目的 探讨自然杀伤(NK)细胞在小鼠脑型疟中对CD4+ T细胞亚群的免疫调节作用。 方法 雌性C57BL/6小鼠随机分为健康对照组、感染组与NK消除组,每组14只。感染组与NK消除组小鼠经腹腔内注射伯氏疟原虫ANKA株(PbA)感染红细胞1 × 106个;NK消除组小鼠在感染前1 d和感染后2 d腹腔内注射NK细胞封闭抗体anti-Asialo GM-1,15 μl/只,健康对照组和感染组注射等体积的PBS。感染后3 d起,采集小鼠尾静脉血,血涂片检测原虫血症,记录死亡情况。感染后3 d和5 d,各组剖杀小鼠3只,取脾脏,制备脾细胞悬液,流式细胞术检测脾细胞中Th1型细胞和调节性T细胞(Tregs);体外培养脾细胞,48 h后收集上清,ELISA检测γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素10(IL-10)的水平。感染后6 d,各组取3只小鼠,用伊文思蓝(EB)染液处理后,取脑,体外孵育脑组织,48 h后收集上清,酶标仪检测通过小鼠血脑屏障的EB含量。 结果 感染组感染后6 d开始出现死亡,并伴有神经症状,8 d全部死亡;NK消除组感染后7 d开始出现死亡,12 d全部死亡。感染后7 d,NK消除组原虫血症为5.2%~10.5%,高于感染组的2.4%~5.0%(P < 0.05)。感染后5 d,感染组Th1型细胞的百分率和绝对计数分别为(2.65 ± 0.06)%和(2.09~2.25)× 106,高于健康对照组[(1.37 ± 0.02)%和(0.41~0.47)× 106](P < 0.01);NK消除组分别为(1.82 ± 0.07)%和(1.48~1.86)× 106,低于感染组(P < 0.01或P < 0.05)。感染后3 d和5 d,感染组Tregs的百分率分别为(1.21 ± 0.06)%和(1.70 ± 0.13)%,高于健康对照组[(0.90 ± 0.01)%和(0.91 ± 0.02)%](P < 0.01);感染组Tregs的绝对计数分别为(0.63~0.73)× 106和(1.39~1.62)× 106,高于健康对照组[(0.27~0.31)× 106和(0.47~0.56)× 106](P < 0.01);NK消除组Tregs百分率分别为(1.86 ± 0.07)%和(2.15 ± 0.04)%,绝对计数分别为(0.77~0.90)× 106和(1.68~2.15)× 106,均高于感染组(P < 0.01或P < 0.05)。感染后3 d和5 d,感染组脾细胞培养上清中的IFN-γ分别为(790.75 ± 84.80)和(989.58 ± 199.59)pg/ml,TNF-α分别为(2 637.47 ± 283.50)和(3 124.58 ± 964.70)pg/ml,均高于健康对照组[(73.69 ± 16.67)和(75.19 ± 15.97)pg/ml、(290.01 ± 187.46)和(290.51 ± 186.76)pg/ml](P < 0.01或P < 0.05);NK消除组培养上清中的IFN-γ分别为(15.83 ± 4.27)和(266.63 ± 108.62)pg/ml,TNF-α分别为(165.89 ± 71.02)和(842.77 ± 311.94)pg/ml,均低于感染组(P < 0.01或P < 0.05)。感染后3 d,NK消除组IL-10为(3 588.20 ± 1 436.38)pg/ml,高于感染组[(1 255.77 ± 190.01)pg/ml](P < 0.05)。感染后5 d,感染组IL-10为(4 991.36 ± 1 030.89)pg/ml,高于健康对照组[(848.50 ± 501.79)pg/ml](P < 0.05);NK消除组为(9 317.95 ± 1 077.89)pg/ml,高于感染组(P < 0.05)。感染后6 d,感染组脑组织EB含量为(4.02 ± 0.10)μg/ml,高于健康对照组[(2.09 ± 0.06)μg/ml](P < 0.05),NK消除组为(3.14 ± 0.02)μg/ml,低于感染组(P < 0.05)。 结论 NK细胞消除可减弱脑型疟小鼠Th1免疫应答,增强Tregs免疫应答,降低血脑屏障通透性,延长小鼠生存时间。