中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2012, Vol. 30 ›› Issue (1): 3-12-17.
黄宪希,周利民,易国辉,吴金燕,潘在用,薛伟玲,郭虹*
HUANG Xian-xi,ZHOU Li-min,YI Guo-hui,WU Jin-yan,PAN Zai-yong,XUE Wei-ling,GUO Hong*
摘要: 目的 观察伯氏疟原虫(Plasmodium berghei,Pb)ANKA抗哌喹(PQR)系小鼠模型的免疫学特征。 方法 64只昆明小鼠随机分为3组,A组和C组各16只,B组32只(其中16只用于观察存活天数)。A组和B组小鼠分别经腹腔感染伯氏疟原虫ANKA株哌喹敏感系(PbPQS)和抗性系(PbPQR)红内期原虫1×107个(200 μl血),C组(健康对照组)注射等量生理盐水。每组于感染后4、8、12和16 d各取4只小鼠,取尾血制薄血膜镜检,计算红细胞原虫感染率(简称原虫率)。脱颈处死小鼠,无菌取脾制备脾淋巴细胞悬液,用CCK?鄄8法测定各组小鼠脾淋巴细胞经刀豆球蛋白A (Con A)刺激后的增殖反应,用Griess法和ELISA分别测定脾淋巴细胞培养上清中NO含量和γ干扰素(IFN-γ)水平。另取10只昆明小鼠,每鼠腹腔接种PbPQR系原虫约1×107个,待原虫率上升后下降,典型的原虫转变为蓝染细胞时,腹腔感染PbPQS系原虫(1×106个)进行攻击感染,观察小鼠原虫率和小鼠存活情况。 结果 A组小鼠平均存活(9.0±3.0) d,感染后6~12 d原虫率均>50%,出现严重贫血。感染后16 d,B组小鼠全部存活,原虫率为(26.66±2.54)%。A、B两组小鼠的脾淋巴细胞经Con A刺激后增殖显著,感染后12 d,分别为0.65±0.08和0.86±0.20(P<0.01)。脾淋巴细胞培养上清中,NO含量随感染时间延长而上升,感染后12 d,A、B和C组分别为(48.80±3.49)、(54.80±2.17)和(7.80±0.71) μmol/L,三者比较差异有统计学意义(P<0.01)。A组脾淋巴细胞培养上清中IFN-γ水平随感染时间延长而上升,感染后12 d达到最高,为(752.20±39.49) pg/ml,B组于感染后8 d升至峰值[(855.80±33.65) pg/ml],感染后12 d降至(620.20±27.11) pg/ml;感染后8 d和12 d,A组和B组IFN-γ水平的差异有统计学意义(P<0.01)。用PbPQS系攻击感染PbPQR系小鼠模型后10 d,原虫率为(2.44±2.07)%,随之逐渐消失,感染后40 d未检出虫体,无小鼠死亡。 结论 伯氏疟原虫ANKA株哌喹抗性系感染小鼠的脾淋巴细胞增殖水平、NO水平和IFN?鄄?酌含量均显著高于PbANKA株PQS系感染小鼠,可诱导小鼠产生一定保护性免疫反应。