恶性疟原虫融合蛋白PfCP-2.9自由巯基的测定

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2003, Vol. 21 ›› Issue (2): 11-101.

恶性疟原虫融合蛋白PfCP-2.9自由巯基的测定

钱锋,潘卫庆

第二军医大学病原生物学教研室,上海 200433

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2003-04-30 发布日期:2003-04-30

Determination of Free Thiols in the Chimeric Protein PfCP-2.9 of Plasmodium faldparum

QIAN Feng,PAN Wei-qing

Department of Etiological Biology,Second Military Medical University,Shanghai 200433

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2003-04-30 Published:2003-04-30

摘要/Abstract

摘要： 　　目的检测由毕氏酵母表达的恶性疟原虫融合蛋白(Plasmodiumfalciparumchimericprotein)PfCP-2.9的自由巯基。方法使用反向高压液相层析和Ellman氏反应进行检测。用反向高压液相,检测了3种样本,PfCP-2.9、PfCP-2.9经二硫苏糖醇还原、PfCP-2.9经吲哚乙酸烷基化。结果两种检测方法均表明PfCP-2.9不含任何自由流基。结论由毕氏酵母表达的PfCP-2.9中的半胱氨酸残基所含有的硫基均已氧化形成二硫键。

关键词: 恶性疟原虫, 融合蛋白, 反向高压液相, Ellman氏反应, 自由巯基

Abstract: 　Objective To determine the free thiols in the chimeric protein PfCP-2. 9 of Plasmodium falciparum expressed by Pichia pastoris. Methods Two experiments of reverse phase HPLC and Ellman' s reaction were applied to the PfCP-2.9 for the determination of its free thiols. For RP-HPLC analysis, three kinds of samples were tested: PfCP-2. 9, dithiothreitol-reduced PfCP-2.9 and indoacetic acid-alkylated PfCP-2.9. Results Both experiments showed that there were no any free thiols present in the PfCP-2. 9. Conclution The disulfide bonds between cysteine residues of PfCP-2. 9 were formed completely.

Key words: Plasmodium falciparum, chimeric protein, reverse phase HPLC, Ellman' reaction, free thiol

钱锋;潘卫庆. 恶性疟原虫融合蛋白PfCP-2.9自由巯基的测定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2003, 21(2): 11-101.

QIANFeng;PANWei-qing. Determination of Free Thiols in the Chimeric Protein PfCP-2.9 of Plasmodium faldparum[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2003, 21(2): 11-101.

[1]	周瑞敏, 纪鹏慧, 李素华, 杨成运, 刘颖, 钱丹, 邓艳, 鲁德领, 赵玉玲, 赵东阳, 张红卫. 河南省自赤道几内亚输入的恶性疟原虫抗药性基因多态性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(5): 593-600.
[2]	徐少杰, 陈绅波, 陈军虎. 恶性疟原虫重复散布家族基因转录调控的研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(3): 374-379.
[3]	田斌, 廖瑜, 文岚, 肖芳, 张兵, 申晓君. 长沙市122例输入性恶性疟原虫多药抗性基因1拷贝数变异分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(1): 127-131.
[4]	石明丽, 肖波, 江陆斌. 恶性疟原虫var基因的表达调控机制研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(6): 719-724.
[5]	史善美, 陈军虎. 恶性疟原虫RIFIN蛋白的结构和功能研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(2): 249-255.
[6]	张苍林, 聂仁华, 徐丹, 吕高伟, 王剑, 杨亚明, 邓艳, 刘言, 周红宁. 中缅边境地区恶性疟原虫Pfcrt、Pfmdr和PfK13基因多态性与体外药物敏感性相关性的分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(5): 580-588.
[7]	叶升玉, 成依依, 李曼, 周红宁. 我国恶性疟原虫主要药物抗性研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(5): 631-636.
[8]	周水茂, 涂祖武, 杨燕, 陈芳, 贾西帅. 环介导等温扩增检测恶性疟原虫与其他疟原虫的效果评价[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(4): 423-428.
[9]	叶升玉, 成依依, 李曼, 周红宁. 恶性疟原虫抗药性分子标记检测方法研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(4): 490-495.
[10]	李仁清, 王小梅, 孙玉兰, 吕燕宁, 窦相峰, 王全意. 宏基因组学二代测序技术在输入性疟疾诊断中的应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(6): 727-729.
[11]	牟畇珊, 李璐杰, 吴银娟, 李学荣. 疟原虫青蒿素耐药分子机制探索[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(6): 636-642.
[12]	刘纯, NdoumadiambaALFRED, MounzieGouGNONDA. 胶体金恶性疟原虫检测试剂盒在非洲加蓬的临床应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(6): 679-680.
[13]	毛强, 裴福全, 岑咏珍, 刘梦然, 张豪, 邓卓晖. 广东省1例输血性恶性疟病例的实验室检测和溯源调查[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(5): 529-533.
[14]	王志华, 魏春燕, 王恒. 恶性疟原虫非编码RNA的研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(4): 409-413.
[15]	董莹1*，邓艳1，徐艳春1，陈梦妮1，毛祥华1，孙艾明2，王剑1. 不同感染来源恶性疟原虫裂殖子表面蛋白3基因多态性分析及抗原表位预测[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(3): 3-210-217.