杜氏利什曼原虫平原和荒漠疫区分离株LACK基因克隆及序列分析

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2002, Vol. 20 ›› Issue (4): 2-200.

杜氏利什曼原虫平原和荒漠疫区分离株LACK基因克隆及序列分析

马莹;胡孝素;王雅静;王子龙

四川大学华西基础医学和法医学院寄生虫学教研室成都610044

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2002-08-30 发布日期:2002-08-30

Cloning and Sequence Analysis of LACK Gene of Leishmania Donovani Isolates from Plain and Desert Foci of China

MA Ying;HU Xiao-su;WANG Ya-jing;WANG Zi-long

Department of Parasitology;School of Preclinical and Forensic Medicine;Sichuan University;Chengdu 610044

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2002-08-30 Published:2002-08-30

摘要/Abstract

摘要： 　　目的　测定我国平原疫区和荒漠疫区杜氏利什曼原虫分离株活性蛋白激酶 C受体同源物 (L ACK)基因序列 ,并与山丘疫区分离株及国外利什曼原虫分离株进行比较。　方法　应用 RT- PCR扩增 L ACK基因 ,将其克隆入p UC18载体后用双脱氧链末端终止法测序 ,并与 Gen Bank中相关数据进行比较。　结果　用 RT- PCR成功扩增出约95 0 bp的 L ACK基因片段 ,测序结果表明其片段大小均为 94 2 bp,与 Gen Bank中多种利什曼原虫 L ACK基因的核苷酸序列一致性达 97%以上。我国山丘、平原和荒漠 3个不同疫区杜氏利什曼原虫分离株的 L ACK基因序列的一致性达95 %以上。　结论　获得了我国平原和荒漠疫区杜氏利什曼原虫 L ACK基因序列。我国 3个不同疫区杜氏利什曼原虫分离株的 L ACK基因具有高度同源性。

关键词: 利什曼原虫, LACK, 克隆, 序列分析

Abstract: 　Objective To determine the nucleotide sequence of the LACK
(Leishmania homologue of receptors for activated protein kinase C)
gene of Leishmania donovani isolates from plain foci (L.d SD1) and desert
foci (L.d XJ771) of China, and to find out the difference of the sequence of
LACK gene with other Leishimania spp. and also the isolate from hill foci of China.. Methods. The LACK genes of L.d SD1 and L.d XJ771 were amplified by RT-PCR and cloned into pUC18 vector respectively, sequenced by the dideoxy chain termination method, then analyzed and compared with that of other isolates.. Results . The LACK genes of the two isolates were successfully cloned. Both of the 2 fragments were 942 bp in length. Comparison
of the two nucleotide sequences with that of other Leishmania spp. in GenBank showed that the identities were more than 97%, and the identities of the nucleotide sequences of LACK genes of the three L.d isolates from plain, desert and hill foci of China were more than 95%.. Conclusion .
High identities exist among the nucleotide sequences of LACK genes of the three L.d isolates from the three foci of China.

Key words: Leishmania donovani, LACK, gene cloning, gene sequencing

马莹;胡孝素;王雅静;王子龙. 杜氏利什曼原虫平原和荒漠疫区分离株LACK基因克隆及序列分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2002, 20(4): 2-200.

MAYing;HUXiao-su;WANGYa-jing;WANGZi-long. Cloning and Sequence Analysis of LACK Gene of Leishmania Donovani Isolates from Plain and Desert Foci of China[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2002, 20(4): 2-200.

[1]	邹伟浩, 吴蔚玲, 廖远鹏, 陈敏, 彭鸿娟. 刚地弓形虫抗缓殖子期抗原1单克隆抗体的制备与应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 587-593.
[2]	刘雅芳, 陈彬, 芦新焱, 李光华, 杜春红, 姜丹丹, 杨兴. 云南微小扇头蜱线粒体基因组全序列测定与分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 677-681.
[3]	杨成运, 贺志权, 鲁德领, 钱丹, 刘颖, 李素华, 周瑞敏, 邓艳, 张红卫, 王昊, 赵东阳, 郭万申. 2020年河南省内脏利什曼病病例的流行病学调查[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(4): 481-486.
[4]	张爱平, 梁曼曼, 朱玲玲, 盛皓宇, 杨江华. 内脏利什曼病治疗后64年复发1例[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(2): 266-268.
[5]	马琳, 张铮, 王安礼, 刘东立. 检测利什曼原虫的实时荧光定量PCR的建立及应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(4): 548-552.
[6]	余大为, 李凡, 冯宇, 杨成明, 杨俊克, 刘林林, 张永福. 三种免疫层析试条检测甘肃犬利什曼原虫感染效能的评价[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(6): 792-795.
[7]	刘建秀, 汪俊云. 分子技术在利什曼原虫分类与鉴定上的应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(4): 508-513.
[8]	刘建秀, 高春花, 杨玥涛, 郑彬, 汪俊云. 利什曼原虫K26序列应用于我国利什曼原虫分离株鉴定的价值分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(2): 181-187.
[9]	李润花, 关丽, 殷国荣. 刚地弓形虫滑行相关蛋白45的克隆、表达与免疫反应性检测[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(5): 563-567.
[10]	杨瑞, 熊乙丁, 郭珊珊, 廖业, 夏嫱, 郭锦锦, 杜联峰. 前纤维蛋白多克隆抗体对刚地弓形虫在小鼠胚胎成纤维细胞中增殖的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(4): 437-443.
[11]	赵正虎, 钱胜南, 万静宜, 唐子茹, 沈双. 刚地弓形虫磷酸丙糖异构酶多克隆抗体的制备及鉴定分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(3): 311-316.
[12]	程芳洲, 高春花, 杨玥涛, 汪俊云. 我国不同利什曼病流行区利什曼原虫分离株核糖体内转录间隔区1的多态性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(2): 196-201.
[13]	袁义雪, 郑国侠, 王丹丹, 专行, 杜萌, 王云华. 蓝氏贾第鞭毛虫核苷二磷酸激酶基因的克隆与表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(2): 190-193.
[14]	危芙蓉, 杨玥涛, 汪俊云, 王燕娟, 潘佳明, 曹建平. 婴儿利什曼原虫感染小鼠体内中性粒细胞形成胞外诱捕网能力的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(1): 18-22.
[15]	周成艳, 马君, 刘伟, 徐前明, 朱兴全. 印度华首线虫核糖体和线粒体基因序列多态性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(1): 81-86.