编码日本血吸虫大陆株磷酸丙糖异构酶(TPI)抗原基因的克隆与测序

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 1997, Vol. 15 ›› Issue (6): 349-352.

编码日本血吸虫大陆株磷酸丙糖异构酶(TPI)抗原基因的克隆与测序

缪应新**; 刘述先

**华东医院上海市老年医学研究所; 中国预防医学科学院寄生虫病研究所

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:1997-12-28 发布日期:1997-12-28

CLONING AND SEQUENCING OF THE GENE ENCODING TPI ANTIGEN FROM CHINESE STRAIN OF SCHISTOSOMA JAPONICUM

Miao Yingxin**; Liu Shuxian

**Shanghai Geriatrics Institute, Shanghai 200040 Institute of Parasitic Diseases; Chinese Academy of Preventive Medicine; Shanghai2 0 0 0 2 5

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:1997-12-28 Published:1997-12-28

摘要/Abstract

摘要： 目的 :获得编码日本血吸虫大陆株磷酸丙糖异构酶 ( Sjc TPI)的 c DNA基因片段 ,对其克隆与测序。方法 :以日本血吸虫大陆株成虫总 RNA为模板 ,经过逆转录 -聚合酶链 (式 )反应( RT- PCR)获得编码 Sjc TPI抗原的 c DNA片段 ,并克隆于载体 M13mp18、M13mp19,双脱氧链末端终止法测 DNA序列。结果 :体外 PCR扩增获得了编码 Sjc TPI的 0 .75kb c DNA片段 ,6个重组克隆子经酶切鉴定均有 0 .75kb片段的插入。测得编码 Sjc TPI的 DNA序列。结论 :用自行设计的引物成功地扩增了编码日本血吸虫大陆株 TPI抗原的基因片段并进行了克隆、测序 ,为制备重组 TPI进行疫苗试验打下基础。

关键词: 日本血吸虫大陆株, 磷酸丙糖异构酶, RT-PCR, 基因克隆, DNA序列

Abstract: AIM:Cloning and sequencing the gene encoding TPI antigen from Chinese strain of S. japonicum. METHODS:RT- PCR technique was used to gain the target gene. After digestion with restriction enzyme, the gene was respectively cloned into the vectors M13mp18, M13mp19, then sequenced by the method of dideoxy- mediated chain- termination. RESULTS:The 0.75 kb c DNA encoding Sjc TPI antigen was amplified in vitro by RT- PCR using total RNA as a template. 0.75 kb insert DNA was identified in six recombinant clones by restriction enzymemapping. The DNA sequence of SjcTPI was determined. CONCLUSION:
The process have been made succesfully in the cloning and sequencing the gene encoding SjcTPI. It will be scheduled to go ahead for vaccine trial probably using recombinant TPI antigen of S.japonicum.

Key words: Schistosoma japonicum （Chinese strain）, TPI, RT- PCR, gene clone, DNA sequenc

缪应新;刘述先. 编码日本血吸虫大陆株磷酸丙糖异构酶(TPI)抗原基因的克隆与测序[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 1997, 15(6): 349-352.

MiaoYingxin**;LiuShuxian. CLONING AND SEQUENCING OF THE GENE ENCODING TPI ANTIGEN FROM CHINESE STRAIN OF SCHISTOSOMA JAPONICUM[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 1997, 15(6): 349-352.

[1]	王丹, 贺志权, 刘颖, 刘灵芝, 陈慧慧, 蒋甜甜, 纪鹏慧, 钱丹, 杨成运, 张红卫. 1例蓝氏贾第鞭毛虫感染者的虫种分子鉴定及基因溯源[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(3): 380-383.
[2]	于铭川, 杨忠委, 王华然, 师丹阳, 周树青, 尹静, 孙树民. 基于LAMP微流控芯片检测蓝氏贾第鞭毛虫方法的建立[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(3): 402-405.
[3]	李润花, 关丽, 殷国荣. 刚地弓形虫滑行相关蛋白45的克隆、表达与免疫反应性检测[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(5): 563-567.
[4]	赵正虎, 钱胜南, 万静宜, 唐子茹, 沈双. 刚地弓形虫磷酸丙糖异构酶多克隆抗体的制备及鉴定分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(3): 311-316.
[5]	王楠1, 滕飞翔1, 俞黎黎1, 杨李1, 张承伯1, 周鹰1,2, 崔玉宝1,2*. 粉尘螨变应原Der f 8全长基因克隆及表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(4): 8-351-356.
[6]	颜凤，吕清巧，程金芝，牟小会，翟慧，杨迅，商正玲，吴家红. 埃及伊蚊yellow*基因家族的鉴别和表达谱分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2016, 34(1): 1-1-10.
[7]	原飞1，刘转转2，张波2，曹建平3，郑葵阳2 *，王德广1. 刚地弓形虫抑制蛋白的原核表达与免疫反应性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2015, 33(1): 4-21-24.
[8]	顾有方，王立克，李阳，李磊，褚星海，辛迪薇，马成祥，徐文汉，吴胜兵，汪贺银，李文超*. 安徽省部分地区山羊蓝氏贾第鞭毛虫流行病学调查及基因型分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2014, 32(5): 18-401-403.
[9]	殷丽天1，祝建疆2，李润花3，王海龙2，李雅清2，殷国荣2 *. 刚地弓形虫尿苷磷酸化酶的克隆、表达与免疫反应性检测[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2014, 32(1): 5-24-28.
[10]	李润花1，2，郝海霞2，王海龙2，孟晓丽2，申金雁2，殷国荣2 *. 刚地弓形虫肌动蛋白基因的克隆与表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2013, 31(5): 5-352-356.
[11]	梁怡琳，高攀，柯泽楷，罗新萍，刘志刚. 微小牛蜱磷酸丙糖异构酶基因片段的克隆与原核表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2012, 30(4): 20-331-332.
[12]	殷丽天1, 王芬2, 孟晓丽2, 王海龙2, 刘红丽2, 申金雁2, 殷国荣2 *. 刚地弓形虫磷酸甘油酸变位酶2基因片段克隆、表达及抗原性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2012, 30(2): 2-86-89.
[13]	周洪昌*，戴佳丽，樊宬诚，钟慧雅，沈雨晴. 恶性疟原虫PFC0460w基因片段的克隆与生物信息学分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2012, 30(1): 18-76-77.
[14]	江莉;冯正;胡薇;张耀光. 棘球蚴AgB抗原家族基因的克隆及抗原表位的预测分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2010, 28(5): 10-371.
[15]	谢东方;方政;童海燕;徐邦生;黄为群;方浩;沈勤. 马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆、序列分析及编码产物B细胞表位预测[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2009, 27(3): 20-228.