旋毛虫pcDNA3.1/Ts87重组质粒的构建和表达

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2003, Vol. 21 ›› Issue (2): 9-95.

旋毛虫pcDNA3.1/Ts87重组质粒的构建和表达

杨雅平¹,诸欣平^1*,杨静¹,张路平²,徐旭娜²,黄松¹,Pascal Boireau³

1 首都医科大学寄生虫学教研室,北京 100054 2 河北师范大学生命科学学院,石家庄 050016 3 法国食品安全局

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2003-04-30 发布日期:2003-04-30

Construction and Expression of the Recombinant Plasmid pcDNA3.1/Ts87 of Trichinella spiralis

YANG Ya-ping¹,ZHU Xin-ping^1*,YANG Jing¹,ZHANG Lu-ping²,XU Xu-na²,HUANG Song¹,Pascal Boireau³

1 Department of Parasitology,Capital University of Medical Sciences,Beijing 100054 2 College of Life Science of Hebei Normal University,Shijiazhuang 050016 3 UMR BIPAR INRA AFSSA ENVA UPVM,Maisons Alfort,France

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2003-04-30 Published:2003-04-30

摘要/Abstract

摘要： 　　目的构建和表达旋毛虫重组质粒。方法PCR法在旋毛虫抗原基因Ts87两端加上合适的酶切位点和KOZAK序列,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1/Ts87重组质粒。采用Lipofectamine介导的细胞外源DNA转染法,把重组质粒导入COS7细胞。分别用肌肉注射和基因枪免疫小鼠。结果和结论成功构建pcD-NA3.1/Ts87重组质粒,并在COS7细胞和BALB/c小鼠体内表达。

关键词: 旋毛虫, DNA质粒, 基因枪, 构建, 表达

Abstract: 　Objective To construct and express DNA plasmid of Trichinella spiralis. Methods The BamHI and Hindlll enzyme sites and KOZAK sequences were introduced at both ends of Ts87 gene by PCR. Ts87 gene was ligated into pcDNAS. 1( + ) vector with T4 ligase. The recombinant plasmid pcDNAS. 1/Ts87 and plasmid pcDNAS. 1 were transfected into an eukaryotic cell line GOS7 through Lipofectamine, respectively. The BALB/c mice were immunized with the purified plasmid DNA pcDNAS. 1/Ts87 through two routes: intramuscular injection and gene-gun injection. Results and Conclusion The pcDNAS. 1/Ts87 was expressed both in COS7 and in the BALB/c mice.

Key words: Trichinella spiralis, DNA plasmid, gene-gun, construction, expression

杨雅平;诸欣平;杨静;张路平;徐旭娜;黄松;PascalBoireau. 旋毛虫pcDNA3.1/Ts87重组质粒的构建和表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2003, 21(2): 9-95.

YANGYa-ping;ZHUXin-ping*;YANGJing;ZHANGLu-ping;XUXu-na;HUANGSong;PascalBoireau. Construction and Expression of the Recombinant Plasmid pcDNA3.1/Ts87 of Trichinella spiralis[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2003, 21(2): 9-95.

[1]	王之谦, 王敬文, 宋秀梅. 斯氏按蚊肽聚糖识别蛋白S2调节共生菌稳态的功能分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(4): 397-403.
[2]	张旭, 孙希萌. 旋毛虫感染免疫逃逸机制研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(4): 492-496.
[3]	芦星, 王水怡, 陈林军, 刘明明, 刘雨桐, 朱慧茹, 姜冰冰, 杜少磊, 巴音查汗, 刘丹丹, 张伟. 马泰勒虫棒状体颈部蛋白5基因的克隆与原核表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(4): 497-501.
[4]	郝会囡, 程永康, 张茹, 韩璐璐, 宋艳艳, 龙绍蓉, 刘若丹, 张玺, 王中全, 崔晶. 旋毛虫新生幼虫可溶性抗原的免疫蛋白组学分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(2): 176-182.
[5]	侯昕伶, 李德伟, 施阳, 王茂林, 孜比姑·肉素, 阿比旦·艾尼瓦尔, 郑旭然, 康雪娇, 王慧, 李静, 张传山. 多房棘球蚴感染小鼠腹腔ST2⁺ T细胞亚群功能及其免疫检查点分子表达变化[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(6): 708-716.
[6]	邹伟浩, 吴蔚玲, 廖远鹏, 陈敏, 彭鸿娟. 刚地弓形虫抗缓殖子期抗原1单克隆抗体的制备与应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 587-593.
[7]	曹天行, 刘军龙, 张志刚, 史康妍, 石苗, 关贵全, 李有全, 殷宏, 罗建勋. 环形泰勒虫重组TA04380蛋白的原核表达及ELISA的建立[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(3): 362-368.
[8]	张雅兰, 蒋甜甜, 贺志权, 邓艳, 陈伟奇, 朱岩昆, 张红卫, 赵东阳. 小鼠感染肝毛细线虫肝脏microRNA的差异表达分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(1): 56-60.
[9]	石明丽, 肖波, 江陆斌. 恶性疟原虫var基因的表达调控机制研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(6): 719-724.
[10]	蔡子涵, 曹颖, 朱逢龙, 李倩, 和艳红, 杨毅梅. 纳米金棒标记技术应用于旋毛虫感染诊断的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(5): 652-658.
[11]	苏雅静, 乔霞, 汪澎涛, 康宇婷, 杨宁爱, 贾伟, 赵志军. 弓形虫毒力相关效应分子ROP16Ⅲ诱导人肺腺癌A549细胞的基因表达谱[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(4): 473-480.
[12]	王龙江, 李瑾, 尹昆, 徐超, 刘功振, 黄炳成, 魏庆宽, 孙慧. 刚地弓形虫入侵人包皮成纤维细胞前后转录组差异分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(4): 480-486.
[13]	周岩, 陈韶红, 李浩, 程娜, 洪加林, 许学年. 卫氏并殖吸虫TPx基因的克隆、表达和免疫学诊断价值[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(1): 20-26.
[14]	朱吉海, 曹得萍, 赵珺, 刘珺, 史虎祥, 刘燕. 多房棘球蚴病患者肝病灶组织差异表达基因的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(1): 48-54.
[15]	范俊杰, 韩秀敏, Nur Fazleen Binti Idris, 李锴, 谭青青, 曹纹侨, 李想, 廖鹏, 叶彬. 细粒棘球绦虫蛋白激酶A的生物信息学特征及免疫反应性[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(6): 682-687.