猪囊尾蚴抗原与猪白细胞介素-4基因融合DNA疫苗载体的构建

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 1999, Vol. 17 ›› Issue (3): 14-174.

猪囊尾蚴抗原与猪白细胞介素-4基因融合DNA疫苗载体的构建

吴丹,郭瀛军,孙树汉

上海第二军医大学医学遗传学教研室上海 200433

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:1999-06-30 发布日期:1999-06-30

CONSTRUCTION OF DNA VACCINE INCLUDING A CHIMERIC GENE ENCODING CYSTICERCUS CELLULOSAE ANTIGEN AND PORCINE INTERLEUKIN 4

WU Dan;GUO Yingjun;SUN Shuhan

Department of Medical Genetics;Second Military Medical University;Shanghai 200433

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:1999-06-30 Published:1999-06-30

摘要/Abstract

摘要： 　　目的：为增强猪囊尾蚴抗原ｃＣ１的免疫保护作用而构建一表达猪白细胞介素４（ＩＬ４）与ｃＣ１抗原融合蛋白的ＤＮＡ疫苗载体。方法：通过聚合酶链反应（ＰＣＲ），分别扩增猪ＩＬ４ｃＤＮＡ和ｃＣ１ｃＤＮＡ片段并进行融合，获得的嵌合基因ＩＬ４ｃＣ１中含有１０个氨基酸的中间接头序列，同时对其５’ ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。结果：经酶切鉴定，证实有一１．５ｋｂ的片段插入载体，其ＤＮＡ序列分析结果与文献报道和实验设计完全一致。结论：表达猪ＩＬ４与猪囊尾蚴抗原ｃＣ１融合蛋白的ＤＮＡ疫苗载体构建成功。

关键词: 囊尾蚴病, 白细胞介素-4, 基因融合, DNA疫苗

Abstract: 　AIM: To construct a fusion expression vector for DNA vaccine including porcine interleukin 4(IL 4)and antigen cC1 to enhance the protective immunity of Cysticercus cellulosae antigen cC1. METHODS: The cDNA fragments encoding porcine IL 4 and cC1 were amplified respectively by PCR and then fused.The obtained chimeric gene IL 4cC1 contained a synthetic linker of ten amino acids and the sequence surrounding its 5’ AUG initiatory codon was changed to optimized translational initiation. RESULTS: Identified by restriction enzyme analysis,an insert fragment of 1.5 kb was demonstrated. It had the same sequence as reported and designed by DNA sequencing analysis.CONCLUSION: A fusion expression plasmid containing porcine IL 4 and cC1 was constructed.

Key words: Cyticercosis, interleukin 4, gene fusion, DNA vaccine

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