收集监测报告管理系统中2024年全国31个省（自治区、直辖市，未包括台湾、香港和澳门地区）和新疆生产建设兵团疟疾流行病学个案调查表，对疟疾疫情特征进行统计分析。2024年全国报告疟疾病例3 157例，较2023年（2 488例）增加了26.9%；其中境外输入性病例3 155例，输血感染病例2例；恶性疟2 008例（占63.6%，2 008/3 157），间日疟798例（占25.3%，798/3 157），卵形疟274例（占8.7%，274/3 157），三日疟65例（占2.1%，65/3 157），混合感染12例（占0.4%，12/3 157）。男女性别比为12.4∶1；30~39岁年龄组的病例最多（占28.3%，895/3 157）；以出境务工为主（占69.2%，2 183/3 155）。除西藏自治区和新疆生产建设兵团外，其余30个省份均有疟疾病例报告，病例数位居前5位的省份依次为云南（564例）、广东（246例）、河南（241例）、山东（232例）和四川（220例），累计报告1 503例（占47.6%，1 503/3 157）。全国报告疟疾危重症病例112例（占3.5%，112/3 157），死亡病例15例（占0.5%，15/3 157）。我国已经连续8年无本土原发蚊传疟疾病例报告，但境外输入性疟疾带来的风险持续存在，须提高监测系统敏感性，及时发现、救治病例，减少恶性疟发展为危重症甚至死亡，避免间日疟引起继发传播。
我国发现首例现代确诊血吸虫病病例迄今已120年，经过几代人的努力，血吸虫病防治工作取得举世瞩目的成就。至2023年底，全国实现血吸虫病传播阻断目标，78.49%的流行县均达到了消除目标。但受气候变化、自然灾害、人口流动等因素影响，全国要实现血吸虫病消除目标并持续巩固消除成果仍面临挑战。各地应继续坚持“以传染源控制为主、强化重点环境钉螺控制”的综合防治策略，加强监测预警和风险评估，以科技赋能，创新防治手段，强化能力建设，高质量推进消除进程。
自2005年实施中央财政转移支付地方包虫病防治项目以来，我国棘球蚴病防治成效显著，从当前基本控制棘球蚴病流行，向疫情控制和消除目标推进。本文分析了近年来棘球蚴病的流行态势、问题与挑战，提出了下一步重点工作建议，为优化棘球蚴病防治策略措施、实现全国疫情控制和消除目标提供参考依据。
目的 全面掌握2023年全国棘球蚴病防治工作进展，总结防治经验、发现存在的问题，为制定防治策略和措施提供科学依据。方法 收集2023年中国疾病预防控制中心寄生虫病防治信息管理系统报送的全国棘球蚴病流行区防治工作数据，建立数据库。使用Microsoft Excel 2016对流行区人群查治病情况、传染源感染情况以及中间宿主患病情况等进行概括分析。结果 截至2023年底，全国共有370个棘球蚴病流行县（市、区、旗）、3 580个流行乡（镇）、29 415个流行村。2023年全国现有棘球蚴病患者25 362例，患病率为0.05%（25 362/46 201 537），其中细粒棘球蚴病占62.61%（15 878/25 362），多房棘球蚴病占29.98%（7 604/25 362），混合感染占1.18%（300/25 362），未分型占6.23%（1 580/25 362）。新发现棘球蚴病患者1 695例，其中细粒棘球蚴病占81.00%（1 373/1 695），多房棘球蚴病占7.96%（135/1 695），混合感染占0.24%（4/1 695），未分型占10.80%（135/1 695）；< 12岁患者占10.44%（177/1 695），≥ 12岁患者占89.56%（1 518/1 695）。2023年全国共开展人群腹部超声筛查5 241 196人次，其中，< 12岁人群筛查904 370人次，≥ 12岁人群筛查4 336 826人次；对超声结果为疑似的对象，开展血清学检查12 426人次。2023年，370个监测点 < 12岁人群超声筛查患病检出率为0.02%（72/315 612），新发现病例占检出病例数的37.50%（27/72）；Ⅰ、Ⅱ类流行县（市、区、旗）监测点 ≥ 12岁人群超声筛查患病检出率为0.24%（693/288 437），新发现病例占检出病例数的11.54%（80/693）。2023年开展药物治疗17 629人；手术治疗1 920人，细粒棘球蚴病手术患者占70.31%（1 350/1 920），多房棘球蚴病手术患者占21.35%（410/1 920）。2023年随访结果显示，治愈2 706例，治疗有效18 729例，治疗无效4 860例，死亡（死因非棘球蚴病）480例，排除414例，失访273例，未访（未到访问时间）138例，外迁他地156例。2023年全国流行乡（镇）共有犬2 189 335条，其中登记管理的犬2 045 374条。34 561个村开展了犬驱虫工作，药物驱虫22 124 218次，野外犬科动物驱虫投药235 862份。采集并检测家犬粪样395 885份，粪棘球绦虫抗原阳性1 968份，阳性率为0.50%；采集并检测野外犬科动物粪样75 693份，粪棘球绦虫抗原阳性2 011份，阳性率为2.66%。2023年抽查屠宰的家畜171 102头，检出患病家畜1 533头，患病率为0.90%；检查野外啮齿类动物47 527只，检出患病啮齿类动物229只，患病率为0.48%。结论 2023年全国棘球蚴病流行态势得到基本控制，疫情趋于稳定，但棘球蚴病流行因素复杂，防治工作仍存在诸多困难和挑战，需持续加大防治工作力度，完善监测体系，充分发挥综合防治干预区和区域联防联控机制作用，贯彻落实各项综合防治措施。
白蛉作为多种病原体的传播媒介具有重要的流行病学意义。白蛉肠道内定植着大量的微生物群落，对白蛉及其携带病原体的繁殖和生长发育有着重要影响。本文综述了白蛉携带病原体的种类和肠道微生物的组成，并揭示了白蛉-病原体-肠道微生物之间的相互关系。肠道微生物不仅能直接抑制病原体的感染和传播，也可通过参与白蛉的免疫应答和防御机制，间接改变其感染和传播病原体的能力。
随着以青蒿素为基础的联合疗法在恶性疟治疗中的广泛应用，恶性疟原虫对青蒿素及其衍生物逐渐产生了部分耐药性，成为当前全球疟疾防控最严峻的挑战之一。近年来，恶性疟原虫青蒿素耐药分子机制研究和分子标记鉴定取得较大进展。目前已发现的恶性疟原虫青蒿素耐药相关基因有Kelch13（pfk13）、泛素特异性蛋白酶1（pfubp1）、衔接蛋白复合体2-μ亚基（pfap2μ）和冠状蛋白（pfcoronin）等。分子监测结果显示，恶性疟原虫青蒿素耐药相关突变在东南亚地区已普遍存在，非洲、南美洲和大洋洲也已陆续出现了独立起源的耐药突变虫株。高通量测序技术和分子检测技术的发展为恶性疟原虫青蒿素耐药分子监测提供了强大助力。本文就恶性疟原虫青蒿素耐药分子监测的研究进展作一综述，以期为恶性疟原虫青蒿素耐药监测和控制提供参考。
目的 通过转录组测序分析辣根素作用后粉尘螨差异表达基因（DEG）的变化及作用机制。方法 将90个熏蒸瓶随机均分为实验组和对照组。每瓶取80只粉尘螨背部朝下置于熏蒸瓶的胶板上，实验组熏蒸瓶中加入0.25 ml/L的辣根素稀释液25 μl，对照组加入石蜡。熏蒸24 h后，每组收集2 000只存活螨。实验组和对照组各重复6次，3次用于测序，3次用于实时荧光定量PCR（qPCR）验证。提取粉尘螨RNA并逆转录为cDNA，构建文库并进行转录组测序。测序数据进行质控组装后与非冗余蛋白（NR）、基因本体功能注释（GO）、京都基因与基因组百科全书（KEGG）等数据库进行比对。使用edgeR软件进行差异表达分析，对DEG进行GO与KEGG功能注释与富集。选取粉尘螨在辣根素作用后的DEG，进行qPCR验证，使用R软件对qPCR数据进行方差分析。结果 转录组测序获得56 625条转录本，总长度为72 418 610 nt。共获得的39 510条单基因簇，比对到NR数据库中的数量最多，为25 450个，其次分别为直系同源蛋白分组比对（eggNOG）数据库（17 643个）、蛋白质（Swiss-prot）数据库（13 338个）、GO数据库（13 234个）、KEGG数据库（9 445个）。辣根素作用粉尘螨后，共检测到2 719个DEG，其中上调基因1 185个，下调基因1 534个。GO功能注释结果显示，DEG主要与细胞过程、结合与催化活性等功能相关，GO富集分析结果显示，上调基因主要为ATP结合盒转运蛋白G亚家族（ABCG）、细胞色素P450（CYP450）、热休克蛋白、乙酰胆碱受体等；下调基因主要为钙调蛋白、RNA聚合酶等。KEGG注释显示，DEG主要参与运输与分解代谢、信号转导、翻译等过程。KEGG富集分析显示，DEG富集于30条通路，主要富集在核糖体、不同环境中微生物代谢以及次生代谢物的生物合成等通路。qPCR结果显示，实验组UDP-葡萄糖醛酸转移酶（UGT）、多重耐药相关蛋白1（MRP1）基因的相对转录水平分别为1.18 ± 0.22、6.22 ± 0.42，较对照组（0.76 ± 0.30、2.52 ± 1.75）显著上调（F = 11.22、16.83，均P < 0.05）；线粒体核糖体相关GTP酶（MTG）的相对转录水平为0.05 ± 0.04，较对照组（1.23 ± 0.62）显著下调（F = 13.95，P < 0.05）；均与转录组测序结果一致。结论 辣根素作用后粉尘螨体内多种基因存在表达差异，UGT、CYP450、MRP1、ABCG基因在对辣根素产生抗性或解毒代谢中起重要作用。
目的 分析1990—2021年全球主要人体寄生虫病的疾病负担变化和分布特征，为寄生虫病防控提供科学依据。 方法 从全球疾病负担数据库中提取疟疾、美洲锥虫病、利什曼病、非洲锥虫病、血吸虫病、囊尾蚴病、细粒棘球蚴病、淋巴丝虫病、盘尾丝虫病、肠道线虫感染、食源性吸虫病及麦地那龙线虫病等12类主要人体寄生虫病的年龄标准化发病率、患病率、死亡率、伤残调整寿命年（DALY），从时间、人群（性别）及地区[含社会经济指数（SDI）分层]维度分析分布特征与趋势。采用R软件进行数据处理与可视化，结合Monte Carlo模拟估算不确定性区间。 结果 1990—2021年全球寄生虫病总DALY从7 403万人•年降至6 424万人•年，下降了13.22%。多数病种疾病负担下降，仅盘尾丝虫病、囊尾蚴病、食源性吸虫病和美洲锥虫病等4类有增加（增加1~5倍）。在病种排序上，疟疾始终为疾病负担最重的疾病（占比超3/4），利什曼病从第2位降至第8位，血吸虫病升至第2位。在时空分布中，疟疾疾病负担自2005年显著下降后近年略有反弹；肠道线虫感染、淋巴丝虫病等降幅超50%。撒哈拉以南非洲疾病负担最重，疟疾、血吸虫病等高度聚集；食源性吸虫病集中于东亚/东南亚；囊尾蚴病在欧美等发达地区亦高发。淋巴丝虫病男性疾病负担更重（死因排序第2位，女性中排序第7位）；疟疾、血吸虫分别为男性死因排序第1、第3位，为女性死因排序第1、第2位。低SDI地区疾病负担高于高SDI地区。 结论 全球寄生虫病负担整体下降但区域失衡突出，部分病种反弹风险犹存。需针对性调整防控策略，强化低SDI地区资源投入，关注性别差异，并警惕气候变化、全球化等新兴挑战。
刚地弓形虫（简称弓形虫）是一种全球分布的专性细胞内寄生原虫，可引起人兽共患的弓形虫病。研究发现，慢性弓形虫感染通过在宿主脑中形成组织包囊，导致宿主的中枢神经系统功能损伤（如神经免疫应答和神经递质失衡），表现为精神障碍（如精神分裂症、双向情感障碍、重度抑郁和自杀未遂）、认知功能下降、阿尔茨海默病和行为改变（如致命的吸引现象、交通事故风险增高、成为狼王的概率增加、性吸引力增加以及饮食偏好改变）等。本文旨在探究慢性弓形虫感染与宿主神经精神和行为改变的关联及其潜在机制。
蓝氏贾第鞭毛虫是一种呈世界性分布的人兽共患寄生虫，感染可引起以腹泻和腹痛为主要临床症状的贾第虫病。该病对儿童和免疫功能低下人群的健康构成严重威胁。基于贾第虫病在治疗选择的局限性以及没有临床可用疫苗的事实，该病在全球范围内已引起越来越多的关注。本文概述了自1924年我国首次报告贾第虫病以来人体贾第虫感染情况，以及水源和食源污染情况，以期为我国人体贾第虫病防控策略的制定提供参考。
目的 了解2013—2023年安徽省传染病网络直报系统中法定寄生虫病报告情况，分析其流行病学特征。方法 从中国疾病预防控制信息系统获取2013年1月1日—2023年12月31日现住址为安徽省的阿米巴痢疾、血吸虫病、疟疾、内脏利什曼病、棘球蚴病和丝虫病等6种法定寄生虫病病例资料。采用描述性流行病学方法分析报告病例的三间分布特征、报告及时率，评价病例诊断至报告时间间隔，应用卡方检验、Fisher确切概率法及秩和检验进行组间比较。结果 2013—2023年安徽省共报告法定寄生虫病25 699例，其中血吸虫病24 536例、疟疾1 072例、阿米巴痢疾50例、内脏利什曼病6例、棘球蚴病35例、丝虫病0例。年均发病率3.79/10万，整体呈下降趋势。男性发病率为4.26/10万，高于女性的3.32/10万（χ2 = 398.302，P < 0.05）。病例年龄主要集中在40~59岁，占60.96%（15 667/25 699）。职业以农民为主，占92.70%（23 824/25 699），发病高峰集中在6—11月，占76.26%（19 598/25 699）。安庆市报告的血吸虫病病例数占比最高（32.18%，7 896/24 536），合肥市报告的疟疾病例数占比最高（52.15%，559/1 072）。诊断至报告时间间隔中位数为4.61 h，棘球蚴病报告及时率最低，为97.14%（34/35），不同病种诊断至报告时间间隔以及报告及时率差异均有统计学意义（H = 26.559；χ2 = 17.204，均P < 0.05）。结论 2013—2023年安徽省法定寄生虫病呈低流行态势，中老年、男性、农民为高发人群，不同病种的发病率存在地区差异，棘球蚴病报告及时率较低。
为了解内蒙古2015—2023年棘球蚴病变化趋势，收集传染病网络直报系统中2015—2023年内蒙古棘球蚴病病例信息，采用描述性流行病学方法对时间、地区、人群分布等情况进行统计分析。结果显示，2015—2023年内蒙古12个市（盟）累计报告棘球蚴病病例500例。每年均有病例报告，其中2018年报告病例数最多，为104例（占21.0%），从2021年起报告病例数明显减少。地区分布中，锡林郭勒盟（202例，占40.4%）、赤峰市（144例，占28.8%）、呼伦贝尔市（52例，占10.4%）的报告病例数排前3位。男性病例255例，女性245例，男女性别比为1∶0.96。病例职业以牧民（151例，占30.0%）、农民（145例，占29.0%）、家务及待业人员（104例，占21.0%）为主。病例年龄5~97岁，主要集中在30~69岁年龄段，其中50~59岁年龄段病例数最多，为127例（占25.4%），其次为40~49岁年龄段（116例，占23.2%）。2015—2023年，内蒙古棘球蚴病报告病例数于2018年达到高峰，2021年快速下降，棘球蚴病综合防治工作取得了较好的效果，应继续加强传染源管理、人群监测、健康教育等工作。
目的 结合环介导等温扩增（LAMP）技术与规则成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白12a（CRISPR/Cas12a）系统，建立一种高度敏感、特异的日本血吸虫核酸片段的快速检测方法。方法 选取Sj28S核糖体基因片段作为靶序列，设计LAMP引物、单链DNA（ssDNA）和CRISPR RNA（crRNA），确定各组分浓度，筛选最佳反应体系和条件，建立日本血吸虫核酸LAMP-CRISPR/Cas12a快速荧光检测方法。用不同浓度的日本血吸虫成虫基因组DNA（1 ng/μl、100 pg/μl、10 pg/μl、1 pg/μl、100 fg/μl、10 fg/μl、1 fg/μl）及构建的含Sj28S核糖体基因片段的重组质粒（106、105、104、103、102、101、100、10-1拷贝/μl）评估该方法的敏感性，用日本血吸虫、曼氏血吸虫、华支睾吸虫、大片形吸虫、卫氏并殖吸虫、广州管圆线虫、多房棘球绦虫、湄公血吸虫感染的开放拟钉螺以及日本血吸虫感染湖北钉螺和阴性湖北钉螺基因组DNA评价其特异性。构建40、20、10条日本血吸虫尾蚴感染小鼠模型，采集感染后第3~6周小鼠粪样以及感染后第3天及第1~6周小鼠血浆样本，以qPCR法为平行对照，评价所建方法检测日本血吸虫感染鼠粪样与血浆DNA的效果。结果 选择crRNA-2建立LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法，筛选ssDNA、crRNA和Cas12a的最适终浓度分别为400、200、200 nmol/L，LAMP预扩增时间为30 min。该方法对日本血吸虫成虫基因组的最低检出限为10 fg/μl，对重组质粒的最低检出限为1拷贝/μl。该方法与曼氏血吸虫、华支睾吸虫、大片形吸虫、卫氏并殖吸虫、广州管圆线虫、多房棘球绦虫等常见寄生虫以及湄公血吸虫感染的开放拟钉螺和阴性湖北钉螺等中间宿主基因组DNA均无交叉反应。LAMP-CRISPR/Cas12a、qPCR法对感染小鼠混合粪样检测阳性率分别为85.42%（41/48）和51.02%（175/343）（χ² = 8.71，P < 0.05），且LAMP-CRISPR/Cas12a法最早可检出小鼠感染后第3周的粪样，早于qPCR法（可检出感染第4周粪样）。LAMP-CRISPR/Cas12a、qPCR法对感染小鼠血浆样本检测阳性率分别为58.3%（28/48）和27.11%（93/343）（χ² = 9.77，P < 0.05）；LAMP-CRISPR/Cas12a和qPCR方法均最早可检出小鼠感染后第3天血浆中的血吸虫循环DNA，阳性率分别为53.06%（26/49）、22.45%（11/49）（χ² = 9.77，P < 0.05）。结论 本研究建立了一种LAMP-CRISPR/Cas12a日本血吸虫核酸快速检测方法，操作简便快捷、高度敏感与特异，且具有较好的早期检测价值，有望为血吸虫病的现场检测提供新的工具。
目的 探究多房棘球蚴感染对巨噬细胞CD47与信号调节蛋白α（SIRPα）表达水平及巨噬细胞功能的影响，为探索多房棘球蚴病（AE）发病机制提供依据。方法 收集30例AE患者的肝脏病理组织，选取病灶周围0.5 cm处的病灶近旁肝组织（CLT）和超过病灶2 cm以上的病灶远端肝组织（DLT），石蜡切片行免疫组化、冰冻切片行免疫荧光，观察分析CLT和DLT中CD47和SIRPα的表达水平。小鼠单核巨噬细胞白血病细胞（RAW264.7）与多房棘球蚴原头节共培养（细胞数∶原头节数 = 500∶1），分别于加入原头节前、共培养24和48 h后收集细胞，流式细胞术、细胞免疫荧光和实时荧光定量PCR（qPCR）检测巨噬细胞CD47和SIRPα的表达变化。RAW264.7细胞分为对照组、感染组、抑制剂组和抑制剂感染组（1 × 105个/组），感染组和抑制剂感染组加入原头节（200个/组）、抑制剂组和抑制剂感染组加入CD47/SIRPα结合抑制剂（NCGC00138783TFA，10 μmol/L），共培养48 h后加入增强型绿色荧光蛋白（EGFP）标记的大肠埃希菌（1 × 106个/组），荧光观察后流式细胞术检测巨噬细胞吞噬能力变化，qPCR检测巨噬细胞极化标志物和细胞因子mRNA相对转录水平的变化。两组间比较采用独立样本t检验或配对t检验，多组间比较用单因素方差分析，多重比较使用Tukey’s HSD法。结果 免疫组化结果显示，AE患者CLT的CD47、SIRPα阳性细胞分别占（61.99 ± 3.61）％、（54.06 ± 1.85）％，均高于DLT的（57.08 ± 3.38）％、（40.77 ± 1.49）％（t = 9.434、58.840，均P < 0.01）；免疫荧光结果显示，CLT的CD47/SIRPα皮尔逊相关系数为0.66 ± 0.02，高于DLT的0.45 ± 0.01（t = 7.624，P < 0.01）。流式检测结果显示，共培养24和48 h后的巨噬细胞CD47中位荧光强度分别为8 259.00 ± 66.01和9 445.00 ± 41.58，均高于加入原头节前的5 603.00 ± 193.40（HSD = 0.691、0.735，均P < 0.01）；共培养24和48 h后的巨噬细胞SIRPα中位荧光强度分别为3 123.00 ± 184.60和2 931.00 ± 54.08，均高于加入原头节前的2 508.00 ± 43.15（HSD = 0.491、0.235，均P < 0.01）。qPCR结果显示，共培养24和48 h后的巨噬细胞CD47 mRNA相对转录水平分别为1.80 ± 0.02和1.64 ± 0.01，均高于加入原头节前的0.99 ± 0.01（HSD = 0.098、0.125，均P < 0.01）；加入原头节前、共培养24和48 h后的巨噬细胞SIRPα mRNA相对转录水平分别为1.00 ± 0.02、0.52 ± 0.05和1.27 ± 0.03，24 h后低于加入原头节前（HSD = 0.015，P < 0.01），48 h后高于加入原头节前（HSD = 0.105，P < 0.01）。免疫荧光结果显示，共培养24和48 h后的CD47/SIRPα皮尔逊相关系数分别为0.920 ± 0.001和0.990 ± 0.001，均高于加入原头节前的0.770 ± 0.001（HSD = 0.091、0.135，均P < 0.01）。荧光结果显示，抑制剂感染组的EGFP平均荧光强度为8 923.0 ± 49.3，高于感染组的7 537.0 ± 29.3（HSD = 0.205，P < 0.01）；流式检测结果显示，抑制剂感染组的EGFP平均荧光强度为21.54 ± 0.03，高于感染组的18.55 ± 0.51（HSD = 0.327，P < 0.01）。qPCR结果显示，抑制剂感染组M1型标志物诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、CD86的mRNA相对转录水平分别为20.87 ± 0.40、40.64 ± 0.75，均高于感染组的5.38 ± 0.11和3.79 ± 0.05（HSD = 0.194、0.261，均P < 0.01）；M2型标志物精氨酸酶1（Arg1）、CD206的mRNA相对转录水平分别为48.76 ± 2.22、6.33 ± 0.06，均低于感染组的83.28 ± 0.58和12.33 ± 0.12（HSD = 0.283、0.164，均P < 0.01）。抑制剂感染组M1型细胞因子白细胞介素6（IL-6）、IL-1β、、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的mRNA相对转录水平分别为3 896.00 ± 176.70、271.30 ± 8.39和4.90 ± 0.10，均高于感染组的2 869.00 ± 89.55、154.90 ± 2.61和3.04 ± 0.03（HSD = 0.712、0.625、0.693，P < 0.05、0.01、0.01）；M2型细胞因子IL-10、转化生长因子β（TGF-β）的mRNA相对转录水平分别为127.40 ± 4.92、1.34 ± 0.03，均低于感染组的380.30 ± 8.55和1.61 ± 0.02（HSD = 0.324、0.163，均P < 0.01）。结论 多房棘球蚴感染后巨噬细胞的CD47和SIRPα表达升高、吞噬能力下降，特异性抑制CD47/SIRPα结合能够改善巨噬细胞吞噬功能并促进巨噬细胞向M1型极化。
目的 基于成簇规律间隔短回文重复序列核酸酶技术（CRISPR/Cas9）构建刚地弓形虫ME49株缓殖子形成缺陷基因2（bfd2）缺陷虫株并进行表型分析，探讨弓形虫BFD2对虫体分化和增殖作用。方法 运用E-CRISPR数据库设计bfd2向导RNA（SgRNA），并使用Q5定点基因敲除试剂盒突变pSAG1::CAS9-U6::SgUPRT质粒上的SgRNA，构建pSAG1::CAS9-U6::SgBFD2质粒。将乙胺嘧啶抗性基因、bfd2基因上下游序列连接成供体DNA（donorDNA）并克隆于pUC19质粒上，PCR扩增donorDNA。以ME49虫株为背景，pSAG1::CAS9-U6::SgBFD2质粒和donorDNA片段电穿孔共转染ME49弓形虫速殖子，电转后悬液接种至人包皮成纤维细胞（HFF），3 μmol/L乙胺嘧啶单克隆筛选电转虫株。将筛选出的单克隆虫株接种HFF细胞，培养传代后，PCR鉴定虫株∆bfd2敲除情况。通过体外增殖试验观察虫株在HFF内的增殖情况，噬斑试验观察虫株在HFF细胞上形成噬斑的能力，苏木精-伊红（HE）染色观察虫株感染小鼠的肝脏病理情况。采用GraphPad Prism 9进行统计学分析，实验数据使用双尾非成对Student t检验和ANOVA检验。结果 成功构建pSAG1::CAS9-U6::SgBFD2质粒和donorDNA质粒，编码乙胺嘧啶抗性基因（DHFR）序列成功插入靶位点，经PCR鉴定、筛选出∆bfd2基因敲除单克隆虫株（ME49 ∆bfd2株）。增殖试验结果显示，ME49株感染的HFF内，每个纳虫泡中 > 16、= 16和 ≤ 8个速殖子的纳虫泡数量占比分别为（55.33 ± 5.03）%、（27.00 ± 3.00）%和（17.67 ± 4.04）%，ME49 ∆bfd2株感染的分别为（25.33 ± 4.16）%、（42.67 ± 3.06）%和（32.00 ± 6.93）%，ME49株感染的HFF中 > 16个速殖子的纳虫泡数量高于ME49 ∆bfd2虫株（t = 6.337，P < 0.01）。噬斑试验结果显示，接种100、1 000、10 000个ME49株速殖子感染的HFF分别形成（13.50 ± 3.11）、（119.75 ± 4.86）和（264.25 ± 28.61）个噬斑，均高于ME49 ∆bfd2株感染的（1.25 ± 0.96）、（6.75 ± 0.96）和（22.00 ± 5.72）个（t = 7.415、57.72、18.04，均P < 0.01）。HE结果显示，ME49 ∆bfd2株感染小鼠肝脏炎症较ME49株感染小鼠减轻。结论 基于CRISPR/Cas9技术成功构建BFD2缺陷虫株，且BFD2的缺失可抑制弓形虫的分化、增殖，并减轻小鼠肝脏炎症。
棘球蚴病是我国重点防治的寄生虫病，参比实验室是准确获取流行病学数据、评估防治效果和监测疫情变化的保证。我国自2013年起开展了棘球蚴病参比实验室网络的建设工作，目前省级参比实验室已覆盖70%的棘球蚴病流行区。本文总结和分析了全国棘球蚴病参比实验室建设情况和面临的挑战，提出了下一步工作方向和重点内容，为进一步提升棘球蚴病检测能力，加快推进棘球蚴病控制进程提供参考。
目的 了解2021—2023年四川省棘球蚴病疫情趋势变化，为后续防控措施制定提供参考。方法 按照《全国包虫病监测方案（2020年版）》在四川省35个不同分类棘球蚴病流行县开展监测。Ⅰ、Ⅱ类县采用随机整群抽样选定区域作为监测点，完成不少于1 000人的超声筛查，监测点5年内不重复；Ⅲ类县在县级医院对就诊人群进行超声筛查；各县随机抽取1~5 所小学开展学生筛查（Ⅰ、Ⅱ类县500人，Ⅲ类县1 500人）。监测县的流行乡每个行政村随机采集家犬粪样10份，Ⅰ类县在定居点周边或乡村级公路两侧随机采集野外犬科动物粪样200份，采用免疫学方法检测犬粪棘球绦虫抗原。在监测县集中屠宰场或散宰点检查本地牛50~300头或羊100~500只，在混合流行县不同乡镇捕捉500只小型哺乳动物，采用触检法、剖检法了解宿主患病情况。在监测县采用问卷调查了解300名学生的棘球蚴病防治知识知晓及健康行为情况。各组率的比较采用卡方检验。结果 2021—2023年四川省监测点共筛查170 881人，总患病率为0.328%（561/170 881），其中2021—2023年患病率分别为0.334%（209/62 639）、0.458%（257/56 103）、0.182%（95/52 139），差异有统计学意义（χ2 = 62.94，P < 0.01）。2021—2023年新患者检出率分别为3.19/10万、0、1.92/10万，差异无统计学意义（Fisher值 = 1.62，P > 0.05）。2021—2023年筛查小学生77 308人，未检出棘球蚴病新患者。2021—2023年，多房棘球蚴病患病率（0.181%，310/170 881）高于细粒棘球蚴病（0.132%，226/170 881）（χ2 = 13.19，P < 0.01），女性患病率为（0.395%，360/91 102）高于男性（0.252%，210/79 779）（χ2 = 22.66，P < 0.01），不同年龄段、不同地区患病率差异有统计学意义（χ2 = 77.74、261.54，P < 0.01）。2021—2023年家犬粪棘球绦虫抗原阳性率分别为0.50%（133/26 450）、0.38%（108/28 264）、0.24%（72/29 847），呈现逐年降低的趋势（χ2 = 26.19，P < 0.01）；野外犬科动物粪棘球绦虫抗原阳性率分别为1.60%（37/2 312）、0.40%（11/2 720）、0.35%（10/2 844），差异有统计学意义（χ2 = 33.47，P < 0.01）。2021—2023年牲畜患病率分别为0.92%（82/8 898）、1.07%（78/7 312）、1.24%（92/7 416），差异无统计学意义（χ2 = 3.90，P > 0.05）；小型哺乳动物患病率为3.48%（442/12 684）、2.58%（231/8 955）、1.39%（129/9 286），呈逐年降低（χ2 = 93.20，P < 0.01）。2021—2023年监测县小学生棘球蚴病防治知识知晓率分别为92.62%（11 114/11 999）、92.17%（10 221/11 089）、93.32%（10 491/11 242），差异有统计学意义（χ2 = 11.05，P < 0.05）。2021—2023年不接触犬的合格率为75.47%（9 056/11 999）、73.24%（8 122/11 089）、82.19%（9 240/11 242），饭前洗手的合格率为70.72%（8 486/11 999）、75.63%（8 387/11 089）、80.76%（9 079/11 242），不用生的家畜脏器喂犬的合格率为87.82%（10 537/11 999）、83.25%（9 232/11 089）、92.47%（10 395/11 242），不同年度间3种健康行为合格率的差异均有统计学意义（χ2 = 274.81、316.96、444.35，P < 0.01）。结论 2021—2023年四川省棘球蚴人群新患者检出率、犬只粪抗原阳性率、中间宿主患病率稳步降低或保持较低水平，人群棘球蚴病防治知识知晓率和健康行为合格率稳步提高，但部分地区波动较大，需持续强化综合防控措施，防止疫情反弹。
目的 分析2023年新疆棘球蚴病流行病学特征及空间分布特征，为制定防治策略提供参考依据。方法 通过传染病网络直报系统收集2023年新疆新发现棘球蚴病报告病例数据。采用Microsoft Excel 2016软件进行数据统计分析和图表制作；采用ArcGIS 10.8软件，基于新发现棘球蚴病报告病例数绘制三维趋势图，分析报告病例数在空间上的分布和变化趋势；基于个案数据间的空间关系，绘制冷热点地图，分析不同地理位置的病例间聚集模式；基于冷热点分析结果，采用反距离插值法获取2023年新疆棘球蚴病冷热点预测图，分析新疆未来可能的高风险地区。结果 2023年新疆共报告新发现棘球蚴病病例958例，14个地州（市）均有病例报告，其中伊犁州报告病例数最多，为309例（占总报告病例数的32.25%）。男性病例506例（占52.82%），女性452例（占47.18%）；病例年龄最小2岁，最大99岁，平均45.0（20.0，56.0）岁，其中6~11岁（占10.54%，101/958）、12~17岁（占10.86%，104/958）和48~53岁（占14.41%，138/958）年龄段报告病例数占比较高；职业分布以农牧民占比最高，为46.66%（447/958）。空间描述性分析显示，新疆96个县（市）平均报告病例例数为6.0（2.0，13.5）例，新发现报告病例数呈现从西到东先增后降、从南向北逐渐增高的趋势。空间自相关分析结果表明，2023年新疆棘球蚴病存在空间自相关性（Moran’s I = 0.028，Z = 2.584，P < 0.05），即存在空间聚集现象。冷热点分析可见，北疆报告病例数较多，较多区（县）呈现出高值聚集，是发病热点区域；南疆报告病例数较少，呈现出较多低值聚集，是发病冷点区域。结论 新疆棘球蚴病呈空间聚类分布，总体呈现北疆高于南疆，北疆的西南部地区是棘球蚴病发病热点区域，以此为中心向东南方向辐射，需在该类地区开展重点防控。
目的 结合重组酶聚合酶扩增技术（RPA），建立一种快速、便捷的检测棘球绦虫及进一步鉴定细粒棘球绦虫的方法。方法 以棘球绦虫细胞色素C氧化酶亚基1（co1）和NADH脱氢酶亚基5（nd5）的基因为靶序列，利用Primer Premier 6软件设计特异性引物和探针并进行筛选，建立棘球绦虫核酸双探针荧光RPA检测方法。采用不同DNA拷贝数（104、103、102、10、1个拷贝/μl）的含co1和nd5的重组质粒，评价该方法的敏感度。以多房棘球绦虫、猪带绦虫、日本血吸虫、美洲钩虫、巴西日本圆线虫、华支睾吸虫、蓝氏贾第鞭毛虫、微小隐孢子虫、刚地弓形虫和田鼠巴贝虫基因组DNA评价该方法的特异性。利用23份模拟样品（棘球绦虫原头节DNA和阴性犬粪提取的DNA混合）和5份现场采集的犬粪细粒棘球绦虫阳性DNA样品（经PCR鉴定）评价该方法的可行性。结果 针对棘球绦虫基因组DNA建立的FAM/HEX双探针荧光RPA检测法的最佳反应条件为39 ℃、金属浴300 rpm振荡反应4 min后，采用荧光定量PCR（qPCR）检测荧光信号12.5 min，总反应时长16.5 min。敏感度检测结果显示，该法对co1和nd5重组质粒的最低检出限分别为10拷贝/μl和100拷贝/μl。特异性检测结果显示，该法仅对细粒棘球绦虫有FAM/HEX双重荧光信号，对多房棘球绦虫有FAM单荧光信号，而对猪带绦虫、日本血吸虫、美洲钩虫和华支睾吸虫等9种寄生虫基因组DNA无特异性反应。可行性评价结果显示，含有细粒棘球绦虫基因组DNA的16份模拟样品产生FAM/HEX双阳性信号，其中8份为混合细粒棘球绦虫基因组DNA的模拟样品，8份为混合细粒和多房棘球绦虫基因组DNA的模拟样品；仅含有多房棘球绦虫基因组DNA的7份模拟样品产生FAM单阳性信号；5份现场采集的犬粪细粒棘球绦虫阳性DNA样品产生FAM/HEX双阳性信号；其他DNA样品均无任何阳性信号。该法的检测结果与PCR法的检测结果一致。结论 本研究建立了基于双探针荧光RPA检测棘球绦虫的方法，且该方法可鉴定出细粒棘球绦虫，其检出限低、特异性强，操作简单快捷。
截至目前，有关非洲的弓形虫感染和弓形虫病的研究报道较有限。本文在PubMed中使用关键词“弓形虫”“弓形虫病”和“非洲”系统检索2015—2024年报道的非洲一般人群的弓形虫感染状况、非洲孕妇的弓形虫感染状况、非洲儿童的弓形虫感染状况和先天性弓形虫病、非洲HIV阳性者/艾滋病患者和肿瘤患者的弓形虫感染状况、非洲的弓形虫虫株基因型和地理分布，以及非洲弓形虫感染的危险因素和感染方式的文献报道，以期为相关研究提供参考。
