中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2009, Vol. 27 ›› Issue (2): 3-110.
吕国栋，刘涛，林仁勇，王星，王俊华，任智慧，温浩，卢晓梅*
LV Guo-dong，LIU Tao，LIN Ren-yong，WANG Xing，WANG Jun-hua，
REN Zhi-hui，WEN Hao，LU Xiao-mei *
摘要： 目的 利用基因工程方法表达细粒棘球绦虫抗原B重组蛋白（rAgB），并分析其免疫反应性。 方法 将rAgB基因片段插入原核表达载体pET41a（+）中，转化大肠埃希菌BL21（DE3）菌株，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达，获得重组蛋白rAgB-GST。用谷胱甘肽琼脂糖树脂亲和层析柱（GST-sepharose 4B）纯化，经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析重组蛋白的表达情况。用蛋白质印迹（Western blotting）分析其免疫反应性，并用免疫胶体金包虫诊断试剂盒作为对照。 结果 PCR、双酶切及DNA测序结果均显示重组质粒pET41a-rAgB构建成功。SDS-PAGE结果表明，重组蛋白rAgB-GST的相对分子质量（Mr）为40 800，纯化蛋白含量为78.4%。Western blotting分析结果显示，重组蛋白rAgB-GST检测细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者血清的阳性率分别为79.2%（95/120）和51.1%（23/45），但与卫氏并殖吸虫病患者、华支睾吸虫病患者血清以及健康人血清反应均为阴性。rAgB-GST的敏感性和特异性分别为79.2％（95/120）和81.0%（98/121），均略高于免疫胶体金棘球蚴病诊断试剂盒的敏感性(72.8%，75/103）和特异性（76.9%，30/39）。 结论 重组rAgB-GST蛋白可被细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者血清识别，有较好的免疫反应性。
