猪囊尾蚴一种蛋白抗原基因的分子克隆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2004, Vol. 22 ›› Issue (5): 14-305.

猪囊尾蚴一种蛋白抗原基因的分子克隆

刘殿武,李文玲,张丽梅

河北医科大学流行病学教研室,石家庄 050017

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2004-10-30 发布日期:2004-10-30

Molecular Cloning of a Protein Antigen Gene of Cysticercus cellulosae

LIU Dian wu,LI Wen ling,ZHANG Li mei

Department of Epidemiology,Hebei Medical University,Shijiazhuang 050017,China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2004-10-30 Published:2004-10-30

摘要/Abstract

摘要： 　　目的　从猪囊尾蚴cDNA文库中筛选出编码某种蛋白抗原的基因。　方法　提取猪囊尾蚴mRNA,经反转录合成cDNA,构建cDNA文库。以兔抗猪囊尾蚴多克隆抗体筛选cDNA文库,得到阳性克隆后,将其亚克隆到pBlue scriptSK质粒中,以载体臂上的通用引物采用双脱氧末端终止法测定插入片段的核苷酸序列,GENETYX软件分析核苷酸序列编码的氨基酸序列,在GenBank中进行核苷酸序列同源性检索。　结果与结论　经过3次筛选,从cDNA文库中筛选出一个长度为1320bp的基因片段。此克隆的开放阅读框为1260bp,编码420个氨基酸,含有两个糖基结合位点。与GenBank中的基因进行同源性分析,其部分核苷酸序列与秀丽隐杆线虫(Caenorhabditiselegans)红细胞膜内蛋白和恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)红细胞表面抗原高度同源

关键词: 猪囊尾蚴, 分子克隆, cDNA文库, 序列分析, 同源性分析

Abstract: 　Objective To immunoscreen one protein antigen gene from a cDNA library of Cysticercus cellulosae . Methods A cDNA library of C. cellulosae was constructed after cDNA was synthesized, and immunoscreened using rabbit anti C. cellulosae polyclone antibody. The gene structure and its possible function were analyzed by comparing with the sequences available in the GenBank, after the insert of positive clone was subcloned to pBluescript SK plasmid and the nucleotide sequence of the cDNA was determined by dideoxynucleotide chain termination method using a Taq DyeDeoxy Terminator Cycle Sequencing Kit. The amino acid sequence was deduced from nucleotide sequence using GENETYX software. Homological search of the nucleotide sequences was done using BLAST in GenBank. Results and Conclusion A cDNA clone of 1 320bp was isolated. The clone contained one open reading frame composed of 1 260bp encoding 420 amino acids, in which two potential glycosylation sites were found. The partial nucleotide sequence of the gene fragment showed high homology with the essential spectrin gene of Caenorhabditis elegans and the erythrocyte surface antigen gene of Plasmodium falciparum , when the gene fragment was homologically analyzed in GenBank.

Key words: Cysticercus cellulosae, Molecular cloning, cDNA library, Sequencing, Homology analysis

刘殿武;李文玲;张丽梅. 猪囊尾蚴一种蛋白抗原基因的分子克隆[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2004, 22(5): 14-305.

LIUDianwu;LIWenling;ZHANGLimei. Molecular Cloning of a Protein Antigen Gene of Cysticercus cellulosae[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2004, 22(5): 14-305.

[1]	叶井明, 何威, 刘慧媛, 鱼潇, 罗波, 刘美辰, 周必英. 猪囊尾蚴排泄分泌抗原TPx对仔猪树突状细胞活化的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(3): 286-293.
[2]	李奔福, 王正青, 徐倩, 字金荣, 严信留, 彭佳, 李建雄, 蔡璇, 吴方伟, 杨亚明. 云南省细粒棘球绦虫线粒体co1和nd1基因序列分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(3): 306-311.
[3]	刘雅芳, 陈彬, 芦新焱, 李光华, 杜春红, 姜丹丹, 杨兴. 云南微小扇头蜱线粒体基因组全序列测定与分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 677-681.
[4]	庞建达, 宋伊宁, 王昕蕊, 刘明远, 孙树民. 猪囊尾蚴囊液蛋白组学分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(2): 144-149.
[5]	周成艳, 马君, 刘伟, 徐前明, 朱兴全. 印度华首线虫核糖体和线粒体基因序列多态性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(1): 81-86.
[6]	叶睿雪, 吴玉菊, 王庆志, 曹敏, 李调英, 陈兴旺, 周欢. 四川省藏族农区学龄儿童猪囊尾蚴感染及其对数学学习能力的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(6): 580-585.
[7]	李瑾, 王燕, 魏庆宽, 贾凤菊, 肖婷, 孙慧, 于振华, 黄炳成. 抗猪囊尾蚴IgG4抗体的特异性抗原筛选[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(5): 509-511.
[8]	陈木新1,2，陈家旭2，柳伟2，冯欣宇2，陈绅波1,2，陈韶红2，蔡玉春1,2，徐斌2，胡薇1,2*. 云南中缅边境等地5种疟原虫18S rDNA基因的序列分析及种系发育[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2016, 34(6): 4-493-499.
[9]	孙磊，王燕娟*，胡媛，曹胜魁，沈玉娟，曹建平. 122例脑炎脑膜炎症候群患者猪囊尾蚴、刚地弓形虫抗体血清学检测结果分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2016, 34(5): 6-414-417.
[10]	张少华，骆学农，李雪强，才学鹏*. 豆状带绦虫肌动蛋白基因克隆及其作为分子内参的应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2016, 34(1): 6-32-39.
[11]	刘琪1, 王伟琳2, 孟庆峰2, 徐展1, 崔洁1, 刘新欣1, 王伟利2 *. 森林革蜱半饱血雄蜱抑制消减杂交cDNA文库的构建及差异基因的分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2014, 32(4): 6-274-279.
[12]	周瑞敏，张红卫*，邓艳，钱丹，刘颖，陈伟奇，颜秋叶，苏云普，赵旭东，许汴利. 2例输入性卵形疟的实验室检测[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2013, 31(2): 10-127-130.
[13]	胡明洁1，方强2 *，吴守伟1，汤必奎1，张静1，焦玉萌2，夏惠2，沈继龙3. 间日疟原虫安徽地域株乳酸脱氢酶基因序列同源性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2013, 31(2): 20-148-150.
[14]	耿英芝1，毛玲玲1，腾聪1，安春丽2，王博1，陈静乙2，姚文清1 *. 辽宁丹东间日疟原虫裂殖子表面蛋白1等位基因型分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2012, 30(3): 18-242-244.
[15]	卢艳1, 徐斌2, 鞠川2, 莫筱瑾2, 陈绅波2, 冯正2, 王小宁1, 胡薇1. 日本血吸虫虫卵cDNA文库的免疫筛选和阳性克隆的鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2012, 30(2): 6-109-115.