杜氏利什曼原虫cDNA文库的构建

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 1997, Vol. 15 ›› Issue (6): 370-372.

杜氏利什曼原虫cDNA文库的构建

敬保迁¹; 胡孝素²; 陈建平²; 刘洪斌²

1 川北医学院微生物学教研室; 2 华西医科大学寄生虫学研究室

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:1997-12-28 发布日期:1997-12-28

CONSTRUCTION OF THE c DNA LIBRARY OF LEISHMANIA DONOVANI

Jing Baoqian¹; Hu Xiaosu²; Chen Jianping²; L iu Hongbin²

1 Department of Microbiology, North Sichuan Medical College, Nanchong 637000 2 Laboratory of Parasitology, West China University of Medical Sciences, Chengdu 610044

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:1997-12-28 Published:1997-12-28

摘要/Abstract

摘要： 目的 :建立杜氏利什曼原虫 cDNA文库 ,以获取个体基因表达产物和研究基因结构。方法 :以杜氏利什曼原虫四川人分离株 m RNA为模板 ,体外合成 cDNA,以噬菌体λgt11DNA为载体构建文库。结果 :共获 2× 10 6重组子 ,插入比例为 4 8%。文库经抗杜氏利什曼原虫前鞭毛体全虫兔抗血清筛选 ,共筛 2× 10 4重组子 ,获 3个阳性表达克隆 ,表达产物的分子量分别为 :136k Da、160 k Da和 148k Da。结论 :已构建成的表达型杜氏利什曼原虫 cDNA文库 ,其插入比例和表达效率均较高。

关键词: 杜氏利什曼原虫, cDNA文库, 免疫筛选

Abstract: AIM:To isolate indivadual gene products and to detect the gene characterization of L.donovani. METHODS:cDNA was synthesized with the mRNA temple isolated from the L.donovani mastigotes in vitro and the cDNA
library was constructed with the λgt11 DNA arm as the vecters. RESUL TS:2×10⁶ recombinants were produced and the
insert proportion was48%. 2×10⁴recombinants infected to E.coli Y1090r- were screened with a rabbit serum that vaccinated with L.donovani mastigotes as the probe, 3 positive expressing clones were detected, the molecular weight of the expressing peptides were 136 kDa, 160 kDa and 148 kDa, respectively. CONCLUSION: An expressing cDNA library of L.donovani was constructed, and its insert proportion and expressing rate were high.

Key words: Leishmania donovani, cDNA library, immune screening

敬保迁;胡孝素;陈建平;刘洪斌. 杜氏利什曼原虫cDNA文库的构建[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 1997, 15(6): 370-372.

JingBaoqian;HuXiaosu;ChenJianping;LiuHongbin. CONSTRUCTION OF THE c DNA LIBRARY OF LEISHMANIA DONOVANI[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 1997, 15(6): 370-372.

[1]	敬保迁, 谢勇恩, 胡为民, 杨健, 王朝莉, 冯莉. 重组杜氏利什曼原虫Pxn1、TryP、假定蛋白CAJ07026和GDPMP蛋白刺激BALB/c小鼠的免疫应答状态[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(6): 563-569.
[2]	管立人*, 高春花. 黑热病后皮肤利什曼病[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(4): 16-396-401.
[3]	刘鹏，张仁刚，张洁，敬保迁. 杜氏利什曼原虫表达位点相关基因样蛋白的分子克隆及表达定位[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2014, 32(5): 1-327-333.
[4]	刘琪1, 王伟琳2, 孟庆峰2, 徐展1, 崔洁1, 刘新欣1, 王伟利2 *. 森林革蜱半饱血雄蜱抑制消减杂交cDNA文库的构建及差异基因的分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2014, 32(4): 6-274-279.
[5]	卢艳1, 徐斌2, 鞠川2, 莫筱瑾2, 陈绅波2, 冯正2, 王小宁1, 胡薇1. 日本血吸虫虫卵cDNA文库的免疫筛选和阳性克隆的鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2012, 30(2): 6-109-115.
[6]	李金福1，陈建平2 *，田玉2，杨志伟2，马莹2，胡孝素2. 杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因重组质粒的免疫原性研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2011, 29(2): 8-122-125.
[7]	陆小军，严可宁，简君，杜晓青，马莹. 杜氏利什曼原虫中国山丘疫区分离株磷脂多糖1（LPG1）基因及两侧非编码区序列的获取及分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2010, 28(6): 16-465-467.
[8]	吕刚;芦亚君;范志刚;史大中;甘秀凤;钟赛凤. 欧猬迭宫绦虫全长cDNA文库构建及鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2010, 28(5): 18-394.
[9]	方强;夏惠;袁远英;曹俊;王雪梅;齐文娟;高琪. 构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2010, 28(3): 18-封三.
[10]	刘琴;;周丹娜;周艳琴;张颖;贺兰;姚宝安;赵俊龙;. 东方巴贝虫cDNA文库的构建与免疫学筛选[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2009, 27(3): 5-214.
[11]	敬保迁;邓世山;张仁刚;张洁. 杜氏利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体的比较蛋白质组学分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2009, 27(2): 2-106.
[12]	段新伟;傅颖慧;卢艳;黄成玉;鞠川;徐斌;许学年;冯正;胡薇. 日本血吸虫童虫cDNA文库免疫学筛选及阳性克隆的初步鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2009, 27(1): 19-82.
[13]	田占成;刘光远;谢俊仁;龚真莉. 微小牛蜱唾液腺cDNA文库的构建[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2008, 26(5): 16-391.
[14]	孙毅;贾人初;刘金明;苑纯秀;石耀军;陆珂;傅志强;孙焕;蔡幼民;林矫矫. 日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库的构建[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2007, 25(5): 12-410.
[15]	李金福;陈建平;田玉;杨志伟;马莹;胡孝素. 杜氏利什曼原虫四川分离株无鞭毛体蛋白基因的克隆及真核表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2007, 25(2): 10-128.