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1999年 第17卷 第2期    刊出日期：1999-04-30

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论著

血吸虫肠相关循环抗原组分CAA和CCA的纯化与特异检测

钱宗立王兆军陆萍G.J.VanDamA.M.Deelder

1999, 17(2):  1-69. 

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　　目的：探讨血吸虫肠相关循环抗原ＣＡＡ与ＣＣＡ诊断靶微粒特异性的差别，并试探获取其纯化制品用于定量检测的标准系列。方法：对两组分进行了亲和层析及阴离子交换剂高效液相纯化分离，并应用单抗检测系统进行同相和异相交互测试。结果：Ｍｏｎｏ－Ｑ－ＨＰＬＣ（高效液相层析）梯度洗脱分离ＡＷＡｊ－ＴＣＡ可溶组分，可获得一个带阳离子活性的非结合ＣＣＡ－１洗脱峰及３个大小不等的、带阳离子活性的ＣＣＡ－２、ＣＣＡ－３及ＣＣＡ－４非结合洗脱峰，以及一个带阴离子活性ＣＡＡ－１洗脱峰。ＣＡＡ活性峰在峰谱上与ＣＣＡ－３有部分重叠。与单抗亲和层析纯品的活性对比测定显示ＣＣＡ－１与ＣＣＡ－２为该组分的主要构成，但ＣＣＡ－２及ＣＡＡ－１在本实验条件下均有微量的相互杂染。同相和异相双位点ＥＬＩＳＡ的４种组合交互检测，展示ＣＣＡ只能在捕获与检测抗体同为抗ＣＣＡ单抗的一种组合中被检出，而另３种组合只能测出ＣＡＡ组分。结论：血吸虫肠相关ＣＣＡ组分为一兼含两性电荷的分子混合体；而ＣＡＡ分子上具有一个可被抗ＣＣＡ单抗识别的活性表位位点，从而可能影响纯化分离和特异检测。


日本血吸虫Sj32DNA疫苗免疫效果的观察

李传明;石佑恩

1999, 17(2):  2-73. 

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　　目的：探讨血吸虫Ｓｊ３２ＤＮＡ疫苗抗血吸虫感染的免疫效果。方法：采用ＰＣＲ技术，人工合成引物，以重组ＤＮＡｐＳｊ３２为模板，扩增出编码３２ｋＤａ天冬酰胺肽链酶，即Ｓｊ３２全长ｃＤＮＡ和引入了起始密码子终止密码子的部分ｃＤＮＡ片段，将其分别克隆到ｐＫＢ－ＣＭＶ，构建真核表达载体ｐＢＫ－Ｓｊ３２－１和ｐＢＫ－Ｓｊ３２－２。采用脂质体介导的基因转移将两种重组ＤＮＡ导入ＮＩＨ３Ｔ３细胞，间接免疫荧光法证实Ｓｊ３２在真核细胞中表达。小批量制备纯化ＤＮＡ，进行动物免疫试验。将两种构建的真核表达载体分别直接ｉｍＢＡＬＢ／ｃ小鼠，共免疫３次，攻击感染后６ｗｋ剖杀小鼠。收集血清，ＥＬＩＳＡ法检测抗体水平，并计数成虫负荷及肝组织虫卵数。结果：ｐＢＫ－Ｓｊ３２－１组与ｐＢＫ－Ｓｊ３２－２组免疫小鼠后的减虫率分别为３８．６％和３０．９％，肝组织减卵率分别为５５．７％和５５．２％，与对照组比较，其间差别均具有极显著性意义（Ｐ＜０．０１）。各ＤＮＡ疫苗免疫组能诱导一定水平的抗血吸虫抗体。结论：Ｓｊ３２ＤＮＡ疫苗可诱导小鼠产生一定程度的保护性免疫力，有可能作为血吸虫疫苗候选抗原分子。


日本血吸虫重组谷胱甘肽-S-转移酶诱生的保护性免疫应答特征的研究

周生华;刘述先;宋光承;徐裕信

1999, 17(2):  3-77. 

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　　目的：研究日本血吸虫重组谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ）在不同品系小鼠（ＢＡＬＢ／ｃ小鼠及Ｃ５７ＢＬ／６小鼠）诱生免疫应答的差异。方法：将ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ（弗氏佐剂）经皮下免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠及Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，收集免疫前和免疫后血清及取小鼠脾脏，分析ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫小鼠诱生的特异性抗体、脾脏淋巴细胞特异性增殖能力及细胞因子种类等。结果：ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠所诱生的抗体总ＩｇＧ及ＩｇＧ亚类均较明显高于免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。抗体ＩｇＧ亚类分析显示，ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ在Ｃ５７ＢＬ／６小鼠诱生较高滴度的ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ及ＩｇＧ２ｂ（血清按１∶４００稀释，Ａ４９２ｎｍ值分别为＞３．０、１．１２７、＞３．０），而在ＢＡＬＢ／ｃ小鼠主要诱生较低滴度的ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ及ＩｇＧ２ｂ（血清按１∶４００稀释，Ａ４９２ｎｍ值分别为１．１８９、０．３９、０．６２５）；ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫能够诱导小鼠Ｔｈ细胞激活。细胞因子分析显示ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠既能诱生较高水平的ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ，又能诱生ＩＬ－５。而ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠仅


18kDa抗原诊断泡型包虫病的评价

江莉;温浩;李雄;伊斯拉因·乌斯满

1999, 17(2):  4-80. 

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　　目的：评价１８ｋＤａ抗原在泡型包虫病（ＡＥ）诊断中的价值。方法：用免疫印渍法检测３３例泡型包虫病、６９例囊型包虫病（ＣＥ）、３０例囊虫病和８２例健康人血清对泡型棘球蚴（Ｅｍ）和囊型棘球蚴（Ｅｇ）原头节１８ｋＤａ抗原的抗体反应。同时用羊包囊液抗原常规ＥＬＩＳＡ法检测上述血清。结果：ＥＬＩＳＡ试验，ＡＥ血清阳性率为９３．９％、ＣＥ为８５．５％、囊虫病为５０％、健康人为６．１％。显示３种患者血清存在较强的交叉反应。免疫印渍试验，两种原头节的１８ｋＤａ抗原对ＡＥ血清阳性反应均为９０．９％、ＣＥ分别为１０．１％和１３％、囊虫病患者为１３．３％和１６．７％。与健康人血清不发生反应。结论：１８ｋＤａ抗原可以有效的鉴别两型包虫病。


美洲钩虫及十二指肠钩虫细胞色素C氧化酶1基因测序

李铁华;詹斌;JohnMHawdon;龚昕;肖树华;单强;冯正PeterJHotez

1999, 17(2):  5-83. 

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　　目的：比较美洲钩虫及十二指肠钩虫线粒体细胞色素Ｃ氧化酶１（ＣＯ１）基因序列，确定两种钩虫间ＣＯ１基因差异。方法：现场采集钩虫成虫样本，蛋白酶Ｋ消化抽提线粒体基因组ＤＮＡ，ＰＣＲ方法扩增ＣＯ１基因，ＤＮＡ测序及分析。结果：ＰＣＲ扩增获得约７００ｂｐ美洲钩虫及十二指肠钩虫ＣＯ１基因片段，其序列比较显示两种钩虫ＣＯ１基因同源性达８９．７％，存在特定的核苷酸差异。结论：ＣＯ１基因可作为鉴别两种人体钩虫虫种标记性基因。


γ拟钉螺等位基因的研究

曾肖;陈翠娥;丁建祖

1999, 17(2):  6-86. 

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　　目的：探讨γ拟钉螺分类演化的遗传学基础。方法：用微量平面淀粉胶电泳法，检测浙江省开化及淳安县６个螺群宋氏γ拟钉螺和１个螺群中国γ拟钉螺的２４种等位基因酶谱。结果：共测得２９个位点，宋氏γ拟钉螺多态位点所占比例为６．９％－１３．８％；中国γ拟钉螺全部为单态位点。宋氏γ拟钉螺的种内Ｎｅｉ氏遗传距离（Ｎｅｉ＇ｓＤ）小于０．１２；但宋氏γ拟钉螺与中国γ拟钉螺两者种间Ｎｅｉ＇ｓＤ为０．７３。结论：在等位基因水平显示γ拟钉螺种内变异不明显，种间差异显著。


瑞香素的抗溶血和抗膜脂质过氧化作用

倪奕昌;徐月琴;王鸣杰;刘云光

1999, 17(2):  7-89. 

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　　目的：研究瑞香素的抗溶血与抗红细胞膜脂质过氧化作用。方法：用常规的溶血毒性体外检测法及高效液相层析定量测定脂质过氧化产物法，检测不同浓度瑞香素对伯氨喹（ＰＱ）溶血毒代谢产物５，６－二羟基８－氨基喹啉（ＡＱＤ）诱发溶血与红细胞膜脂质过氧化的抑制率。结果：１０至８０μｍｏｌ／Ｌ瑞香素对ＡＱＤ溶血毒性与红细胞膜脂质过氧化的抑制率分别为３３．０％－６９．２％和１１．９％－５８．２％，且呈一定的剂量－反应关系。结论：瑞香素具有抗溶血与抗红细胞膜脂质过氧化作用。


重组丝虫壳质酶及SXP-1抗原用作抗微丝蚴疫苗的研究

王世海;郑惠君;陶增厚;WillyF.Piessens

1999, 17(2):  8-94. 

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　　目的：测定重组马来丝虫壳质酶（ｒ－ｃｈｉｔｉｎａｓｅ）及其片段和ＳＸＰ－１抗原免疫接种沙鼠后是否具有抗马来丝虫微丝蚴（ｍｆ）血症的保护性免疫作用。方法：试验动物分别用壳质酶及其片段（Ｆ７Ｒ２，Ｆ８Ｒ２）和ＳＸＰ－１免疫。用酶联免疫吸附试验、ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印渍试验测定抗体水平及特异性抗体蛋白分子。用寄生虫学方法检测ｍｆ及成虫。结果：用重组马来丝虫壳质酶及其片段抗原免疫沙鼠，再以马来丝虫感染期幼虫（Ｌ３）攻击，可诱导其免疫系统产生抗ｍｆ的部分保护性免疫，但对成虫无作用。Ｌ３攻击后的沙鼠处于ｍｆ显性前期或显性期时，用重组抗原免疫则抗ｍｆ血症的保护性作用差或无作用。用ＳＸＰ－１抗原免疫沙鼠也能降低ｍｆ血症水平，并可减少成虫负荷。结论：重组丝虫壳质酶及其片段和ＳＸＰ－１抗原具有抗马来丝虫ｍｆ血症的保护性免疫作用。


亚洲无钩绦虫感染者在云南省首次发现

张莉莉;陶洪;张炳翔;王会珍;王云济;李增荣;杨继昆;杨炳新;李彦忠;庞颜坤;张皓明;李瑛;武樱

1999, 17(2):  9-96. 

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　　目的：对云南兰坪防治绦虫病试点进行病原学调查，查明流行虫种与流行环节。方法：对该地２例患者作驱绦虫治疗，获取成虫，洗净，取孕节直接灌喂本地圈养的健康断乳猪５头，并设健康断乳猪２头作对照，分别隔离饲养观察。２－３个月后，解剖观察各组织器官，查找囊尾蚴。另对该地放养的自然感染疫猪１头同法解剖观察。结果：驱出成虫４条，取头节和孕节观察，形态特征与牛带绦虫相似。取其孕节人工感染猪，于２头猪的肝脏、大网膜及肠系膜查见囊尾蚴２３个。自然感染猪１头，经解剖仅在肝脏及大网膜查见囊尾蚴３个。取囊尾蚴直接压片、染色、镜检，见成熟囊尾蚴原头节均有钩，具顶突及４个吸盘，与猪囊尾蚴相似。根据形态特征及囊尾蚴寄生部位鉴定为亚洲无钩绦虫。结论：亚洲无钩绦虫感染者在云南省首次发现。


日本血吸虫谷胱甘肽-S-转移酶基因和产毒大肠杆菌纤毛抗原基因的联合表达

张威;张景六;刘述先

1999, 17(2):  10-100. 

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　　目的：编码日本血吸虫２６ｋＤａＧＳＴ和产毒大肠杆菌纤毛抗原Ｋ９９基因的联合表达。方法：ＰＣＲ扩增的Ｋ９９基因克隆入ｐＵＣ１８载体，再将限制性酶切获得的ＧＳＴ基因克隆入ｐＵＣ１８－Ｋ９９重组质粒。限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳选择连接方向正确的重组质粒用于重组蛋白的表达。共表达产物采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ、反向ＩＨＡ、ＥＬＩＳＡ和透视电镜观察进行分析鉴定。结果：共表达产物的分子量约５０ｋＤａ，存在于宿主菌体表面的纤毛中，ＧＳＴ抗血清和Ｋ９９抗血清均可识别共表达产物，提示共表达产物既有ＧＳＴ表位，又有Ｋ９９抗原表位。结论：日本血吸虫２６ｋＤａＧＳＴ和产毒大肠杆菌Ｋ９９基因共表达获得成功。


抗微小隐孢子虫单克隆抗体免疫保护作用的研究

宗海红;李为明;张雪;俞树荣;白班俊

1999, 17(2):  11-105. 

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　　目的：探讨抗隐孢子虫单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的免疫保护作用。方法：在细胞培养的基础上进行体外中和试验，筛选具有保护作用的ＭｃＡｂ，并通过大鼠及ＭＤＣＫ细胞接种隐孢子虫子孢子（ＣＰＳ）进行动物实验和受染ＭＤＣＫ细胞透射电镜观察证实。结果：Ｚ３Ｄ２可显著降低ＣＰＳ在大鼠肠粘膜表面定植的隐孢子虫虫体及卵囊数。可使隐孢子虫各发育期的虫体减少，使ＭＤＣＫ细胞的超微结构受损减轻。结论∶ＭｃＡｂＺ３Ｄ２具有良好的保护作用。


IL-6对弓形虫增殖的影响

方艳秋;谭岩;张永生;李敬

1999, 17(2):  12-108. 

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　　目的：观察白细胞介素－６（ＩＬ－６）对弓形虫增殖的影响。方法：以Ｃ５７ＢＬ／６小鼠腹腔巨噬细胞为靶细胞，采用３Ｈ－尿嘧啶（３Ｈ－Ｕ）特异性标记的弓形虫在ＭΦ内的增殖实验。结果：单独应用ＩＬ－６处理ＭΦ，可以促进弓形虫在ＭΦ内的增殖，α肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）的影响不明显；而在ＩＬ－６逆转γ干扰素（ＩＦＮγ）诱导的ＭΦ抗弓形虫效应的实验中发现，加入抗ＴＮＦα抗体可增加ＩＬ－６对ＩＦＮγ诱导ＭΦ抗弓形虫效应的逆转作用。结论：体外应用ＩＬ－６可促进弓形虫在小鼠腹腔ＭΦ内的增殖作用，并能部分逆转ＩＦＮγ的抗弓形虫效应。


实验研究

疟疾复合PCR检测系统的建立

孙明林;薛采芳

1999, 17(2):  13-112. 

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　　目的：建立简易、快速的复合ＰＣＲ系统，用于检测间日疟、恶性疟及混合感染。方法：以疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因为靶片段，设计疟原虫属特异性上游引物Ｓ１和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物Ｓ２和Ｓ３，建立双温度点复合ＰＣＲ扩增系统并用于临床血样的检测。结果：从间日疟原虫和恶性疟原虫感染血样中分别扩增出７０５ｂｐ和５７５ｂｐ特定扩增带，而食蟹猴疟原虫、诺氏疟原虫及健康人血样均未见扩增带。检测原虫水平达２－１０虫／μｌ全血。限制性内切酶酶切分析证实扩增产物为目的片段。检测１０４份镜检确诊疟疾患者血样，其中８１份与镜检结果相符，并查出镜检未发现的１７份混合感染和２份虫种鉴别失误的恶性疟。结论：本系统敏感性高，特异性强，操作简便，可在一次扩增中同时检出间日疟和恶性疟两种原虫。


微小隐孢子虫DNA探针的制备

郭步平;张建斌;连德润

1999, 17(2):  14-114. 

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　　目的：制备一种高度特异敏感的隐孢子虫检测探针。方法：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增微小隐孢子虫的一段核苷酸片段，扩增产物４５２ｂｐＤＮＡ用半抗原地高辛标记制备成探针。结果：经敏感性试验，该探针可检测２ｐｇ水平的隐孢子虫ＤＮＡ。用该探针与隐孢子虫ＤＮＡ和溶组织内阿米巴、贾第虫、大肠杆菌及痢疾杆菌等相关生物的ＤＮＡ和隐孢子虫宿主的ＤＮＡ进行斑点杂交试验，该探针只与隐孢子虫ＤＮＡ杂交。结论：该探针具有高度特异性和较高敏感性。


微波辐射ELISA诊断日本血吸虫病的初步研究

顾启章;张宏莹;朱善济;徐文娟

1999, 17(2):  15-116. 

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　　目的：探索高效快速的血吸虫病诊断方法。方法：用微波辐射ＥＬＩＳＡ和快速ＥＬＩＳＡ同步检测各期日本血吸虫病患者血清１１８份，健康人血清６１份，并殖吸虫病犬血清１２份。结果：两种方法的血吸虫病患者血清抗体阳性检出率分别为８８．１％（１０４／１１８）和９１．５％（１０８／１１８），无显著性差异。健康人血清抗体假阳性分别为２份（３．３％）和１份（１．６％），亦无显著性差异；交叉反应均无假阳性。结论：微波辐射ＥＬＩＳＡ具有与快速ＥＬＩＳＡ类似的敏感性和特异性，但前者具有快速获得检测结果的优点。


弓形虫感染鼠血清中弓形虫循环抗原的检测

金武官;李云珠;俞善昌;杨惠珍;钱宗立

1999, 17(2):  16-118. 

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　　目的：探索弓形虫感染早期诊断方法。方法：用快速ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染鼠血清中弓形虫循环抗原。结果：在轻、中、重３个感染组，分别于感染后ｄ４、ｄ４及ｄ３检测到弓形虫循环抗原。结论：感染虫体数量越多则弓形虫循环抗原测出时间越早，ＯＤ值亦越高。检测弓形虫循环抗原具有早期诊断价值。


综述

抗隐孢子虫超免疫牛初乳研究进展

王建平综述徐臻荣付德润审校

1999, 17(2):  17-122. 

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论著摘要

湖北省庙河地区钉螺对日本血吸虫易感性的研究

石朝辉夏明仪邱持平朱雪花冯正GeorgeM.Davis

1999, 17(2):  17-123. 

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健康教育控制湖区小学生血吸虫感染的远期效果

胡广汉张绍基林丹丹杭春琴康增华吕尚标张晶张矩邱凌施乔发

1999, 17(2):  19-124. 

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简报

乳杆菌栓治疗滴虫性阴道炎的疗效

赵宇民杨哲

1999, 17(2):  20-69. 

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相关文章 | 计量指标

囊虫病1 0 0 例临床分析

田建立;王俊丽

1999, 17(2):  21-77. 

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相关文章 | 计量指标

以河滩为中心的牛群化疗加机耕控制感染性钉螺的观察

曾凡雄;丁长青;彭革华

1999, 17(2):  22-94. 

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相关文章 | 计量指标

甘露醇导泻对南瓜子和槟榔驱牛带绦虫的效果观察

孔凡布;张丹;李里

1999, 17(2):  23-105. 

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相关文章 | 计量指标

河滩野粪管理控制钉螺感染的研究

黄友阶

1999, 17(2):  24-112. 

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相关文章 | 计量指标

结合农业开发控制湖沼地区血吸虫病传播

王文梁;田祖洪;杨发良;柴光新;潘达中;蔡宗大;施昌夫;戴裕海

1999, 17(2):  25-126. 

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济南乡村儿童蛲虫感染调查

张西岩;朱福林;孙启燕;李继成;李自强;杨林;李文;赵小东;杨惠

1999, 17(2):  26-127. 

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相关文章 | 计量指标

博落回杀灭蝇蛆效果的实验观察

袁涛忠;张华生

1999, 17(2):  27-128. 

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病例报告

重度华支睾吸虫感染并发胆结石一例

边红放;张利永;向军;李玲芬;许亚辉;李勇;王敏华

1999, 17(2):  28-80. 

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相关文章 | 计量指标

心包包虫病一例

艾尔肯;田文庆;王冬霞

1999, 17(2):  29-89. 

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4例小儿旋毛虫病误诊原因分析

张岩

1999, 17(2):  30-122. 

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儿童脑囊虫病的诊断

窦桂林

1999, 17(2):  31-125. 

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