中国寄生虫学与寄生虫病杂志

钱旻;白艳军;章平;严自助;吴自荣

2002, 20(1): 1-5.

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　　目的　通过噬菌体肽文库技术探索可用于诊断日本血吸虫病的模拟虫卵抗原。　方法　用日本血吸虫虫卵单克隆抗体 6 B12作“诱饵”,采用生物淘金法从噬菌体 15 -肽文库中经过 3轮筛选 ,有效地富集与 6 B12有亲和力的噬菌体肽克隆。随后采用 EL ISA、竞争 EL ISA、Western blotting等检测方法 ,从 4 0 0个单克隆化的噬菌体株中得到 13株与 6 B12有特异性、高亲和力反应的噬菌体克隆。　结果　对噬菌体所携带的外源 DNA片段序列测序结果表明 ,13株噬菌体所携带的外源多肽序列完全相同。该噬菌体多肽抗原包被酶标板经 EL ISA方法对血吸虫病患者及健康人血清Ig G抗体检测结果表明 ,两者有显著性差异。　结论　噬菌体多肽模拟抗原有可能替代天然抗原用于血吸虫病诊断

安徽、江西及江苏3省血吸虫病患者与钉螺分布的空间自相关分析

杨国静;周晓农;汪天平;林丹丹;洪青标;孙乐平

2002, 20(1): 2-9.

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　　目的　通过地理信息系统 (GIS)分析江苏、安徽、江西 3省血吸虫病疫情空间分布规律。　方法　收集 3省近 2 0年的血吸虫病流行病学数据 ,建立 GIS空间数据库。在 Arc View3.x,S- PL U S及 Spatial Statistics软件 (模块 )支持下对建立的血吸虫病 GIS数据库进行空间自相关性分析。　结果　安徽及江西省血吸虫病患者总数及钉螺总面积不同代表年份中 ,均具有不同程度的空间自相关性。总体上钉螺分布的相关系数 (Moran′I )大于患者的相关系数 ,并具有非常显著性差异。江苏省钉螺总面积具有一定的空间自相关性 ,其空间聚集性显著高于血吸虫病患者数 ,两者间缺乏空间聚集性。　结论　空间自相关分析可用于血吸虫病患者、钉螺分布的地域聚集性的研究 ,以揭示该病的分布规律和流行态势

基于线粒体基因分析的中华血吸虫分子种系发生研究

张广军;邱持平;邱东川;夏明仪

2002, 20(1): 3-13.

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　　目的　测定中华血吸虫线粒体细胞色素 C氧化酶亚基 1(CO1)和 NADH脱氢酶亚基 1(ND1)基因序列 ,并根据这些序列构建分子系统发生树 ,探讨中华血吸虫在裂体属内的系统发生位置。　方法　以 GNT- K法抽提虫体基因组 DNA,用特异引物 PCR扩增目的基因。PCR扩增产物经纯化后克隆于质粒载体 ,以纯化后的阳性质粒 DNA作为模板 ,M13(F/ R)为引物于 L icor测序仪测序。检索 Gen Bank,查找曼氏血吸虫等相关血吸虫两线粒体基因序列 ,作基因排序及比较分析后 ,用 PHYL IP和 MEGA以邻接法和最大简约法绘制系统发生树。　结果　克隆了中华血吸虫的 CO1和 ND1基因片段 ,并测定了两基因片段的核苷酸序列 ,根据这些序列构建了系统发生树。　结论　中华血吸虫 CO1和ND1基因的系统发生树结果一致。提示中华血吸虫归属于亚洲血吸虫组

mRNA差异显示技术分离猬迭宫绦虫幼虫特异表达基因

刘殿武;朱冰;王晓波;闫会敏;丁月新

2002, 20(1): 4-17.

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　　目的　查找猬迭宫绦虫幼虫裂头蚴阶段特异性表达基因。　方法　裂头蚴和成虫组织用异硫氢酸胍一步法提取总 RNA,用 DNA酶去除总 RNA中污染的 DNA。使用 T1 2 MA、T1 2 MC、T1 2 MG和 T1 2 MT4种锚定引物反转录合成 c DNA,再用 1种随机引物与上述 4种锚定引物在含同位素的反应液中进行 PCR反应。将 PCR产物用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离 ,经放射自显影后 ,从凝胶上选出裂头蚴与成虫不同的差异带 ,PCR扩增后经杂交试验鉴定出不同种类的基因片段 ;以筛选出的差异带作探针 ,分别与裂头蚴和成虫 RNA进行 Northern杂交证实裂头蚴阶段表达基因 ;将差异带测序后与 Gen Bank中的序列进行同源性比较。　结果　从凝胶中共选出 11条差异带。将回收的 11条带再经PCR扩增和杂交试验 ,从中选出 3种不同的基因片段。经 Northern杂交证实片段 1和片段 2为裂头蚴特异表达基因 ,而片段 3为裂头蚴和成虫共同表达的基因。3个基因片段测序后与 Gen Bank中的基因进行同源性分析 ,基因片断 1和 2无同源序列 ;基因片段 3与多种生物的 2 8S r RNA同源。　结论　通过 m RNA差异显示技术查找出 2个裂头蚴阶段特异性表达基因片段

上海地区肠道线虫病防治工作回顾与建议

蔡黎;黄德生;马杏宝;张宝秀;傅英华;葛宏妍

2002, 20(1): 5-20.

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　　目的　分析上海地区人群肠道线虫感染状况 ,对今后的防治工作提出建议。　方法　回顾建国以来采取各项防治措施后人群肠道线虫感染率的变化 ,分析上海地区防治肠道线虫病面临的新情况及挑战。　结果　随着药物驱虫、健康教育和健康促进及粪水管理等多项防制措施的实施、以及社会经济发展和生产方式的改变 ,人群肠道线虫感染率由 195 5年的 6 2 .6 %降至 2 0 0 0年的 8.2 % ,下降了 88.5 %。其中 ,蛔虫感染率由 5 2 .1%降至 6 .3% ,下降了89.0 % ;钩虫由 12 .9%降至 0 .1% ,下降了 99.0 %。 6年监测结果表明 ,人群肠道线虫感染率每 3年自然下降幅度约为 5 0 %。蛲虫感染率仍较高 ,1999年为 18.9%。　结论　上海地区肠道线虫感染率已大幅度下降 ,防治工作取得了显著成绩。但与上海社会经济发展相比较 ,防治工作面临新的挑战 ,如 :防治人群构成的改变、感染率高峰向老年组转移、外来输入性感染者对本地人群的影响、特殊人群的高感染率以及幼托儿童蛲虫感染等。应进一步加强饮用水及粪水管理、健康教育和健康促进 ,以及加强肠道线虫感染状况的监测 ,以便更快速、有效地降低人群肠道线虫感染率。

晚期日本血吸虫病的危险因素病例-对照研究

袁兆康;周小军;郑辉烈;刘汉强;严涛;陈年高;古小南;汪维周;李国华

2002, 20(1): 6-24.

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　　目的　探讨晚期血吸虫病晚血 )发生的危险因素。　方法　 1∶ 1、1∶ 2配对病例 -对照研究。对照组为健康人 ,慢性血吸虫病慢血 )患者 ,每组调查 2 13例。调查内容包括 :血吸虫病患病史、治疗史、疫水接触史、社会经济状况及营养状况等。检测细胞、体液免疫水平、 5项乙肝血清标志物 HBVMs)和 ABO血型及 B超等。用 SAS软件 ,以 1∶ 1、1∶ 2配对单因素和逐步条件 logistic回归分析。　结果　血吸虫病检查次数 OR=1.16 8～ 1.311)、首次患血吸虫病距末次治疗间期 OR=1.14 2 )和距本次调查间期 OR =1.0 89)、HBs Ag+ OR=4 .6 83～ 10 .75 9)、HBc Ab+ OR=2 .873)、HBs Ag+ +HBe Ab+ +HBc Ab+ OR=7.6 0 4 )为晚血发病危险因素 ;晚血患者人均住房面积较小、年均收入较低 ;未发现晚血与 ABO血型的关联性。　结论　晚血的发生与血吸虫的反复感染、血吸虫病治疗不及时、不彻底及感染间期长有关 ,合并乙肝感染、社会经济状况差及细胞免疫水平降低可增加其发病的危险性

山东省猪带绦虫病和囊尾蚴病流行病学调查

刘新;赵中平;万功群;傅斌;李桂萍;陈锡欣;缪峰;赵长磊;李顺平;李文;付兆义;高长兰;邓绪礼

2002, 20(1): 7-28.

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　　目的　调查山东省猪带绦虫病和囊尾蚴病流行现状。　方法　采用现场访问、粪便检查及血清学检测等方法对猪带绦虫病和囊尾蚴病人群的感染流行状况、猪囊尾蚴感染情况及有关流行因素进行调查分析。　结果　全省人群猪带绦虫病和囊尾蚴病平均患病率分别为 0 .0 4 8%和 0 .0 5 7% ,抗囊尾蚴特异性 Ig G4 抗体阳性率平均为 1.91%。各地区流行程度不同 ,性别及城乡人群患病率均无显著性差异。流行因素调查结果表明 ,居民普遍存在不卫生习惯 ,如 :切菜刀、板生熟不分 ,饭前便后不洗手等。“连茅圈”养猪占 92 .3% ,粪便管理及生活环境卫生均较差。囊尾蚴病猪检出率平均为 0 .0 6 % ,囊尾蚴抗体阳性率平均为 1.99%。　结论　山东省绦虫病和囊尾蚴病患病率呈下降趋势 ,但流行范围扩大 ,各地区流行程度不同 ,各种流行因素远未得到控制

不同地区微小按蚊rDNA-ITS2序列差异

周水森;汤林华;顾政诚;王漪

2002, 20(1): 8-31.

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　　目的　比较我国云南、海南省、广西壮族自治区及泰国等不同地区微小按蚊核糖体 DNA第 2内转录间隔区 ITS2 )序列差异。　方法　取单只雌蚊蚊腿消化提取 DNA,PCR特异扩增 r DNA- ITS2片段 ,并对其扩增产物纯化、测序及分析。　结果　发现 2种不同的 ITS2序列 Gen Bank登录号 :AF4 16 783,AF4 16 784 ) ,分别与微小按蚊 A和 C同源 ,ITS2序列长度及 GC含量分别为 4 81bp,5 4 .0 4 %和 4 83bp,5 4 .2 3% ,两者无显著性差异 ;但 2 2个固定位点存在碱基置换和插入 /缺失 ,序列差异为 5 .8%。　结论　研究区内微小按蚊存在 A和 C两个不同的亲缘种

序列标签法寻找日本血吸虫新基因

李焱;余新炳;吴忠道;李晖婷;包俊英;邵筱

2002, 20(1): 9-34.

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　　目的　寻找日本血吸虫新的疫苗候选分子 ,通过构建基因的反义核酸表达载体进行基因性质功能研究。　方法　运用表达序列标签法寻找并获得日本血吸虫新基因 ,对未知基因进行功能分析 ,并构建反义真核表达载体。　结果　获得表达序列标签 JAYL0 2 30的全长 c DNA序列 ,其推导氨基酸序列与人类和猪等生物的抗凋亡因子 1具有同源性 ,将之反向克隆入真核表达载体 p EGFP- N3中。　结论　表达序列标签法与生物信息技术结合有利于寻找新基因 ,反义核酸载体的构建为进一步研究基因功能提供帮助

MNNG对日本血吸虫成虫细胞鸟氨酸脱羧酶活性作用的初步研究

范虹;黄敏;王倩;李曼军

2002, 20(1): 10-36.

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　　目的　观察 N-甲基 - N-硝基 - N-亚硝基胍 MNNG)诱导后日本血吸虫成虫细胞鸟氨酸脱羧酶 ODC)活性的变化。　方法　将日本血吸虫成虫剪碎后 ,收集成虫细胞 ,培养 1wk后依次用 3μg/ ml的 MNNG处理 4 8h,用 RP-MI- 16 4 0加 10 %小牛血清及常量抗生素的培养基清洗数次并继续培养。对照组不用 MNNG处理。分光光度法测定ODC活性。　结果　 MNNG诱导后第 2、3周 ODC活性显著增高。　结论　日本血吸虫成虫细胞内存在 ODC活性 ,MNNG具有增强 ODC活性的作用

伯氏疟原虫青蒿素抗性系的培育研究

陈颖丹;林宝英;张家埙

2002, 20(1): 11-38.

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　　目的　培育伯氏疟原虫青蒿素抗性系。　方法与结果　采用伯氏疟原虫接种传代和青蒿素剂量递增法分3条路线进行培育 :A线 ,青蒿素起始剂量为 12 6 .2 mg/kg相当于 1/2 ED50 ) ,递增剂量为 6 0 mg/kg,每隔 2代改为12 6 .2 mg/kg加强 1次。第 14、30、4 4及第 6 0代抗性指数 I50 )逐渐上升 ,分别为 4 .0 1、10 .11、16 .0 2及 18.93;至第76代 ,抗性减弱 ,I50 为 14 .89;至第 10 8代 ,剂量达 886 2 .5 mg/kg,I50 仅为 10 .4 9。B线 ,是从 A线第 6 6代转种而来 ,此后每周给药 1次 ,剂量为 4 0 0 0 mg/kg,至第 4 0代 I50 为 2 7.4 5 ,抗药性明显增强。C线 ,是从 B线第 19代转种而来 ,此后每周给药 1次 ,剂量为 2 0 0 0 mg/kg,至第 15代 ,I50 为 17.4 1。　结论　已培育出具有中度抗药性的伯氏疟原虫青蒿素抗性系

日本血吸虫尾蚴cDNA文库的构建及分析

陈晓光;李华;彭鸿娟;周晓红;沈树满;冯明钊

2002, 20(1): 12-41.

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　　目的　构建日本血吸虫尾蚴 c DNA文库。　方法　从日本血吸虫尾蚴中提取总 RNA,运用“SMART c D-NA文库构建试剂盒”构建文库。　结果　所建文库的初始滴度为 1.8× 10 7pfu/ ml,经 1次扩增后的滴度为 2 .5× 10 7pfu/ ml,插入子的平均长度为 1.0 75 kb,重组率为 94 .4 % ,并从该文库中调出了日本血吸虫保守基因 TPI和 JF2的全长 c DNA片段。　结论　构建了日本血吸虫尾蚴 c DNA文库

3种不同培养基体外培养阴道毛滴虫效果的比较

耿志辉;韩淑梅;刘利;施雨露;李淑红

2002, 20(1): 13-44.

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　　目的　探索阴道毛滴虫体外培养的适宜条件。　方法　用临床分离的阴道毛滴虫 ,按 9.0× 10 4 / ml的接种量转种至 3种不同培养基进行培养 ,p H值为 5 .6。　结果　经 3种培养基培养 ,96 h后阴道毛滴虫数量存在差异 ,其中以半胱氨酸 -肝 -胨 -麦芽糖培养基培养基 )虫数较多 ,肝 -胨 -麦芽糖培养基培养基 )次之 ,大豆 -肝 -胨 -麦芽糖培养基培养基 )较少。培养基与培养基及培养基相比较 ,滴虫存活率差异具有显著性意义 P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,滴虫生长密度差异也具有显著性意义 P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,生长密度高峰持续时间分别为 192 h、14 4 h和 96h,最长存活时间分别为 2 88h、2 16 h和 192 h。　结论　半胱氨酸 -肝 -胨 -麦芽糖培养基较适于阴道毛滴虫体外增殖

先天性弓形虫病筛查的策略和方案述评

薛纯良

2002, 20(1): 14-48.

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青蒿素类药物神经毒性及其作用机制

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