日本血吸虫童虫文库免疫筛选及其高丰度表达膜蛋白初步鉴定

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2006, Vol. 24 ›› Issue (2): 6-110.

日本血吸虫童虫文库免疫筛选及其高丰度表达膜蛋白初步鉴定

朱绍春1;赵志荣1;雷黎2;张林杰2;沈际佳1,2

安徽医科大学 1病原生物学教研室;2免疫学教研室，合肥 230032

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2006-04-30 发布日期:2006-04-30
通讯作者: 沈际佳

Immunoscreening of Schistosomulum cDNA Library of Schistosomajaponicum and Preliminary Identification of Membrane-AssociatedProtein Abundant in Tegument

ZHU Shao-chun1;ZHAO Zhi-rong1;LEI Li2;ZHANG Lin-jie2;SHEN Ji-jia1,2

1 Department of Microbiology and Parasitology， Anhui Medical University， Hefei 230032， China; 2 Department of Immunology, Anhui Medical University， Hefei 230032， China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2006-04-30 Published:2006-04-30
Contact: SHEN Ji-jia1

摘要/Abstract

摘要： 目的获得新的可能具有诊断意义的血吸虫蛋白分子并对其鉴定。方法免疫学方法筛选日本血吸虫童虫cDNA文库，对获得的阳性克隆进行测序分析，设计引物体外扩增目的蛋白基因，将其亚克隆入原核表达载体pET28a中，并转化大肠埃希菌BL21，进行诱导表达，最后用Western blotting鉴定。结果获得34个阳性克隆，选择其中24个进行测序，其中13个是日本血吸虫相对分子质量（Mr）为22 600膜相关蛋白（Sj22.6）基因。Sj22.6基因在体外被成功扩增，并被亚克隆入pET28a中进行表达。Western Blotting 结果显示，菌体表达的条带可以被感染兔血清以及血吸虫患者血清识别。结论 Sj22.6膜相关蛋白基因在童虫cDNA文库中可以被高频率筛出，融合蛋白Sj22.6成功地在BL21中表达并具有免疫反应性。

关键词: 日本血吸虫, 童虫, cDNA文库, 免疫筛选, Sj22.6

Abstract: Objective To obtain genes encoding the novel molecules for diagnosis of schistosomiasis. Methods Juvenile S. japonicum cDNA library was immunoscreened to obtain positive clones. By DNA sequencing and sequence analysis， the target gene was amplified by PCR and subcloned into prokaryotic plasmid pET28a. The recombinant plasmid was transformed into E. coli BL21 followed by expression of the protein induced by IPTG. The protein was identified by Western blotting. Results 34 positive clones were obtained， 24 of which were chosen to be sequenced， 13 of which were Sj22600 gene. The protein were recognized with sera of infected rabbits and patients with acute and chronic schistosomiasis by Western blotting. Conclusion The gene coding for Sj22600 membrane protein was screened with high frequency in the cDNA library. The E. coli BL21 transformed with the recombinant plasmid can express the fusion protein，which shows immunoactivity.

Key words: Schistosoma japonicum, Schistosomulum, cDNA library, Immunoscreening, Sj22.6

朱绍春;赵志荣;雷黎;张林杰;沈际佳;. 日本血吸虫童虫文库免疫筛选及其高丰度表达膜蛋白初步鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2006, 24(2): 6-110.

ZHUShao-chun;ZHAOZhi-rong;LEILi;ZHANGLin-jie;SHENJi-jia;. Immunoscreening of Schistosomulum cDNA Library of Schistosomajaponicum and Preliminary Identification of Membrane-AssociatedProtein Abundant in Tegument[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2006, 24(2): 6-110.

[1]	谭潇, 朱琪, 刘众齐, 李佳, 彭丁晋. 日本血吸虫Sj26gst mRNA候选疫苗的免疫原性研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(5): 546-551.
[2]	刘华熳, Bikash Giri, 方传涛, 郑亚萌, 吴慧欣, 曾敏浩, 李姗, 程国锋. 日本血吸虫m6A修饰的性别相关circRNA鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(5): 552-558.
[3]	兰炜明, 徐慧, 徐银, 邱婷婷, 谢曙英, 邓凤林, 胡绍良, 刘欢, 郭家钢, 曾小军. 荧光定量PCR用于日本血吸虫感染高危环境早期预警的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(4): 502-505.
[4]	王晓玲, 张卫, 易存, 陈祥宇, 杨文彬, 徐斌, 胡薇. SjGPR89蛋白对日本血吸虫生长发育的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(6): 701-707.
[5]	陈果, 朱丹丹, 段义农. 免疫调节蛋白B7家族在日本血吸虫感染免疫调节中的研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(6): 774-779.
[6]	严晓岚, 闻礼永, 熊彦红, 郑彬, 张剑锋, 汪天平, 俞丽玲, 许国章, 林丹丹, 周晓农. 《日本血吸虫抗体检测标准酶联免疫吸附试验法》解读[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(6): 798-800.
[7]	汤宪时, 季文翔, 熊春蓉, 周永华, 许永良, 仝德胜. 晚期日本血吸虫感染小鼠焦虑样行为学研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 622-628.
[8]	梁乐, 张璟, 沈玉娟, 胡媛, 曹建平. 环鸟苷酸腺苷酸促日本血吸虫感染小鼠肝虫卵肉芽肿形成及纤维化[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(4): 441-445.
[9]	章孝成, 高元, 胡媛, 曹建平. 日本血吸虫感染小鼠脾多核型髓源抑制细胞变化的初步研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(3): 330-336.
[10]	高元, 章孝成, 胡媛, 曹建平. 自然杀伤细胞抑制血吸虫病肝纤维化作用的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(2): 168-174.
[11]	洪炀, 林矫矫. 日本血吸虫蛋白质组学研究进展[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(6): 725-730.
[12]	黄爱龙, 张蓓, 沈函宇, 陈果, 李静, 朱丹丹, 段义农. 日本血吸虫感染小鼠肝髓样细胞触发受体-1的表达及其功能[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(5): 621-626.
[13]	赵成思, 秦敏, 谭明娟, 缪婷婷, 邵天业, 刘新建, 王勇. 吡喹酮对日本血吸虫急性感染小鼠肾脏功能损伤的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(2): 200-209.
[14]	莫筱瑾, 吴群峰, 冯正, 徐斌, 张颋, 陈绅波, 胡薇. SCAR-PCR技术鉴定日本血吸虫尾蚴性别的应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(6): 777-780.
[15]	王伟, 赵成思, 缪婷婷, 周春雷, 张成诚, 秦敏, 邵天业, 王勇. 吡喹酮治疗对日本血吸虫感染小鼠脾巨噬细胞增殖和炎症反应的抑制作用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(3): 263-270.