巢式PCR技术在输入性卵形疟诊断中的应用研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志

巢式PCR技术在输入性卵形疟诊断中的应用研究

黄炳成，徐超，李瑾，肖婷，尹昆，刘功振，王卫艳，赵桂华，魏艳彬，王用斌，赵长磊，魏庆宽*

山东省医学科学院，山东省寄生虫病防治研究所，山东省疟疾诊断参比实验室，济宁 272033

出版日期:2015-02-28 发布日期:2015-05-04

pplication of Nested PCR in the Diagnosis of Imported Plasmodium Ovale Infection

HUANG Bing-cheng，XU Chao，LI Jin，XIAO Ting，YIN Kun，LIU Gong-zhen，WANG Wei-yan，ZHAO Gui-hua，WEI Yan-bin，WANG Yong-bin，ZHAO Chang-lei，WEI Qing-kuan*

Shandong Academy of Medical Sciences；Shandong Institute of Parasitic Diseases；Shandong Provincial Reference Laboratory for Malaria Diagnosis，Jining 272033，China

Online:2015-02-28 Published:2015-05-04

摘要/Abstract

摘要：

目的应用巢式PCR扩增小亚单位核糖体核糖核酸（18S rRNA）基因确诊卵形疟原虫感染。方法　采集2012-2013年山东省疟疾患者全血和滤纸血样，吉氏染色镜检观察血膜疟原虫形态并鉴定虫种。提取血样中DNA，根据疟原虫18S rRNA基因以属和种特异性引物进行巢式PCR扩增，筛查卵形疟阳性标本并进行测序验证。结果 2012和2013年山东省共筛查到7例输入性卵形疟原虫感染病例。巢式PCR扩增7份血样均在800 bp处出现卵形疟原虫特异性单一条带，Blast比对表明产物序列与GenBank卵形疟参考序列一致。结论经巢式PCR方法确诊了2012和2013年山东省7例输入性卵形疟病例。

关键词: 卵形疟原虫, 小亚单位核糖体核糖核酸, 巢式PCR, 输入性疟疾

Abstract:

Objective To identity Plasmodium ovale infection by 18S rRNA gene nested PCR. Methods Whole blood and filter paper blood samples of malaria patients in Shandong Province were collected during 2012-2013. The parasites were observed under a microscope with Giemsa staining. The genome DNA of blood samples were extracted as PCR templates. Genus- and species-specific primers were designed according to the Plasmodium 18S rRNA gene sequences. Plasmodium ovale-positive specimens were identified by nested PCR as well as verified by sequencing. Results There were 7 imported cases of P. ovale infection in the province during 2012-2013. Nested PCR results showed that the P. ovale specific band （800 bp） was amplified in all the 7 specimens. Blast results indicated that the PCR products were consistent with the Plasmodium ovale reference sequence in GenBank. Conclusion Seven imported cases of ovale malaria in Shandong Province in 2012-2013 are confirmed by nested PCR.

Key words: Plasmodium ovale, Small subunit ribosome RNA, Nested PCR, Imported malaria

黄炳成，徐超，李瑾，肖婷，尹昆，刘功振，王卫艳，赵桂华，魏艳彬，王用斌，赵长磊，魏庆宽* . 巢式PCR技术在输入性卵形疟诊断中的应用研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志.

HUANG Bing-cheng，XU Chao，LI Jin，XIAO Ting，YIN Kun，LIU Gong-zhen，WANG Wei-yan，ZHAO Gui-hua，WEI Yan-bin，WANG Yong-bin，ZHAO Chang-lei，WEI Qing-kuan*. pplication of Nested PCR in the Diagnosis of Imported Plasmodium Ovale Infection[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases.

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