中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2001, Vol. 19 ›› Issue (6): 2-329.
徐晓春;瞿逢伊;宋关鸿;徐建农
XU Xiao chun;QU Feng yi;SONG Guan hong;XU Jian nong
摘要: 目的 分离和识别蚊媒疟原虫感染相关基因并探讨其机制。方法 以斯氏按蚊 约氏疟原虫为实验模型 ,分别将刺叮约氏疟原虫感染鼠血和正常鼠血后 2 4h的饱血斯氏按蚊作为T组和D组 ,经抑制性差减杂交和选择性PCR扩增 ,建立一个T组表达特异增高基因的差减cDNA库。将此差减库分别与T组和D组的cDNAs混合探针作斑点杂交 ,筛选出差异表达基因 ,测定其序列并做基因库BLAST搜索。结果 T组相对于D组的差异表达基因得到有效富集 ,5 8个重组克隆中有 2 4个表达增高 ,阳性率为 4 1.4 %。所代表的 2 3个基因搜索结果显示 ,12个与功能已知的基因同源 ,4个与功能未知的基因同源 ,7个为新发现的基因 ;其中 9个与LPS诱导的冈比亚按蚊免疫反应性细胞系EST同源 ,占 39.1% (9/ 2 3)。结论 建立了蚊媒感染疟原虫早期 (2 4h)直接导致的全基因组应答性表达增高cDNA库 ,筛选结果显示蚊虫对疟原虫感染的反应涉及多种生化途径及机制 ,尤其与天然免疫系统和能量代谢关系密切