杨桂连, 黄海斌, 杨文涛, 姜延龙, 石春卫, 王春凤*
YANG Gui-lian, HUANG Hai-bin, YANG Wen-tao, JIANG Yan-long, #br# SHI Chun-wei, WANG Chun-feng*
摘要:
目的 探讨斯氏艾美球虫(Eimeria stiedai)可溶性蛋白(EsSP)对荷瘤小鼠肿瘤生长、生存率和免疫状态的影响。 方法 建立小鼠皮下结肠癌(CT26)肿瘤模型, 确定最小100%致瘤量肿瘤细胞数。取108个斯氏艾美球虫孢子化卵囊, 采用超声波间断乳化制备EsSP。105只雄性BALB/c小鼠按随机数表法均分为7组(15只/组), 每组小鼠于右侧腋窝皮下接种CT26细胞5 × 105个, 其中6个实验组(A~F组)小鼠分别腹腔注射100.00、50.00、10.00、1.00、0.10、0.01 μg/d EsSP, 1次/d × 5 d, 对照组腹腔注射等量PBS。于接种后第7、11、13、15、17、19、21、23天测量肿瘤直径, 计算相对肿瘤体积和相对肿瘤增殖率(T/C)。接种后第25天每组各处死5只小鼠, 称量瘤重, 计算抑瘤率。采眼球血, 分离小鼠外周血淋巴细胞, MTS比色法检测EsSP对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖能力的影响, 计算刺激指数(SI); 流式细胞术检测外周血CD4+/CD8+ T淋巴细胞比值变化。记录各组荷瘤小鼠死亡时间和死亡数量, 共观察80 d。各组间差异性比较采用单因素方差分析。 结果 最小100%致瘤量肿瘤细胞数为5 × 105个。接种结肠癌细胞后第23天, A、B、C组的肿瘤体积为(435.2±41.1)、(366.3±29.2)、(460.2±28.5)mm3, 较E、F和对照组的(761.2±33.2)、(810.4±38.4)、(865.2±35.3)mm3生长缓慢(P<0.05); A、B、C组的T/C分别为(39.0±6.7)%、(33.3±8.9)%、(35.0±8.1)%, 均< 40%。B组小鼠瘤重为(1.109±0.432)g, 低于对照组的(1.946±0.289)g(P<0.05), 抑瘤率最高, 为(43.0±14.6)%。MTS比色法检测结果显示, B、C组小鼠SI分别为1.75±0.15、1.70±0.32, 高于对照组的1.38±0.18(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示, A、B、C组小鼠外周血中CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群的比值分别为1.58±0.24、1.74±0.22、1.61±0.16, 与对照组的1.34±0.15比较, 差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。荷瘤小鼠生存率结果显示, 至第80天, B、C组各存活5只小鼠, 高于对照组的2只(P<0.05)。 结论 EsSP能够抑制结肠癌皮下肿瘤的生长, 提高荷瘤小鼠生存率, 改变肿瘤诱导的免疫抑制状态, 增强小鼠抗肿瘤免疫反应。