白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶基因片段克隆及鉴定

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2001, Vol. 19 ›› Issue (4): 5-212.

白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶基因片段克隆及鉴定

吴明玮;张玲敏;黄炯烈;周国理;吴瑜;赵双星

暨南大学医学院寄生虫学教研室!广州510632(吴明玮;张玲敏;赵双星);中山医科大学寄生虫学教研室!广州510089(黄炯烈;周国理;吴瑜)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2001-08-30 发布日期:2001-08-30

Aedes albopictus: Cloning and Identification of the Acetylcholinesterase Gene Fragment from the Mosquito

WU Ming-wei¹;ZHANG Ling-min¹;HUANG Jiong-lie²;ZHOU Guo-li²;WU Yu²;ZHAO Shuang-xing¹

1\ Department of Parasitology;Medical College;Jinan University;Guangzhou 510632; 2\ Department of Parasitology;Sun Yat-Sen University of Me

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2001-08-30 Published:2001-08-30

摘要/Abstract

摘要： 　　目的　从白纹伊蚊中分离、克隆及鉴定乙酰胆碱酯酶 (ACh E)基因片段。　方法　根据已知的果蝇和斯氏按蚊 ACh E氨基酸序列保守区域设计简并引物 ,对白纹伊蚊 ACh E基因片段进行扩增 ,将凝胶回收的 PCR产物经与 T-载体质粒连接进行 T/ A克隆 ,用α互补筛选法筛选重组质粒克隆 ,用碱裂解法提取重组质粒 DNA并对重组质粒进行酶切鉴定和 PCR鉴定。　结果与结论　获得与设计相符的白纹伊蚊 ACh E基因片段 PCR扩增产物并对其作出鉴定

关键词: 白纹伊蚊, 乙酰胆碱酯酶, 抗药性, 克隆

Abstract: 　Objective To isolate, clone and identify the acetylcholinesterase (AChE) fragment from the mosquito, Aedes albopictus, in relation to exploring mechanism of insecticide resistance. \ Methods\ The genome DNA extracted from the mosquito was used for degenerate polymerase chain reaction (PCR) and the two pairs of oligonucleotides encoding the highly conserved protein sequences were used as primers. The reaction products were cloned to T-vector and transfected into E.coli JM 109. The replicative form DNA of recombinant vector extracted from E.coli JM 109 through alkalilysis was identified by the methods of digestion with EcoRⅠand SalⅠ and PCR. \ Results\ The products of degenerate primers polymerase chain reaction were obtained and the identified clone belongs to the AChE fragment of the mosquito.\ Conclusion\ The clone was identified as the AChE fragment of Aedes albopictus.

Key words: Aedes albopictus, acetylcholinesterase, insecticide resistance, clone.

吴明玮;张玲敏;黄炯烈;周国理;吴瑜;赵双星. 白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶基因片段克隆及鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2001, 19(4): 5-212.

WUMing-wei;ZHANGLing-min;HUANGJiong-lie;ZHOUGuo-li;WUYu;ZHAOShuang-xing. Aedes albopictus: Cloning and Identification of the Acetylcholinesterase Gene Fragment from the Mosquito[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2001, 19(4): 5-212.

[1]	师伟芳, 田珍灶, 周敬祝, 黄学平, 周雪梅, 吴国艳, 李琼, 廖启浪, 王丹. 2018—2020年贵州省中华按蚊抗药性调查研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(1): 108-111.
[2]	贺志权, 胡亚博, 王丹, 张红卫, 刘颖, 杨成运, 钱丹, 纪鹏慧, 蒋甜甜, 鲁德领. 河南省部分地区中华按蚊对杀虫剂抗药性的监测[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(1): 117-120.
[3]	邹伟浩, 吴蔚玲, 廖远鹏, 陈敏, 彭鸿娟. 刚地弓形虫抗缓殖子期抗原1单克隆抗体的制备与应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 587-593.
[4]	王冠熙, 李雅姝, 李月月, 曹园园, 杨蒙蒙, 张梅花, 吴竞瑶, 梁成, 李菊林, 周华云, 唐建霞, 朱国鼎. 江苏省白纹伊蚊对溴氰菊酯抗性及击倒抗性突变分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(4): 468-474.
[5]	李润花, 关丽, 殷国荣. 刚地弓形虫滑行相关蛋白45的克隆、表达与免疫反应性检测[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(5): 563-567.
[6]	杨瑞, 熊乙丁, 郭珊珊, 廖业, 夏嫱, 郭锦锦, 杜联峰. 前纤维蛋白多克隆抗体对刚地弓形虫在小鼠胚胎成纤维细胞中增殖的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(4): 437-443.
[7]	赵正虎, 钱胜南, 万静宜, 唐子茹, 沈双. 刚地弓形虫磷酸丙糖异构酶多克隆抗体的制备及鉴定分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(3): 311-316.
[8]	袁义雪, 郑国侠, 王丹丹, 专行, 杜萌, 王云华. 蓝氏贾第鞭毛虫核苷二磷酸激酶基因的克隆与表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(2): 190-193.
[9]	袁义雪1，郑国侠2，王丹丹1，专行1，杜萌1，王云华1*. 蓝氏贾第鞭毛虫核苷二磷酸激酶基因的克隆与表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(2): 190-192.
[10]	刘秀凤, 孙嘉慧, 徐斌, 陈军虎, 胡薇. 田鼠巴贝虫候选诊断抗原的表达和评价[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(6): 549-553.
[11]	杨慧, 赵殷奇, 李子华, 赵嘉庆, 王浩, 王娅娜, 朱明星, 赵巍. 细粒棘球绦虫原头节抗原分子Eg-08002的克隆、表达及免疫反应性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(6): 559-562.
[12]	辛奇, 景涛*, 宋晓霞, 高海军, 孙旭东, 吕薇, Nabil Pervaiz, 鲁俊. 细粒棘球绦虫转醛醇酶基因的克隆、表达及其潜在免疫诊断价值的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(4): 5-333-341.
[13]	王楠1, 滕飞翔1, 俞黎黎1, 杨李1, 张承伯1, 周鹰1,2, 崔玉宝1,2*. 粉尘螨变应原Der f 8全长基因克隆及表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(4): 8-351-356.
[14]	张浩1*, 马文静2, 何韶衡3. 德国小蠊变应原Bla g 2单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(4): 10-362-365.
[15]	章乐生, 孙磊, 胡媛, 巩文词, 王燕娟, 沈玉娟, 徐馀信, 汪天平, 曹建平. 蓝氏贾第鞭毛虫单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(2): 160-163.