立危险因素分析采用条件Logistic回归模型。 结果显示，563名调查对象钩虫感染率为14.9%（84/563）。钩虫感染者平均感染度为841.4，其中轻、中和重度感染者分别占57.1%（48/84）、34.5%（29/84）和8.3%（7/84）。调查对象人群近5年内均未进行过肠道寄生虫查治，且未报告有钩虫感染相关的症状或体征。各组中年龄≥ 60岁（17.7%，65/367）、文化程度为文盲（27.8%，10/36）、家庭年收入< 20 000元（20.1%，59/294）、每年种植劳作时间≥ 1个月（17.7%，73/412）、家厕类型为老式旱厕（2/10）、种植旱田农作物（15.7%，84/534）、使用人粪施肥（20.6%，75/364）、经常/偶尔赤足下地劳作（21.3%，68/320）、经常/偶尔落地食物不洗捡食（18.6%，54/291）、经常/偶尔喝生水（18.2%，53/291）、经常/偶尔便后不洗手（21.8%，58/266）等人群钩虫感染率较高（χ² = 8.022、8.920、15.780、9.476、9.793、4.194、26.213、23.402、6.275、5.145、18.827，均P < 0.05）。随着年龄增加、文化程度降低、家庭年收入减少和家厕卫生状况变差，钩虫感染率升高（χ²_趋势 = 7.105、8.836、8.836、7.121，均P < 0.05）。使用人粪施肥（OR = 4.041，95%CI：1.937~8.429）、赤足下地劳作（OR = 2.726，95%CI：1.506~4.935）是务农种植人员钩虫感染的独立危险因素。60份土壤样品分离钩蚴后PCR扩增，6份呈阳性，均鉴定为美洲钩虫。建议进一步加强感染监测与治疗，开展重点人群健康教育及卫生行为干预，推进农村地区厕所环境整治及粪便无害化处理，切断传播途径以有效降低钩虫病流行风险。

连云港市第一人民医院于2024年5月28日收治1例37岁男性“肺部感染”患者。该患者于16 d前体检发现左肺下叶稍高密度影。门诊给予头孢唑肟、左氧氟沙星（剂量不详）抗感染治疗9 d后，复查胸部CT示两肺感染较前进展。患者入院后行气管镜检查，肺泡灌洗液高通量测序（NGS）结果示口腔毛滴虫序列522条。患者有牙周病史，2个月内曾使用夹生肉的筷子进食。结合患者病史和辅助检查结果，诊断为口腔毛滴虫感染合并肺部感染。给予比阿培南（0.3 g/次，3次/d）和甲硝唑（0.5 g/次，3次/d）治疗9 d，复查肺部CT提示肺部感染好转，无其他特殊异常遂出院。出院后继续口服莫西沙星（0.4 g/次，1次/d）与甲硝唑（0.5 g/次，3次/d），2周后门诊复诊，患者无不适，影像学示左肺清晰、右肺钙化灶，其余无明显异常。

患者，男，31岁，湖北咸丰人，2022年7月曾至山西阳泉务工，2023年1月返回咸丰，2月出现发热症状，当地卫生院输液治疗；4 月28日再次发热，最高体温39.8 ℃，多家医院未明确诊断，5月6日转入武汉市金银潭医院感染科，腹部彩超示脾大。骨髓涂片镜检，查见利什曼原虫无鞭毛体。rk39免疫层析试纸条检测血清，呈利什曼原虫抗体阳性。提取血样DNA后PCR扩增利什曼原虫核糖体DNA内转录间隔区1（ITS-1）扩增出约310 bp的条带，测序结果显示扩增序列与杜氏利什曼原虫相应序列同源性为99%。确诊为内脏利什曼病，5月8日开始注射葡萄糖酸锑钠治疗两个疗程（600 mg/d，每疗程6 d，两个疗程间隔1周）。3个月后随访，恢复良好，血常规恢复正常，骨髓涂片未查见利什曼原虫。

患者，男，46岁，上海市居民。2024年4月因“皮肤瘙痒”就诊于上海中医药大学内设门诊部全科医疗科。患者自述全身瘙痒14 d。患者在2024年3月有医院陪护留宿史。使用龙胆紫在患者腕部横纹处皮损行皮肤隧道染色，可见皮肤“细线样”染色。皮肤镜检查显示典型“喷气三角翼”征，分离获得的虫体显微镜下口器和2对前足清稀可见，明确为皮肤疥疮。建议患者以20%硫磺软膏治疗（2次/d）。连续治疗一个月后，瘙痒症状消失，皮肤镜再未查见典型皮损。

患者，男，58岁，云南大理宾川县人，农民。2022年7月20日因“右上腹疼痛2天余”就诊于大理大学第一附属医院。血常规示嗜酸粒细胞（1.7 × 10⁹/L）、血沉（> 120 mm/h）升高；血生化示丙氨酸转氨酶（58 U/L）、天冬氨酸转氨酶（74 U/L）、γ-谷氨酰转移酶（66 U/L）、碱性磷酸酶（257 U/L）升高；血清ELISA示片形吸虫抗体IgM、IgG均强阳性；结核感染T细胞阳性。腹部CT平扫 + 增强考虑肝恶性肿瘤可能，不排除感染性疾病。肝脏组织病理结果示：隧道样坏死及异物肉芽肿形成，不排除肝片形吸虫感染及结核。左肝内侧叶标本抗酸染色阳性，结核分枝杆菌复合群DNA阳性。肝脏组织宏基因组二代测序检出结核分枝杆菌序列20条，肝片形吸虫序列15条。患者居住于云南省大理州宾川县（片形吸虫病流行地区），有喜食凉拌菜的生活习惯。结合患者流行病学史、症状体征及相关辅助检验结果，诊断为肝片形吸虫感染合并肝结核。予三氯苯达唑[15 mg/（kg•d），分3次服用，连用2 d]、利福平胶囊（按患者体质量48 kg计，0.45 g，每日1次）、异烟肼片（0.3 g，每日1次）、乙胺丁醇片（0.75 g，每日1次）、吡嗪酰胺片（1.5 g，每日1次）进行驱虫及抗结核治疗，治疗1周后患者腹痛好转出院。3个月后复查，肝酶恢复正常。6个月后复查，血常规示嗜酸粒细胞计数正常，腹部CT平扫示肝S4段术后改变，术区可见条状致密影，无明显进展。

患者，男，26岁，自由职业者，广东惠州人。2024年7月27日出现头痛，7月30日出现低热，分别按“感冒”“上呼吸道感染”治疗，效果不佳，8月5日因“头痛10天，发热7天”在惠州市中心人民医院住院治疗。发病前1月余有食用鱼生（草鱼）和生腌（淡水虾、蟹）史。查体有双眼向左凝视时可见水平方向眼球震颤。胸部CT示双肺有感染病灶，头颅平扫CT未见异常，颅脑MRI显示右侧额叶白质区少许缺血变性灶。外周血嗜酸粒细胞数升高（1.677 × 10⁹/L），嗜酸粒细胞百分数升高（16%），ELISA检测血清广州管圆线虫IgG抗体阴性。脑脊液常规示脑脊液压力240 mmH₂O（1 mmH₂O = 0.0098 kPa），脑脊液宏基因组二代测序检出广州管圆线虫特异序列7条，相对丰度8.1%，8月6日予甘露醇（连续18 d）降颅压，8月9日开始予阿苯达唑口服（0.4 g/次，3次/d，连续20 d），8月17日加用地塞米松磷酸钠静脉推注（10 mg/d，连续10 d），8月27日停用地塞米松，予醋酸泼尼松片口服，后续23 d按60、30、20、10、5 mg依次减量至停用。入院第9天头痛基本缓解，出院前复查外周血嗜酸粒细胞数恢复正常，肺部病灶较前吸收，脑脊液压力降低，脑脊液宏基因组二代测序示广州管圆线虫特异序列数逐渐升高。9月4日患者好转出院；10月8日电话随访，患者无不适。