恶性疟原虫FCC1/HN株醛缩酶编码区基因的克隆及表达

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2004, Vol. 22 ›› Issue (3): 2-135.

恶性疟原虫FCC1/HN株醛缩酶编码区基因的克隆及表达

张瑞娟^1,2,朱淮民¹,曹毅¹,周爱国¹,郑志强¹,张青锋¹,郑徽¹

1 第二军医大学病原生物学教研室,上海 200433 2 解放军第306医院,北京 100101

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2004-06-30 发布日期:2004-06-30

Cloning and Expression of Aldolase Encoding Gene of Plasmodium falciparum FCC1/HN Strain

ZHANG Rui-juan,ZHU Huai-min,CAO Yi,ZHOU Ai-guo,ZHENG Zhi-qiang,ZHANG Qing-feng,ZHENG Hui

Department of Pathogenic Biology,The Second Military Medical University,Shanghai,200433,China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2004-06-30 Published:2004-06-30

摘要/Abstract

摘要： 　　目的　克隆恶性疟原虫海南株 (FCC1/HN)株糖酵解醛缩酶 (ALD)编码区基因。　方法　利用已知ALD基因序列设计一对特异性引物,从基因组DNA中用PCR扩增ALD基因,将其克隆入pQE30载体,阳性克隆经酶切鉴定后测序,在此基础上将重组质粒转化大肠埃希菌M15进行表达。　结果　PCR扩增后获得特异性扩增片段,测序结果显示我国的恶性疟原虫FCC1/HN株与恶性疟原虫3D7株ALD基因序列完全相同。重组融合蛋白通过镍次氮基三乙酸(NiNTA)亲和层析及阳离子交换层析进行纯化。　结论　我国的恶性疟原虫FCC1/HN株与文献报道的恶性疟原虫3D7株ALD编码区基因序列相同,该融合蛋白在大肠埃希菌中获得表达

关键词: 恶性疟原虫, 醛缩酶, 克隆, 测序, 表达

Abstract: 　Objective To clone, sequence, and express the aldolase(ALD)encoding gene of Plasmodium falciparum FCC1/HN strain. Methods The ALD encoding gene was amplified by PCR from genomic DNA of FCC1/HN strain. The positive clones were screened and identified by agarose gel electrophoresis and endonuclease. The recombinant plasmid was transformed into E. coli M15. The fusion protein was expressed by IPTG induction and purified by Ni-NTA affinity chromatography and anion exchange column. Results The ALD gene of P. falciparum was amplified. Analysis of sequencing showed that the ALD gene of P. falciparum was identical with the sequence of other reported isolates. A Mr 41 000 fusion protein was induced by IPTG and was purified by chromatography. Conclusion The ALD gene of P. falciparum FCC1/HN strain was identical to the other reported isolates. ALD fusion protein of P. falciparum was expressed and purified.

Key words: Plasmodium falciparum, Aldolase, Cloning, Sequencing, Expression

张瑞娟;朱淮民;曹毅;周爱国;郑志强;张青锋;郑徽. 恶性疟原虫FCC1/HN株醛缩酶编码区基因的克隆及表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2004, 22(3): 2-135.

ZHANGRui-juan;ZHUHuai-min;CAOYi;ZHOUAi-guo;ZHENGZhi-qiang;ZHANGQing-feng;ZHENGHui. Cloning and Expression of Aldolase Encoding Gene of Plasmodium falciparum FCC1/HN Strain[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2004, 22(3): 2-135.

[1]	普娜, 薄新文, 赵文卿, 陈旭珂, 张玉霞, 张艳艳, 孙艳, 王正荣. 细粒棘球绦虫钙网蛋白的原核表达及功能初步鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2025, 43(2): 223-230.
[2]	李飞, 刘耀宝, 曹俊. 恶性疟原虫青蒿素耐药分子监测研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2025, 43(2): 260-268.
[3]	黄丽华, 武珺, 李正金, 罗娇, 顾伟. 肝片形吸虫感染合并肝结核临床诊断1例[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2025, 43(2): 304-306.
[4]	李清玉, 金勇, 马伟琼, 黄志勇. 广州管圆线虫致颅脑及胸部感染1例[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2025, 43(2): 307-310.
[5]	许昕洁, 李镜, 吴伊可, 杨凤, 单文昕, 章治鼎, 叶长江, 孙恩涛. 转录组测序分析粉尘螨抗辣根素的基因表达与机制[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2025, 43(1): 112-118.
[6]	邢佳, 余艳丽, 汪建军, 许世娟. 陕西省内脏利什曼病伴黑曲霉菌感染1例[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2024, 42(6): 820-822.
[7]	李素华, 纪鹏慧, 王丹, 王昊, 周瑞敏. 河南省2020年输入性恶性疟原虫Pfhrp2基因多态性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2024, 42(5): 664-667.
[8]	郭思含, 黄新安, 徐寒黎, 李春晓, 刘康康, 邢丹, 赵腾. 尖音库蚊复合体蚊虫DNA甲基化水平分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2024, 42(4): 502-511.
[9]	柏厚熹, 杨小涛, 罗永涵, 王艳春. 儿童肝片形吸虫合并铜绿假单胞菌感染1例[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2024, 42(4): 550-553.
[10]	江楠, 苏雅馨, 蒋小凤, 沈玉娟, 曹建平. 基于单细胞转录组测序的细粒棘球蚴感染小鼠肝T细胞异质性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2024, 42(3): 286-294.
[11]	吴易璇, 郭小腊, 陈轶霞. 细粒棘球蚴感染绵羊血清miRNA差异表达及诊断价值评价[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2024, 42(3): 295-302.
[12]	燕贺, 黄芳, 丰俊, 尹建海, 夏志贵, 曹建平. 2010—2018年云南中缅边境地区恶性疟原虫抗磺胺多辛-乙胺嘧啶药物基因多态性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2024, 42(2): 153-159.
[13]	刘毅, 蔡玉春, 陈家旭, 陈韶红, 俞英昉. 旋毛虫新生幼虫细胞外囊泡的分离鉴定及组学分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2024, 42(2): 225-233.
[14]	解晓曼, 孙航, 代莉莎, 朱文菊, 王利磊, 谢环环, 董宏杰, 张俊梅, 王琦, 周贝贝, 赵桂华, 徐超, 尹昆. 刚地弓形虫感染对小鼠脑组织转录本m⁶A甲基化修饰的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2024, 42(1): 27-35.
[15]	李启松, 杨李, 腾飞翔, 马桂芳. 屋尘螨过敏原Der p 4的克隆、表达、免疫原性鉴定及生物信息学分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2024, 42(1): 42-47.