中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2009, Vol. 27 ›› Issue (3): 1-194.
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鲁飞, 朱荫昌*, 戴洋, 王晓婷, 唐建霞, 张纯
LU Fei, ZHU Yin-chang*, DAI Yang, WANG Xiao-ting, TANG Jian-xia, ZHANG Chun
摘要: 目的 研究日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶基因(TPI基因)密码子优化后的DNA疫苗增强免疫保护作用的效果。 方法 60只BALB/c雌性小鼠随机均分为A(pcDNA3.1空质粒对照组)、B(pcDNA3.1-TPI组)、C (pcDNA3.1-TPI-mHSP70组)、D(pcDNA3.1-TPI.opt组)、E(pcDNA3.1-TPI.opt-mHSP70组)等5组。每鼠肌肉注射相应的纯化质粒DNA 100 μg,每隔3周免疫1次,共3次。末次免疫后4周,每鼠经腹部皮肤攻击感染日本血吸虫尾蚴(40±1)条,42 d后剖杀,计数成虫及肝脏虫卵数。首次免疫前2 d及感染前2 d经尾静脉采血,检测IgG及IgG1、IgG2a的水平。攻击感染前2 d取脾脏,制备单个脾细胞,用流式细胞仪检测白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-5、γ干扰素(IFN-γ)及肿瘤坏死因子(TNF)的水平。 结果 B、C、D、E组小鼠血清均检测到特异性IgG及IgG2a与IgG1抗体,IgG2a/IgG1的比值分别为1.73、2.06、2.44、3.09。D、E组的IL-2、IFN-γ、TNF含量较B、C组均有不同程度地升高。D、E组减虫率分别为36.03%、39.03%,减卵率分别为41.71%、46.85%,均显著高于B、C组(P<0.01)。 结论 TPI基因密码子优化后的DNA疫苗相对于未优化TPI DNA疫苗能诱导小鼠产生较高的免疫保护作用,且诱导宿主产生较强的,及以Th1为主的免疫应答。