中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2008, Vol. 26 ›› Issue (3): 9-202.
李雅杰*, 滕美君, 伦永志, 李达, 张永轻
LI Ya-jie*, TENG Mei-jun, LUN Yong-zhi, LI Da, ZHANG Yong-qing
摘要: 目的 克隆并测定中国人源蓝氏贾第鞭毛虫滋养体SUCH/89/BTMRI/2(C2)的表面变异抗原基因序列。方法 提取蓝氏贾第鞭毛虫基因组DNA,PCR扩增表面变异抗原基因片段。将PCR产物连接到pMD19-T载体,并转化至大肠埃希菌JM109中进行序列测定。通过NTI9.0 软件对该基因的核苷酸和氨基酸序列进行分析,同时与基因库中已发表的蓝氏贾第鞭毛虫表面变异抗原基因进行同源序列比对。 结果 中国人源蓝氏贾第鞭毛虫基因全长为2 142 bp,编码1条长为713 个氨基酸残基的多肽链,含有一个简单的开放阅读框(ORF)。这一推测的多肽链序列富含半胱氨酸(11.8 mol%),且以 CXXC 模基序重复出现29次、GGCY四肽模基序出现1次及NXS重复3次在N端连接糖基化位点中。此外,这条多肽链还富含苏氨酸(10.2 mol%)、甘氨酸(12.1 mol%)和丙氨酸(10.1 mol%)。同其他已确定的表面变异抗原(VSPs)一样,中国人源蓝氏贾第鞭毛虫SUCH/89/BTMRI/2(C2)株的表面变异抗原也含有高度保守的疏水性C末端。该表面变异抗原基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列同GenBank中Gillin发表的TSA417序列的同源性均高达99%。 结论 中国人源蓝氏贾第鞭毛虫滋养体表达的表面变异抗原基因具有与已鉴定的蓝氏贾第鞭毛虫表面变异抗原基因同样的特性。