日本血吸虫尾蚴cDNA文库的构建及分析

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2002, Vol. 20 ›› Issue (1): 12-41.

日本血吸虫尾蚴cDNA文库的构建及分析

陈晓光;李华;彭鸿娟;周晓红;沈树满;冯明钊

第一军医大学寄生虫学教研室广州510515 陈晓光;李华;彭鸿娟;周晓红;沈树满);香港中文大学生物学系香港冯明钊)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2002-02-28 发布日期:2002-02-28

Construction and Characterization of the cDNA Library from Schistosoma japonicum Cercariae

CHEN Xiao-guang1;LI Hua1;PENG Hong-juan1;SHEN Shu-man1;FUNG Ming-chiu2

1 Department of Parasitology;Institute of Tropical Medicine;The First Military Medical University;Guangzhou 510515; 2 Department of Biology;The Chinese Uni

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2002-02-28 Published:2002-02-28

摘要/Abstract

摘要： 　　目的　构建日本血吸虫尾蚴 c DNA文库。　方法　从日本血吸虫尾蚴中提取总 RNA,运用“SMART c D-NA文库构建试剂盒”构建文库。　结果　所建文库的初始滴度为 1.8× 10 7pfu/ ml,经 1次扩增后的滴度为 2 .5× 10 7pfu/ ml,插入子的平均长度为 1.0 75 kb,重组率为 94 .4 % ,并从该文库中调出了日本血吸虫保守基因 TPI和 JF2的全长 c DNA片段。　结论　构建了日本血吸虫尾蚴 c DNA文库

关键词: 日本血吸虫, 尾蚴, cDNA文库, 构建

Abstract: 　Objective To construct a cDNA library from Schistosoma japonicum cercariae. Methods Total RNA was extracted from 500 000 S.japonicum cercariae and used to synthesize the double-stranded cDNA and cloned into the TriplEx2 vector using "SMART cDNA Construction Kit". Results The primary titer of the constructed cDNA library is 1.8×107 pfu/ml and the titer of amplified library is 2.5×1010 pfu/ml. The average size of inserts is 1.075 kb. The recombinant efficiency is 94.4%. The full length cDNA of S.japonicum TPI and JF-2 genes was successfully amplified from the library. Conclusion A cDNA library of S.japonicum cercariae has been constructed successfully.

Key words: Schistosoma japonicum, cercariae, cDNA library, construction

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