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2003年 第21卷 第5期    刊出日期：2003-10-30

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论著

日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3疫苗免疫保护性的观察

刘庆中;沈继龙

2003, 21(5):  1-260. 

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　　目的　研究日本血吸虫(中国大陆株)重组信号蛋白1433(rSj1433)作为血吸虫病疫苗分子的潜能,并探讨rSj1433、rSjGST两种重组蛋白作为疫苗的协同作用及结核杆菌低分子量耐热多肽(Mtb)激活的γδT细胞在抗血吸虫病中的作用。　方法　用SDSPAGE、电洗脱和透析的方法制备rSj1433和rSjGST抗原,将两种抗原(分别用福氏佐剂和Mtb为佐剂)分别免疫BALB/c小鼠后,进行尾蚴攻击感染实验。在攻击感染6wk后,剖杀小鼠计算各组的减虫率。　结果　各组的减虫率为rSj1433+福氏佐剂组32.20%,rSj1433+rSjGST+福氏佐剂组31.10%,rSj1433+Mtb佐剂组27.96%,rSj1433+rSjGST+Mtb佐剂组26.00%,rSjGST+Mtb佐剂组27.10%;各组的减卵率分别为(按以上组序)50.40%、53.30%、51.10%、58.60%和51.30%。　结论　rSj1433具有一定的抗血吸虫潜能,有可能成为抗日本血吸虫疫苗,但未见rSj1433和rSjGST的协同作用;Mtb激活扩增的γδT细胞在抗血吸虫免疫中的效果与福氏佐剂产生的免疫作用类似。


抗日本血吸虫噬菌体抗体库的筛选和阳性克隆的鉴定

陈代雄;俞慕华;雷智刚;郑斌;何蔼;张瑞琳;詹希美

2003, 21(5):  2-263. 

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　　目的　研制抗日本血吸虫循环抗原SjMAg的单链抗体。　方法　用日本血吸虫成虫代谢抗原SjMAg包板,对已构建的抗日本血吸虫噬菌体抗体库进行3轮富集,然后用ELISA法从富集的次级抗体库中筛选阳性克隆,最后借助ELISA、SDSPAGE和Western印迹等方法,根据阳性克隆表达产物与其它4种吸虫抗原反应的情况,进行特异性鉴定。　结果　从随机挑取的72个克隆中筛选到阳性克隆6个,经交叉筛选和鉴定最终获得特异性抗日本血吸虫阳性克隆2个。　结论　用固相富集和ELISA筛选法可以从抗体库中有效地筛选到抗日本血吸虫循环抗原的阳性克隆,获得的抗体克隆可用于抗日本血吸虫循环抗原单链抗体的制备。


核糖体蛋白S7在大劣按蚊抗疟原虫感染免疫研究中的内标作用

徐文岳;黄复生;段建华

2003, 21(5):  3-267. 

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　　目的　探讨核糖体蛋白S7(ribosomalprotein,rpS7)在大劣按蚊抗约氏疟原虫感染免疫中的作用。　方法　根据rpS7的保守mRNA序列设计简并引物,以大劣按蚊血细胞mRNA为模板,进行RTPCR扩增,克隆、并测定序列;RTPCR结合凝胶图像扫描比较、分析血餐后d1、d2、d3、d4、d7和d11,未吸鼠血组(N)、吸正常鼠血组(B)和吸感染约氏疟原虫鼠血组(I)大劣按蚊血细胞中rpS7的转录差异。　结果　成功克隆大劣按蚊rpS7部分cDNA序列(465bp),吸血和约氏疟原虫感染均未明显地影响大劣按蚊血细胞中rpS7的转录(P>0.05)。　结论　大劣按蚊血细胞rpS7可作为研究大劣按蚊抗约氏疟原虫感染免疫相关因子的内参照。


旋毛虫肌幼虫排泄分泌物中特异性诊断抗原的研究

崔晶;王中全;张灯

2003, 21(5):  4-271. 

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　　目的　寻找旋毛虫肌幼虫排泄分泌(ES)物中的特异性诊断抗原。　方法　应用SDSPAGE和Western印迹对旋毛虫肌幼虫体外培养18、30h后的ES抗原中的蛋白组分进行研究。　结果　旋毛虫肌幼虫培养18、30h后得到的ES抗原组分大致相同,两种ES抗原中主要蛋白带的分子量为112、110、108、97、53、49、45、42、35、23和16kDa。18hES抗原中的102、97、95和53kDa以及30hES抗原中的53、49、45和43kDa均与并殖吸虫病、华支睾吸虫病、日本血吸虫病及囊尾蚴病患者血清发生明显的交叉反应。ES抗原中的23kDa蛋白组分只与旋毛虫感染的大鼠、小鼠及患者血清反应,而不与上述其它寄生虫感染者、正常大鼠和小鼠及正常人血清发生交叉反应。　结论　旋毛虫肌幼虫ES抗原中的23kDa蛋白组分为旋毛虫肌幼虫的特异性抗原,可用于旋毛虫病的血清学诊断及血清流行病学调查。


约氏疟原虫与伯氏疟原虫侵入期抗原的初步研究

金立群;骆建民;傅玉才;许世锷;郭衍;谢霖崇;坪井敬文;鸟居本美

2003, 21(5):  5-274. 

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　　目的　用针对鼠约氏疟原虫(Plasmodiumyoelii)侵入期的8种单克隆抗体,对约氏疟原虫和伯氏疟原虫(P.berghei)侵入期即动合子、裂殖子和子孢子棒状体和表面抗原检测分析。　方法　间接免疫荧光实验(IFA)对各侵入期抗原进行亚细胞结构定位,SDSPAGE及Western印迹对两种鼠疟原虫的不同侵入期进行抗原组分分析。　结果　经上述两种方法检测发现,顶端复合体抗原成分复杂,约氏疟原虫和伯氏疟原虫的棒状体有共同的抗原表位,约氏疟原虫的动合子与其自身的裂殖子有类似成分,也有各自独特的抗原。两种鼠疟原虫动合子抗原有类似成分。约氏疟原虫的子孢子具有与裂殖子、动合子不同的抗原成分。　结论　疟原虫侵入期棒状体和表面抗原在同一虫种的不同侵入期和不同虫种中有共同的抗原表位,也有各自的独特组分。


用噬菌体十二肽库筛选日本血吸虫病诊断抗原

朱晓华;姜昌富;魏兰英;雷家慧;时红波;潘虹

2003, 21(5):  6-278. 

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　　目的　从噬菌体十二肽库中筛选出特异、灵敏的日本血吸虫病诊断抗原。　方法　以日本血吸虫急感患者血清免疫球蛋白(Ig)作为靶分子,免疫筛选噬菌体随机十二肽库。经过3轮吸附洗脱扩增的淘筛过程,随机挑取10个蓝色噬菌斑扩增,用ELISA检测其免疫活性,并通过对并殖吸虫病及旋毛虫病患者血清的检测分析其诊断日本血吸虫病的价值。　结果　6个克隆可以与日本血吸虫急感患者血清免疫球蛋白(Ig)特异结合。其中A492值最高的克隆(SjA1)具有较好的特异性和灵敏性。　结论　从噬菌体随机十二肽库中筛选到的克隆对日本血吸虫病具有较高的诊断价值。


弓形虫信号转导蛋白14-3-3基因的克隆与表达

都建;沈继龙;汪学龙;王维

2003, 21(5):  7-281. 

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　　目的　体外扩增弓形虫RH株信号转导蛋白1433(Toxo1433)基因编码序列,构建原核表达质粒,并表达Toxo1433。　方法　收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取RNA,在设计合成的引物中引入EcoRI和XhoI酶切位点。应用RTPCR扩增Toxo1433基因片段,插入原核表达质粒pET28a中,重组子双酶切、PCR和测序鉴定,转化大肠杆菌BL21并以异丙基βD硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。　结果　从弓形虫RH株RNA中扩增出803bp的Toxo1433基因片段,构建重组质粒pET28a/1433;IPTG诱导,SDSPAGE显示表达产物的大小约30.7kDa,Western印迹鉴定为Toxo1433。　结论　成功地从弓形虫RH株基因组DNA中获取了1433基因,构建了pET28a/Toxo1433重组质粒,并获得高效表达。


肝片吸虫组织蛋白酶L1基因cDNA序列的克隆与分析

张韧;李海云

2003, 21(5):  8-285. 

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　　目的　研制肝片吸虫的候选DNA疫苗。　方法　根据国际发表的相关序列设计引物,在引物端加酶切位点,应用RTPCR方法。　结果　成功地将肝片吸虫组织蛋白酶L1(FheCL1)基因cDNA序列克隆进真核表达载体pcDNA3.1中。对所克隆的FheCL1基因序列及其推导的氨基酸序列进行分析,发现其与已发表序列相比,核苷酸序列有4.3%的差异;推导的氨基酸序列有6.9%的差异。两者蛋白质二级结构主要有3个区域的区别,磷酸化位点有10个不同,但共有一由20个疏水氨基酸残基组成的保守区域。　结论　实验构建的pcDNA3.1FheCL1重组质粒是一种新型的抗肝片吸虫DNA疫苗候选重组质粒;肝片吸虫可能存在不同的亚种,两者的FheCL1基因编码的第1～20个氨基酸残基可能组成膜螺旋。


自愈水牛血清免疫筛选日本血吸虫cDNA文库

王文琴;刘述先;宋光承;徐裕信;曹建平;陈家旭

2003, 21(5):  9-288. 

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　　目的　采用自愈水牛血清免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库并寻找日本血吸虫疫苗新候选抗原。　方法　用感染日本血吸虫后的自愈水牛血清免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,将阳性重组子克隆、测序,对核酸序列进行分析,确定目的基因。　结果　从大陆株日本血吸虫成虫λZAPIIcDNA文库筛到26个阳性克隆,经初步鉴定获3种编码蛋白分子的基因:副肌球蛋白,谷胱甘肽S转移酶,羟基类固醇脱氢酶。　结论　感染日本血吸虫后的自愈水牛血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,可用于寻找日本血吸虫疫苗新候选抗原。


日本血吸虫尾蚴抗原免疫血清筛选成虫cDNA文库与新基因分析

袁仕善;易新元;曾宪芳;欧阳理;王敏;唐连飞;LarryMcReynolds

2003, 21(5):  10-292. 

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　　目的　筛选与日本血吸虫尾蚴抗原有共同免疫原性的日本血吸虫成虫抗原分子,为血吸虫病诊断和疫苗研究提供新的候选分子。　方法　利用日本血吸虫尾蚴可溶性抗原免疫兔血清筛选日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj)成虫cDNA文库,对阳性克隆的插入片段进行PCR扩增和序列分析。　结果　共筛选出13个阳性克隆,PCR扩增出特异的插入片段。测序分析获4个新基因SjCAI、SjCA、SjCAI2和SjCAI3(登录号分别为AF495883、AF515834、AY118086和AY129303),分别编码353、161、137和72个氨基酸的蛋白。SjCAI蛋白含6个DNA结合锌指,与原肠胚锌指蛋白XLCGF48.2有一定同源性;SjCA蛋白、SjCAI2蛋白和SjCAI3蛋白含N糖基化和磷酸化位点。　结论　筛选Sj成虫cDNA文库获得了新的基因序列。


斯氏按蚊血淋巴蛋白浓度的检测及其意义

杨松;黄复生;况明书;段建华;张敬如

2003, 21(5):  11-295. 

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　　目的　了解斯氏按蚊成蚊在不同食源条件下血淋巴蛋白浓度的变化。　方法　挤压法分别收集4组(吸蔗糖水组、吸正常血组、吸感染血组和吸硝喹组)斯氏按蚊成蚊血淋巴,采用Bradford法测定血淋巴蛋白浓度,并进行Excel自动分析。　结果　吸血感染约氏疟原虫8d后,吸感染血组血淋巴蛋白浓度高于吸蔗糖水组和吸正常血组,平均分别为4.436、3.080和3.092μg/μl,通常硝喹组浓度(2.264μg/μl)低于吸感染血组。　结论　吸硝喹组蚊体内血淋巴蛋白浓度下降,提示蚊血淋巴蛋白可能参与疟原虫卵囊的黑化包裹反应。


实验研究

外源性花生四烯酸在弓形虫入侵巨噬细胞中的信号作用

彭碧文;黄清玲;林建银;蒋明森

2003, 21(5):  12-299. 

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　　目的　探讨花生四烯酸在弓形虫侵染巨噬细胞中的信号作用。　方法　采用普通光镜、流式细胞仪检测巨噬细胞的感染率;Fura2/AM染色,荧光分光光度法测定游离钙离子浓度。　结果　宿主细胞内钙离子浓度及巨噬细胞感染率随着外源性花生四烯酸浓度的增加而升高,并呈剂量依赖性关系。细胞外的钙离子内流,细胞内储存的钙离子释放,包括胞膜钙离子通道均在花生四烯酸的作用下,参与了胞内钙离子的升高。钙离子通道阻断剂对花生四烯酸作用前后的感染率的影响不明显。　结论　花生四烯酸可能通过钙离子作用于宿主细胞,增高其感染率。


东方田鼠血清IgG抗体的快速纯化法

蒋守富;潘彩娥;何艳燕;朱民;李浩;石耀军;魏梅雄

2003, 21(5):  13-302. 

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　　目的　探索快速、高效纯化东方田鼠血清IgG抗体的方法。　方法　采用G蛋白或A蛋白亲和层析法,对3种东方田鼠血清IgG抗体进行纯化,比较抗体纯度和回收率。　结果　获得的IgG抗体纯度和回收率均以G蛋白亲和层析法为高。纯化的抗体活性高,与酶标二抗的吸附力分别为非IgG洗脱物的8.5倍和未纯化血清IgG的3.1倍。　结论　G蛋白亲和层析法纯化东方田鼠血清IgG快速、活性高,具有实用价值。


日本血吸虫幼虫在钉螺体内发育起点温度的研究

孙乐平;周晓农;洪青标;黄轶昕;杨国静;奚伟萍;姜玉骥

2003, 21(5):  14-306. 

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　　目的　研究环境温度对血吸虫幼虫在钉螺体内生长发育进程的影响程度。　方法　采集无血吸虫感染的钉螺,以钉螺与毛蚴1∶20比例感染,感染后置于30℃、27℃、24℃、21℃和18℃环境中饲养,计算钉螺体内血吸虫的尾蚴开放前期和发育速度,分析尾蚴开放前期和发育速度与环境温度间的相关关系。　结果　21℃、24℃、27℃、30℃时血吸虫的尾蚴平均开放前期分别为(128.89±16.05)d、(95.00±21.03)d、(71.93±12.74)d和(62.74±14.19)d。尾蚴开放前期与环境温度的回归方程为y=730.68x-0.8918(r=0.9976,P<0.01)。血吸虫发育速度与环境温度的回归方程为y=0.0235ln(x)-0.0639(r=0.9973,P<0.01)。从此方程中推算出日本血吸虫幼虫在钉螺体内的发育起点温度为15.17℃±0.43℃。　结论　环境温度降低,钉螺体内血吸虫幼虫发育速度减慢。


防治经验

肠道寄生虫感染干预策略和措施的评价

屠兴国;姚立农

2003, 21(5):  15-310. 

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　　目的　评价浙江省肠道寄生虫感染干预策略及各种干预措施的效果。　方法　以县为单位,随机抽样10个县30个村为调查点,调查各地的干预措施和干预前后寄生虫感染率,比较干预前后各相关干预措施对降低寄生虫总感染率的保护率(PR)、效果指数(IE)。　结果　实施干预后,除蛲虫感染率上升以外,其它各主要寄生虫感染率及寄生虫总感染率都有明显下降,总感染率由10年前的77.0%降至10年后的22.84%,总保护率为70.34%,总效果指数为3.37。各县分别统计,保护率均在45%以上,效果指数为1.85～14.47。开展改厕、发展经济、健康教育的干预效果依次排在前三位。　结论　结合社会经济发展,采取健康教育、环境改造和集体驱虫等措施,能有效控制寄生虫再感染。


调查报告

贵州都匀牛带绦虫亚洲亚种的调查和虫体内元素及氨基酸的检测

陈艳;包怀恩;李金福;郎书源;裘学丽;黄江;吴渊明;张朝云

2003, 21(5):  16-313. 

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　　目的　了解贵州省都匀市牛带绦虫病的流行因素及病原虫种,并对成虫体内氨基酸组分及元素进行检测。　方法　①对该市河阳乡的米秀村等6个村寨进行牛带绦虫病流行病学调查,对70名现症患者(男性67,女性3)的感染原因、临床症状进行了解分析并作驱虫治疗。②对驱出的成虫作形态学鉴定和测量。③采用氨基酸分析仪、原子吸收光谱仪及分子荧光仪等分别测定成虫体内游离氨基酸组分及各种元素的含量。　结果　①当地牛带绦虫感染主要是因群众喜吃生的或不熟的猪肝引起,患者的临床表现以排节片、肛门瘙痒、腹痛、腹泻等为主。70位有临床症状的成人中,有25人驱出成虫(男性24人,女性1人)。②成虫外形与牛带绦虫极其相似,头节上无顶突及小钩;但虫体较短,大小在0.61～2.58m之间,节片较薄而且数量少。③检测了成虫的16种氨基酸及12种元素。　结论　贵州省都匀有牛带绦虫病局部流行,患者的临床表现与传统的牛带绦虫病相似。根据感染原因和对虫体的测量结果,认为病原体应当是牛带绦虫亚洲亚种(Taeniasaginataasiatica)。


综述

甘肃省的白蛉区系

陈生邦;管立人;李凡;刘丕宗;冯宇;杨成明

2003, 21(5):  17-315. 

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近年福建省人体寄生虫病流行状况的变化

林金祥

2003, 21(5):  18-319. 

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论著摘要

驱虫治疗土源性线虫病效果观察

朱志航;应娇红;徐志强

2003, 21(5):  19-320. 

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简报

一种延长大劣按蚊虫卵保存时间的方法

李道

2003, 21(5):  20-278. 

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29例疟疾病人的外周血象及骨髓象分析

陈万新;樊丽华;刘军;胡间石

2003, 21(5):  21-292. 

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开封市初中生蠕形螨感染情况调查

刘英杰;刘艳红;刘云

2003, 21(5):  22-306. 

摘要 ( )   PDF (63KB) ( )  

相关文章 | 计量指标

淮南市区成蚊越冬场所调查

蔡茹;李朝品;湛孝冬

2003, 21(5):  23-310. 

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氯硝柳胺控释贴膜预防日本血吸虫感染的初步试验

严晓岚;杨明瑾;漏磊君;李思温;吴玲娟

2003, 21(5):  24-313. 

摘要 ( )   PDF (84KB) ( )  

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湖北省孝昌县1995～2002年疟疾流行病学简况

钟玉叶

2003, 21(5):  25-319. 

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病例报告

痰液中检出棘颚口线虫一例报告

李小敏;陈代雄

2003, 21(5):  26-260. 

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术后诊断脑囊尾蚴病一例

孙惠珍

2003, 21(5):  27-267. 

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粪类圆线虫病重度自身感染一例

欧阳录明;何汉江

2003, 21(5):  28-288. 

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肺型恶性疟合并戊型肝炎一例

王军;于红

2003, 21(5):  29-295. 

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短讯

新疆喀什地区再度流行内脏利什曼病

管立人;左新平;依马木

2003, 21(5):  30-285. 

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