家蝇生长发育各阶段抗菌肽基因表达情况的研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2008, Vol. 26 ›› Issue (3): 7-190.

家蝇生长发育各阶段抗菌肽基因表达情况的研究

金小宝^1，2，王艳¹，朱家勇^{1 *}，马艳¹，楮夫江¹，杨小蓉¹

1 广东药学院基础学院，广州 510006；2 南方医科大学公共卫生与热带医学学院，广州 510515

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-06-30 发布日期:2008-06-30

Expression Analysis of Antibacterial Peptide Genes at Different Development Stages of Musca domestica

JIN Xiao-bao^1，2，WANG Yan¹，ZHU Jia-yong^{1 *}，MA Yan¹，CHU Fu-jiang¹，YANG Xiao-rong¹

1 Department of Parasitology, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China；2 School of Public Health and Tropical Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-06-30 Published:2008-06-30

摘要/Abstract

摘要： 目的从基因角度分析家蝇生长发育各阶段抗菌肽的表达情况。方法制备家蝇卵以及Ⅰ龄、Ⅱ龄、Ⅲ龄幼虫、蛹和成虫等6个生长阶段的总RNA，采用半定量RT-PCR技术，以磷酸甘油醛脱氢酶（GADPH）基因作为内参照，根据GenBank公布的家蝇抗菌肽基因-天蚕素（cecropin）基因、防御素（defensin）基因和攻击素（attacin）基因的核苷酸序列设计特异性引物进行RT-PCR扩增，分析家蝇生长发育各阶段抗菌肽基因mRNA表达量。结果上述6个生长发育阶段均检测到cecropin、defensin和attacin等3种抗菌肽基因的表达，分别在210、300和650 bp出现一条带，与其理论值相符。其中Ⅲ龄幼虫期和成虫期抗菌肽基因mRNA的表达量最高（3种抗菌肽基因电泳图谱扫描光密度与内参基因GAPDH光密度的比值分别为1.61、1.99和1.62，1.47、1.92和1.59），卵期、Ⅰ龄幼虫期和蛹期表达量相对较低（3种抗菌肽基因电泳图谱扫描光密度与内参基因GAPDH光密度的比值分别为0.49、0.49和0.42，0.72、0.49和0.64，0.65、0.39和0.91）。结论家蝇抗菌肽基因在不同发育阶段均普遍表达，但表达水平存在明显差异。

关键词: 家蝇, 抗菌肽, 基因表达, RT-PCR

Abstract: Objective To explore the expression level of antibacterial peptide genes at the different development stages of Musca domestica. Methods Total RNA was extracted from eggs, 1st instar larvae, 2nd instar larvae, 3rd instar larvae, pupae and adults of M. domestica. After the primers for antibacterial peptide （cecropin, defensin and attacin） genes and GAPDH were designed respectively according to the reported M. domestica gene sequences in GenBank, semi-quantitative RT-PCR was performed to detect expression level of these genes in the development stages of M. dome-stica using GAPDH as inner control. Results The antibacterial peptide genes were detected with bandｓ of 210 bp, 300 bp and 650 bp at all development stages of M. domestica. The expression level in the 3rd instar larvae and adults were higher, with a band value of cecropin, defensin and attacin in relation to GAPDH of 1.61, 1.99, 1.62 and 1.47, 1.92, 1.59, respectively; while it was lower at eggs, 1st instar larvae and pupae with a band value of cecropin, defensin and attacin 0.49, 0.49, 0.42 and 0.72, 0.49, 0.64 and 0.65, 0.39, 0.91, respectively. Conclusion The antibacterial peptide genes express at all development stages of M. domestica with an evidently different expression level．

Key words: Musca domestica, Antibacterial peptide, Gene expression, RT-PCR

金小宝;王艳;朱家勇;马艳;楮夫江;杨小蓉. 家蝇生长发育各阶段抗菌肽基因表达情况的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2008, 26(3): 7-190.

JINXiao-bao;WANGYan;ZHUJia-yong*;MAYan;CHUFu-jiang;YANGXiao-rong. Expression Analysis of Antibacterial Peptide Genes at Different Development Stages of Musca domestica[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2008, 26(3): 7-190.

[1]	张可心, 刘文娟, 张心雨, 张倩, 张瑞玲, 张忠. 实验室品系家蝇幼虫肠道可培养细菌的分离、鉴定与产消化酶活性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(3): 355-361.
[2]	成钢, 王芊薄, 龚强, 熊德慧. 东方田鼠HSP90α和KPNA2基因表达及体内抗日本血吸虫效果比较观察[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(5): 552-556.
[3]	茅光耀, 郭云海, 张仪, 肖宁. Cu²⁺胁迫对福寿螺金属硫蛋白基因mRNA表达的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(3): 375-378.
[4]	茅光耀, 周鸿让, 黄芸, 岳志远, 段磊, 许秋利, 郭云海, 党志胜, 张仪, 肖宁. Cu²⁺胁迫下福寿螺谷胱甘肽S转移酶基因表达分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(2): 213-218.
[5]	郑文琪, 苏秀兰. 抗菌肽的抗疟原虫活性及作用机制的研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(6): 643-647.
[6]	王楠1, 滕飞翔1, 俞黎黎1, 杨李1, 张承伯1, 周鹰1,2, 崔玉宝1,2*. 粉尘螨变应原Der f 8全长基因克隆及表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(4): 8-351-356.
[7]	于爱萍, 沈玉娟. 长链非编码RNA在寄生虫中的研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(3): 294-299.
[8]	刘婧, 陈丹, 庄桂芬, 黄振东, 薛志静, 张瑞玲, 张忠. 家蝇发育过程中肠道可培养共生细菌的分离与鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(2): 120-124.
[9]	颜凤，吕清巧，程金芝，牟小会，翟慧，杨迅，商正玲，吴家红. 埃及伊蚊yellow*基因家族的鉴别和表达谱分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2016, 34(1): 1-1-10.
[10]	刘泽华，赵俊龙*. 抗菌肽抗寄生虫作用研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2014, 32(5): 11-377-379,384.
[11]	臧炜, 卢潍媛, 徐馀信, 曹建平. 日本血吸虫酪氨酸激酶TK4保守区编码基因的克隆和分析（英文）[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2014, 32(3): 1-167-171.
[12]	胡蓉，张姝，吴建伟*，国果，付萍. 家蝇Ⅲ龄幼虫消化系统内源性-葡萄糖苷酶的组织定位和表达差异研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2013, 31(4): 3-256-261.
[13]	付萍, 吴建伟, 国果. 家蝇抗真菌肽-1的cDNA克隆及其编码蛋白序列的生物信息学分析（英文）[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2011, 29(4): 7-279-284.
[14]	蔡辉霞, 沈玉娟, 韩秀敏, 袁忠英, 王虎, 徐馀信, 胡媛, 卢潍媛, 官亚宜, 曹建平. 细粒棘球蚴抗原EPC1基因的克隆、表达及其免疫诊断的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2011, 29(3): 2-167-171.
[15]	王乙惠，李雅杰*. 蓝氏贾第鞭毛虫基因表达调控的研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2011, 29(2): 12-138-141.