中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 1996, Vol. 14 ›› Issue (2): 119-123.

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粉尘螨Derf4变应原的提纯及其淀粉酶活性分析

谢建云,温廷桓   

  1. 上海医科大学医学螨类研究室
  • 出版日期:1996-05-31 发布日期:2017-01-02
  • 基金资助:
    国家自然科学基金

  • Online:1996-05-31 Published:2017-01-02

摘要: 目的:采用上海医科大学(SMU)医学螨类研究室培养的粉尘螨(Dermatophagoidesfarinae)提纯粉尘螨4类变应原(Derf4),并对其作淀粉酶活性分析。方法:首次运用20%-50%饱和硫酸铵分级沉淀、SephadexG-150与G-50凝胶层析、聚丙烯酰胺凝胶制备电泳(PAGE)等方法相结合,系列分离纯化粉尘螨代谢培养基(Df)中的Derf4。提纯过程中每步都作蛋白质含量测定,并作淀粉酶活性分析。对纯化的Derf4进行理化性质的鉴定。结果:(1)从Df经系列分离纯化粉尘螨代谢培养基获得SMU-Derf4,最终得率为0.98%;(2)淀粉酶的比活性从0.09U/mg增加至4.61U/mg,淀粉酶的纯化倍数为51.2倍,得率为43.1%;(3)在SDS-PAGE电泳上只显示一条蛋白质条带,分子量MW58kDa;(4)在等电聚焦电泳(IEF)上显示多个蛋白质条带,呈异质性,等电点pI5.18—7.20。结论:SMU-Derf4有淀粉酶活性,其理化性状符合Derf4的特性。改用分离一般蛋白质常用的方法提取Derf4得率较国外报道的糖原-淀粉酶乙醇沉淀法为高。

关键词: 粉尘螨, 变应原, Derf, 提纯, 淀粉酶活性

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