中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2006, Vol. 24 ›› Issue (4): 5-265.
陈丽凤1,2;李建华1;张西臣1;刘全3;赵月平1;曹利利1
CHEN Li-feng1,2;LI Jian-hua1;ZHANG Xi-chen1-LIU Quan2-ZHAO Yue-ping1;CAO Li-li 1
摘要: 目的 培养一携带犬贾第虫病毒的犬贾第虫(Giardia canis)细胞株。 方法 用蔗糖密度梯度离心-G1耐酸漏斗过滤法纯化犬贾第虫包囊,经口接种5日龄长爪沙鼠(Meriones unguiculata),8 d后于其十二指肠无菌收集犬贾第虫滋养体,置改良的 TYI-S-33 培养基中培养,待滋养体在培养管壁上形成细胞单层后进行传代。同时进行冻存和复苏实验,以及纯度、稳定性、细胞生物学特性、微生物污染等4项指标检测。滋养体经液氮冻融3次后3 000 × g离心15 min,取上清,用磷钨酸负染,透射电镜观察病毒粒子。 结果 犬贾第虫滋养体接种14 d 后虫体逐渐适应了培养环境,在培养管壁上形成细胞单层,经上述4项指标检测,证明形成了稳定的犬贾第虫细胞株。电镜观察,见滋养体内有外观球形呈20面体结构、直径约为36 nm的病毒样粒子。 结论 建立了携带GCV的犬贾第虫细胞株的体外纯培养。