白纹伊蚊唾液腺黏蛋白相关蛋白基因1的克隆、表达分析

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2013, Vol. 31 ›› Issue (2): 8-120-123.

白纹伊蚊唾液腺黏蛋白相关蛋白基因1的克隆、表达分析

刘鉴1，程金芝1，孙宇2，朱儒芳3，张亮4，吴家红1 *

1 贵阳医学院寄生虫学教研室，贵阳 550004；2 贵阳医学院附属医院，贵阳 550004；3 贵阳市第二中学，贵阳 550002；4 湖北医药学院，十堰 442000

出版日期:2013-04-30 发布日期:2013-07-02

Cloning and Expression of the Mucin-Related Protein1（Aamucin1）from Salivary Gland of Aedes albopictus

LIU Jian1，CHENG Jin-zhi1，SUN Yu2，ZHU Ru-fang3，ZHANG Liang4，WU Jia-hong1 *

1 Department of Parasitology，Guiyang Medical College，Guiyang 550004，China；2 Hospital Affiliated to Guiyang Medical College，Guiyang 550004，China；3 The Second Middle School of Guiyang，Guiyang 550002，China；4 Hubei College of Medicine，Hubei 442000，China

Online:2013-04-30 Published:2013-07-02

摘要/Abstract

摘要： 目的克隆白纹伊蚊唾液腺黏蛋白相关蛋白基因1（Aamucin1）的全长cDNA序列，并分析白纹伊蚊吸血前后基因表达的差异。方法根据白纹伊蚊罗马株Aamucin1基因序列（GenBank序列号为AY826068）设计特异引物，提取白纹伊蚊广州株唾液腺总RNA，PCR扩增Aamucin1全长基因序列，并进行生物信息学分析。实时荧光定量RT-PCR分析白纹伊蚊吸血前后Aamucin1基因表达差异。结果成功克隆白纹伊蚊广州株基因，并获得全长为849 bp的基因序列，编码283个氨基酸。白纹伊蚊广州株与罗马株Aamucin1基因序列比对在C端少了13个氨基酸。与罗马伊蚊同源序列的一致性为58%；该基因具有1个可变剪接子；Protscan分析示有苏氨酸丰富区，可变剪接子恰位于此区；饱血零时（吸血2 h，腹部饱胀者，为BSG_0组），Aamucin1基因表达显著下调，是吸血前（SG组）的0.39倍（P<0.01）；饱血24 h（饱血后24 h，为BSG_24组），Aamucin1基因表达较饱血零时有回升，是吸血前（SG组）的0.61倍（P>0.05）。结论获得白纹伊蚊广州株Aamucin1基因全长序列，并证实其在mRNA水平受到吸血调控。

关键词: 白纹伊蚊, 黏蛋白相关蛋白, 克隆, 表达

Abstract: Objective To clone the mucin-related protein（Aamucin1）gene from salivary gland of Aedes albopictus Guangzhou isolate, and analyze the expression difference due to blood-feeding. Methods Total RNA was extracted from the salivary gland. The coding region of Aamucin1 was amplified with a pair of specific primers by RT-PCR. The product was sequenced and analyzed by bioinformatics. Expression analysis was conducted by real-time RT-PCR. Results The product of RT-PCR was 849 bp with encoding 283 amino acids. To compare with that from Ae. albopictus Rome strain, 13 amino acids were deleted at the C end, and Aamucin1 in Guangzhou isolate shared 58% identity in amino acids with that of Rome isolate. In addition, an alternative splicing was found in Aamucin1 and located in a proline enrich area by Protscan. To compare with that of non-blood-feeding（group SG）， Aamucin1 was significantly down-regulated with 0.39 fold expression at zero time after engorged (group BSG_0, mosquitoes with abdominal distention from the first 2 hours after blood-feeding, P<0.01） and 0.61 fold expression at the 24th hour after engorged(group BSG_24，mosquitoes from the 24th hours after blood-feeding, P>005）. Conclusion The full length of Aamucin1 gene of Ae. albopictus is cloned and it can be modulated by blood-feeding.

Key words: Aedes albopictus, Mucin-like protein, Cloning, Expression

刘鉴1，程金芝1，孙宇2，朱儒芳3，张亮4，吴家红1 *. 白纹伊蚊唾液腺黏蛋白相关蛋白基因1的克隆、表达分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2013, 31(2): 8-120-123.

LIU Jian1，CHENG Jin-zhi1，SUN Yu2，ZHU Ru-fang3，ZHANG Liang4，WU Jia-hong1 *. Cloning and Expression of the Mucin-Related Protein1（Aamucin1）from Salivary Gland of Aedes albopictus[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2013, 31(2): 8-120-123.

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