中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2007, Vol. 25 ›› Issue (6): 11-487.
黄志坚,刘志刚
HUANG Zhi-jian,LIU Zhi-gang
摘要: 目的 分析、鉴定与纯化腐食酪螨过敏原组分。 方法 以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析鉴定腐食酪螨蛋白质提取液中的蛋白质组分和过敏原组分,并通过阴离子交换层析和分子排阻色谱进一步纯化。 结果 腐食酪螨的蛋白质粗浸液电泳后可以辨认的蛋白质带共23条,相对分子质量(Mr)分别为177 000、118 000、107 000、70 000、67 000、60 000、52 000、45 000、41 000、40 000、38 000、37 000、35 000、27 000、23 000、22 000、18 000、17 000、16 000、15 000、14 000、13 000和12 000。Western blotting分析显示,腐食酪螨的5条致敏蛋白质带分别为Mr 128 000、67 000~70 000、36 000~37 000、18 000和16 000,其中前3条带特异性结合IgE阳性率均为100%,而Mr 18 000和Mr 16 000条带的阳性反应率分别为77.8%和44.44%。通过阴离子交换层析和分子排阻色谱从腐食酪螨粗浸液中分离到Mr 18 000的过敏原组分。 结论 腐食酪螨有4种主要过敏原及1种次要过敏原。