白纹伊蚊唾液腺黏蛋白相关蛋白基因1的克隆、表达分析

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2013, Vol. 31 ›› Issue (2): 8-120-123.

白纹伊蚊唾液腺黏蛋白相关蛋白基因1的克隆、表达分析

刘鉴1，程金芝1，孙宇2，朱儒芳3，张亮4，吴家红1 *

1 贵阳医学院寄生虫学教研室，贵阳 550004；2 贵阳医学院附属医院，贵阳 550004；3 贵阳市第二中学，贵阳 550002；4 湖北医药学院，十堰 442000

出版日期:2013-04-30 发布日期:2013-07-02

Cloning and Expression of the Mucin-Related Protein1（Aamucin1）from Salivary Gland of Aedes albopictus

LIU Jian1，CHENG Jin-zhi1，SUN Yu2，ZHU Ru-fang3，ZHANG Liang4，WU Jia-hong1 *

1 Department of Parasitology，Guiyang Medical College，Guiyang 550004，China；2 Hospital Affiliated to Guiyang Medical College，Guiyang 550004，China；3 The Second Middle School of Guiyang，Guiyang 550002，China；4 Hubei College of Medicine，Hubei 442000，China

Online:2013-04-30 Published:2013-07-02

摘要/Abstract

摘要： 目的克隆白纹伊蚊唾液腺黏蛋白相关蛋白基因1（Aamucin1）的全长cDNA序列，并分析白纹伊蚊吸血前后基因表达的差异。方法根据白纹伊蚊罗马株Aamucin1基因序列（GenBank序列号为AY826068）设计特异引物，提取白纹伊蚊广州株唾液腺总RNA，PCR扩增Aamucin1全长基因序列，并进行生物信息学分析。实时荧光定量RT-PCR分析白纹伊蚊吸血前后Aamucin1基因表达差异。结果成功克隆白纹伊蚊广州株基因，并获得全长为849 bp的基因序列，编码283个氨基酸。白纹伊蚊广州株与罗马株Aamucin1基因序列比对在C端少了13个氨基酸。与罗马伊蚊同源序列的一致性为58%；该基因具有1个可变剪接子；Protscan分析示有苏氨酸丰富区，可变剪接子恰位于此区；饱血零时（吸血2 h，腹部饱胀者，为BSG_0组），Aamucin1基因表达显著下调，是吸血前（SG组）的0.39倍（P<0.01）；饱血24 h（饱血后24 h，为BSG_24组），Aamucin1基因表达较饱血零时有回升，是吸血前（SG组）的0.61倍（P>0.05）。结论获得白纹伊蚊广州株Aamucin1基因全长序列，并证实其在mRNA水平受到吸血调控。

关键词: 白纹伊蚊, 黏蛋白相关蛋白, 克隆, 表达

Abstract: Objective To clone the mucin-related protein（Aamucin1）gene from salivary gland of Aedes albopictus Guangzhou isolate, and analyze the expression difference due to blood-feeding. Methods Total RNA was extracted from the salivary gland. The coding region of Aamucin1 was amplified with a pair of specific primers by RT-PCR. The product was sequenced and analyzed by bioinformatics. Expression analysis was conducted by real-time RT-PCR. Results The product of RT-PCR was 849 bp with encoding 283 amino acids. To compare with that from Ae. albopictus Rome strain, 13 amino acids were deleted at the C end, and Aamucin1 in Guangzhou isolate shared 58% identity in amino acids with that of Rome isolate. In addition, an alternative splicing was found in Aamucin1 and located in a proline enrich area by Protscan. To compare with that of non-blood-feeding（group SG）， Aamucin1 was significantly down-regulated with 0.39 fold expression at zero time after engorged (group BSG_0, mosquitoes with abdominal distention from the first 2 hours after blood-feeding, P<0.01） and 0.61 fold expression at the 24th hour after engorged(group BSG_24，mosquitoes from the 24th hours after blood-feeding, P>005）. Conclusion The full length of Aamucin1 gene of Ae. albopictus is cloned and it can be modulated by blood-feeding.

Key words: Aedes albopictus, Mucin-like protein, Cloning, Expression

刘鉴1，程金芝1，孙宇2，朱儒芳3，张亮4，吴家红1 *. 白纹伊蚊唾液腺黏蛋白相关蛋白基因1的克隆、表达分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2013, 31(2): 8-120-123.

LIU Jian1，CHENG Jin-zhi1，SUN Yu2，ZHU Ru-fang3，ZHANG Liang4，WU Jia-hong1 *. Cloning and Expression of the Mucin-Related Protein1（Aamucin1）from Salivary Gland of Aedes albopictus[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2013, 31(2): 8-120-123.

[1]	王之谦, 王敬文, 宋秀梅. 斯氏按蚊肽聚糖识别蛋白S2调节共生菌稳态的功能分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(4): 397-403.
[2]	芦星, 王水怡, 陈林军, 刘明明, 刘雨桐, 朱慧茹, 姜冰冰, 杜少磊, 巴音查汗, 刘丹丹, 张伟. 马泰勒虫棒状体颈部蛋白5基因的克隆与原核表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(4): 497-501.
[3]	侯昕伶, 李德伟, 施阳, 王茂林, 孜比姑·肉素, 阿比旦·艾尼瓦尔, 郑旭然, 康雪娇, 王慧, 李静, 张传山. 多房棘球蚴感染小鼠腹腔ST2⁺ T细胞亚群功能及其免疫检查点分子表达变化[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(6): 708-716.
[4]	邹伟浩, 吴蔚玲, 廖远鹏, 陈敏, 彭鸿娟. 刚地弓形虫抗缓殖子期抗原1单克隆抗体的制备与应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 587-593.
[5]	王冠熙, 李雅姝, 李月月, 曹园园, 杨蒙蒙, 张梅花, 吴竞瑶, 梁成, 李菊林, 周华云, 唐建霞, 朱国鼎. 江苏省白纹伊蚊对溴氰菊酯抗性及击倒抗性突变分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(4): 468-474.
[6]	曹天行, 刘军龙, 张志刚, 史康妍, 石苗, 关贵全, 李有全, 殷宏, 罗建勋. 环形泰勒虫重组TA04380蛋白的原核表达及ELISA的建立[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(3): 362-368.
[7]	张雅兰, 蒋甜甜, 贺志权, 邓艳, 陈伟奇, 朱岩昆, 张红卫, 赵东阳. 小鼠感染肝毛细线虫肝脏microRNA的差异表达分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(1): 56-60.
[8]	石明丽, 肖波, 江陆斌. 恶性疟原虫var基因的表达调控机制研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(6): 719-724.
[9]	苏雅静, 乔霞, 汪澎涛, 康宇婷, 杨宁爱, 贾伟, 赵志军. 弓形虫毒力相关效应分子ROP16Ⅲ诱导人肺腺癌A549细胞的基因表达谱[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(4): 473-480.
[10]	王龙江, 李瑾, 尹昆, 徐超, 刘功振, 黄炳成, 魏庆宽, 孙慧. 刚地弓形虫入侵人包皮成纤维细胞前后转录组差异分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(4): 480-486.
[11]	周岩, 陈韶红, 李浩, 程娜, 洪加林, 许学年. 卫氏并殖吸虫TPx基因的克隆、表达和免疫学诊断价值[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(1): 20-26.
[12]	朱吉海, 曹得萍, 赵珺, 刘珺, 史虎祥, 刘燕. 多房棘球蚴病患者肝病灶组织差异表达基因的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(1): 48-54.
[13]	范俊杰, 韩秀敏, Nur Fazleen Binti Idris, 李锴, 谭青青, 曹纹侨, 李想, 廖鹏, 叶彬. 细粒棘球绦虫蛋白激酶A的生物信息学特征及免疫反应性[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(6): 682-687.
[14]	郭楚桐, 欧阳春艳, 何俊贤, 季树宇, 杨礼腾, 刘晓宇. 屋尘螨第十类变应原的克隆、表达、纯化及免疫原性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(6): 723-729.
[15]	郑文琪, 冯学敏, 曹雅明, 韩艳秋, 王俊瑞. 伯氏疟原虫静息巯基氧化酶的生物信息学分析和体外酶活检测[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(2): 159-165.