中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2019, Vol. 37 ›› Issue (5): 571-576.doi: 10.12140/j.issn.1000-7423.2019.05.011
田春艳1(), 陈蓓2,3, 卢帅2,3, 文丽梅2,3, 赵军2,3, 郑璇1, 库尔班泥沙·阿马洪1, 高旖1, 王建华2,3,*(
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Chun-yan TIAN1(), Bei CHEN2,3, Shuai LU2,3, Li-mei WEN2,3, Jun ZHAO2,3, Xuan ZHENG1, Kuerbannisha·AMAHONG1, Yi GAO1, Jian-hua WANG2,3,*(
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摘要:
目的 研究阿霉素(Dox)对细粒棘球蚴原头节的体外抑制作用。方法 4 800个原头节随机分为空白对照组、1% DMSO组、Dox组(25、50、100、200、400、600 μmol/L),每组200个原头节,设3个平行组,体外干预24 h。伊红拒染实验检测Dox干预后原头节活力,统计存活率。扫描电镜观察Dox干预后原头节表面超微结构变化。单细胞凝胶电泳实验检测Dox干预后原头节DNA损伤程度。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Dox干预后DNA损伤相关基因共济失调毛细血管扩张症突变激酶(ATM)、p53、DNA拓扑异构酶2A(Topo2a)的mRNA表达水平。结果 伊红拒染实验结果显示,空白对照组、1% DMSO组、25、50、100、200、400、600 μmol/L Dox组细粒棘球蚴原头节的存活率分别为(99.0 ± 0.5)%、(98.6 ± 0.3)%、(96.0 ± 1.4)%、(80.3 ± 4.8)%、(75.6 ± 6.2)%、(53.2 ± 3.0)%、(26.4 ± 8.1)%和0,IC50为(267.9 ± 7.1)μmol/L。与空白对照组相比,1% DMSO组、25 μmol/L Dox组原头节存活率差异无统计学意义(P > 0.05),50、100、200、400、600 μmol/L Dox组原头节存活率差异有统计学意义(P < 0.01)。扫描电镜结果显示,空白对照组、1% DMSO组原头节表面光滑,头节呈球形或椭圆形,顶突完整,微毛清晰可见;400 μmol/L Dox组原头节吸盘变形,体部塌陷严重,顶突轻微变形,微毛明显脱落,虫体表层发生皱缩。单细胞凝胶电泳实验结果显示,100 μmol/L Dox组原头节出现拖尾现象,彗星尾距(OTM)为16.6 ± 1.7,与空白对照组(0.1 ± 0.0)相比,差异有统计学意义(P < 0.01)。qRT-PCR结果显示,1% DMSO组原头节ATM、p53和Topo2a mRNA相对表达量分别为1.0 ± 0.1、1.1 ± 0.1、1.3 ± 0.9,与空白对照组(1.0 ± 0.1、1.0 ± 0.4、1.0 ± 0.1)相比,差异无统计学意义(P > 0.05)。100 μmol/L Dox组原头节ATM、p53和Topo2a mRNA相对表达量分别为38.6 ± 3.5、10.0 ± 2.5、54.0 ± 0.8,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P < 0.05)。结论 Dox具有体外抗细粒棘球蚴原头节作用,可引起虫体DNA损伤,可能与ATM、p53、Topo2a的mRNA相对表达量变化相关。
中图分类号: