中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2000, Vol. 18 ›› Issue (5): 5-276.
黄天谊1;王小力1;黎学铭2;黄亚铭2;曾风秀1;车莹1;张思淼1;付伟忠2;张再兴3;张国森3;蔡贤铮4;王善青4;王光泽4
HUANG Tian yi 1;WANG Xiao li 1;LI Xue ming 2;HUANG Ya ming 2;ZENG Feng xiu 1;CHE Ying 1;ZHANG Si miao 1;FU Wei zhong 2;ZHANG Zai xing 3;ZHANG Guo seng 3 CAI Xian zheng 4;WANG Shan qing 4;WANG Guang ze 4
摘要: [目的 ]建立间日疟原虫环子孢子蛋白 (CSP)基因分型法用于地理株的鉴定。[方法 ]Chelex 10 0离子交换法提取滤纸血样中的微量DNA ;套式PCR和等位特异PCR技术、琼脂糖电泳分析法、斑点印迹和Southern印迹 探针杂交技术分别用于判别性片段的扩增、分析和鉴定。[结果 ]用本文描述的套式 等位 特异PCR分型法 ,从一小片滤纸血样提取的微量DNA中 ,扩增出不同长度范围的 3种判别性片段 :6 5 0~ 770bp(间日疟种特异 ) ,15 0~2 30bp(温带族特异 ) ,5 88~ 6 15bp(PV 2型特异 )。用本法检测参考虫株出现的带型和长度与设计的靶序列完全吻合。检测 5 9份国内感染血样 ,42份鉴定为温带族虫株 ,15份为热带族虫株 ,2份为PV 2型虫株。 4份境外感染血样中 ,2个巴基斯坦分离株均为温带族 ,缅甸和老挝各 1株均为热带族虫株。 [结论 ]①本法能同时区分PV 1型 ,PV 2型以及温带族与热带族虫株 ,且较现有 (PCR 探针杂交 )法更为简便、快捷 ;②现场血样初步检测结果显示 :我国存在PV 1型 (温带族与热带族 )虫株和PV 2型虫株 ,也可能存在温带族东南亚组虫株。