小鼠脾内注射日本血吸虫病患者尿液循环抗原制备单克隆抗体

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 1999, Vol. 17 ›› Issue (3): 10-161.

小鼠脾内注射日本血吸虫病患者尿液循环抗原制备单克隆抗体

吴琛耘,娄文娴,薛纯良

上海第二医科大学寄生虫学教研室上海 200025

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:1999-06-30 发布日期:1999-06-30

PREPARATION OF MONOCLONAL ANTIBODIES BY INTRASPLENIC IMMUNIZATION OF MICE WITH URINE CIRCULATING ANTIGEN FROM PATIENTS INFECTED WITH SCHISTOSOMA JAPONICUM

WU Chenyun;LOU Wenxian;XUE Chunliang

Department of Parasitology;Shanghai Secand Medical University;Shanghai 200025

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:1999-06-30 Published:1999-06-30

摘要/Abstract

摘要： 　　目的：探讨用一种快速免疫方法制备抗人尿液日本血吸虫循环抗原的单克隆抗体。方法：将日本血吸虫病患者尿液用１５％三氯醋酸提取循环抗原后采用脾内直接注射法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备单克隆抗体。结果：建立了２株分泌抗人尿日本血吸虫循环抗原的单克隆细胞株２Ｅ６及２Ｂ１１，两者免疫球蛋白鉴定均属ＩｇＭ类，ＥＬＩＳＡ测得单抗对尿液循环抗原（ＩＨＵ ＣＡｇ），效价分别为２．５６×１０５和６．４×１０４。琼脂双扩散试验显示２株单抗与正常人尿三氯醋酸提取物均不能形成沉淀线，而２Ｅ６与日本血吸虫病患者尿液循环抗原能产生沉淀线。分别用２Ｂ１１和２Ｅ６腹水为捕捉抗体，ＨＲＰ Ｈ１１为酶标抗体检测１２例急性血吸虫病患者尿液，依次为６例和３例阳性，８例正常人尿液均为阴性。结论：用血吸虫病患者尿液提取的循环抗原经脾脏注射免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备单克隆抗体用于检测日本血吸虫病患者尿液中循环抗原是可行的。

关键词: 日本血吸虫, 脾内注射, 尿液循环抗原, 单克隆抗体

Abstract: 　AIM: To explore an efficient method for preparing monoclonal antibodies against circulating antigen of S.japonicum in the urine of schistosomiasis patients. METHODS: The urine of schistosomasis patients were precipitated with 5% trichloroacetic acid,and then used to immunize the BALB/c mice by intrasplenic immunization to prepare McAb. RESULTS: Two monoclonal cell lines against the CAg in the urine of schistosomiasis patients have been established.The immunoglobulin subclass of the 2 McAbs (2E6 and 2B11) were identified as IgM.The titres of 2E6 and 2B11 were 2.56×10 5 and 6.4×10 4. On immunodiffusion , McAb 2E6 showed one precipitation line with IHU CAg, however, both McAbs did not react with NHU-CAg.Using ascitic fluid of 2B11 and 2E6 as capture antibody separately, and HRP H11 as labelled antibody to detect the urine of 12 acute schistosomasis patients, 2B11 2E6 gave 6 and 3 positive, respectively, whereas 8 normal urine were all negative. CONCLUSION: It is feasible to use CAg from schistosomasis patientsurine to prepare anti CAg McAb by intrasplenic immunization in mice.

Key words: Schistosoma japonicum, intrasplenic immunization, urine circulating antigen, monoclonal antibody

吴琛耘;娄文娴;薛纯良. 小鼠脾内注射日本血吸虫病患者尿液循环抗原制备单克隆抗体[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 1999, 17(3): 10-161.

WUChenyun;LOUWenxian;XUEChunliang. PREPARATION OF MONOCLONAL ANTIBODIES BY INTRASPLENIC IMMUNIZATION OF MICE WITH URINE CIRCULATING ANTIGEN FROM PATIENTS INFECTED WITH SCHISTOSOMA JAPONICUM[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 1999, 17(3): 10-161.

[1]	谭潇, 朱琪, 刘众齐, 李佳, 彭丁晋. 日本血吸虫Sj26gst mRNA候选疫苗的免疫原性研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(5): 546-551.
[2]	刘华熳, Bikash Giri, 方传涛, 郑亚萌, 吴慧欣, 曾敏浩, 李姗, 程国锋. 日本血吸虫m6A修饰的性别相关circRNA鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(5): 552-558.
[3]	兰炜明, 徐慧, 徐银, 邱婷婷, 谢曙英, 邓凤林, 胡绍良, 刘欢, 郭家钢, 曾小军. 荧光定量PCR用于日本血吸虫感染高危环境早期预警的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(4): 502-505.
[4]	王晓玲, 张卫, 易存, 陈祥宇, 杨文彬, 徐斌, 胡薇. SjGPR89蛋白对日本血吸虫生长发育的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(6): 701-707.
[5]	陈果, 朱丹丹, 段义农. 免疫调节蛋白B7家族在日本血吸虫感染免疫调节中的研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(6): 774-779.
[6]	严晓岚, 闻礼永, 熊彦红, 郑彬, 张剑锋, 汪天平, 俞丽玲, 许国章, 林丹丹, 周晓农. 《日本血吸虫抗体检测标准酶联免疫吸附试验法》解读[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(6): 798-800.
[7]	邹伟浩, 吴蔚玲, 廖远鹏, 陈敏, 彭鸿娟. 刚地弓形虫抗缓殖子期抗原1单克隆抗体的制备与应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 587-593.
[8]	汤宪时, 季文翔, 熊春蓉, 周永华, 许永良, 仝德胜. 晚期日本血吸虫感染小鼠焦虑样行为学研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 622-628.
[9]	梁乐, 张璟, 沈玉娟, 胡媛, 曹建平. 环鸟苷酸腺苷酸促日本血吸虫感染小鼠肝虫卵肉芽肿形成及纤维化[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(4): 441-445.
[10]	章孝成, 高元, 胡媛, 曹建平. 日本血吸虫感染小鼠脾多核型髓源抑制细胞变化的初步研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(3): 330-336.
[11]	高元, 章孝成, 胡媛, 曹建平. 自然杀伤细胞抑制血吸虫病肝纤维化作用的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(2): 168-174.
[12]	洪炀, 林矫矫. 日本血吸虫蛋白质组学研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(6): 725-730.
[13]	黄爱龙, 张蓓, 沈函宇, 陈果, 李静, 朱丹丹, 段义农. 日本血吸虫感染小鼠肝髓样细胞触发受体-1的表达及其功能[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(5): 621-626.
[14]	赵成思, 秦敏, 谭明娟, 缪婷婷, 邵天业, 刘新建, 王勇. 吡喹酮对日本血吸虫急性感染小鼠肾脏功能损伤的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(2): 200-209.
[15]	莫筱瑾, 吴群峰, 冯正, 徐斌, 张颋, 陈绅波, 胡薇. SCAR-PCR技术鉴定日本血吸虫尾蚴性别的应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(6): 777-780.