微小隐孢子虫DNA探针的制备

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 1999, Vol. 17 ›› Issue (2): 14-114.

微小隐孢子虫DNA探针的制备

郭步平¹,张建斌¹,连德润²

1　长治医学院寄生虫学教研室　长治0460002　中山医科大学寄生虫病研究所　广州510089

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:1999-04-30 发布日期:1999-04-30

PREPARATION OF DNA PROBE FOR CRYPTOSPORIDIUM PARVUM

GUO Buping ¹;ZHANG Jianbin¹;LIAN Derun ²

1 Department of parasitology;Changzhi Medical College;Changzhi 046000 2 Institute of parasitology;Sun Yat Sen University of Medical Sciences;Guangzhou 510089

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:1999-04-30 Published:1999-04-30

摘要/Abstract

摘要： 　　目的：制备一种高度特异敏感的隐孢子虫检测探针。方法：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增微小隐孢子虫的一段核苷酸片段，扩增产物４５２ｂｐＤＮＡ用半抗原地高辛标记制备成探针。结果：经敏感性试验，该探针可检测２ｐｇ水平的隐孢子虫ＤＮＡ。用该探针与隐孢子虫ＤＮＡ和溶组织内阿米巴、贾第虫、大肠杆菌及痢疾杆菌等相关生物的ＤＮＡ和隐孢子虫宿主的ＤＮＡ进行斑点杂交试验，该探针只与隐孢子虫ＤＮＡ杂交。结论：该探针具有高度特异性和较高敏感性。

关键词: 微小隐孢子虫, DNA探针, 杂交

Abstract: 　AIM: To prepare a probe with high specificity and sensitivity for the detection of Cryptosporidium parvum. METHODS: Using PCR method, a fragment from the DNA of C.parvum was amplified . The PCR product, 452 bp DNA, was labeled with hapten digoxigenin.RESULTS: Examination of sensitivity showed that the DNA probe could detect as low as 2 pg DNA from C.parvum. The dot blot hybridizition assay showed that the probe hybridized with the DNA of C.parvum, but not hybridized with DNA of E.histolytica, G.lamblia, E.coli and D.bacilli. CONCLUSION: The probe was highly specific and sensitive for the detection of C.parvum.

Key words: Cryptosporidium parvum, DNA probe, hybridization

郭步平;张建斌;连德润. 微小隐孢子虫DNA探针的制备[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 1999, 17(2): 14-114.

GUOBuping;ZHANGJianbin;LIANDerun . PREPARATION OF DNA PROBE FOR CRYPTOSPORIDIUM PARVUM[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 1999, 17(2): 14-114.

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