多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆及序列分析

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2011, Vol. 29 ›› Issue (1): 16-67-70.

多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆及序列分析

李永光1, 2, 李文卉1, 盖文燕1, 姚菊霞1, 曲自刚1, 贾万忠1, Radu Blaga3, 付宝权1 *

1 中国农业科学院兰州兽医研究所，家畜疫病病原生物学国家重点实验室，农业部兽医公共卫生重点开放实验室，甘肃省动物寄生虫病重点实验室，兰州 730046；2 甘肃农业大学动物医学院，兰州 730070；3 罗马尼亚农业与兽医大学兽医学院，克鲁日?鄄纳波卡 400372

出版日期:2011-02-28 发布日期:2012-09-27

Cloning and Sequence Analysis of Thioredoxin Peroxidase Gene from Taenia multiceps

LI Yong-Guang-1, 2 , LI Wen-Hui-1, GAI Wen-Yan-1, TAO Ju-Xia-1, QU Zi-Gang-1, GU Mo-Zhong-1, Radu Blaga3, FU Bao-Quan-1 *

1 Key Laboratory of Animal Parasitology of Gansu Province；Key Laboratory of Veterinary Public Health of the Ministry of Agriculture；State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology；Lanzhou Veterinary Research Institute，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Lanzhou 730046，China；2 College of Veterinary Medicine，Gansu Agricultural University，Lanzhou 730070，China；3 Faculty of Veterinary Medicine，University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine，Cluj-Napoca 400372，Romania

Online:2011-02-28 Published:2012-09-27

摘要/Abstract

摘要： 从自然感染的羊脑内采集脑多头蚴原头节，提取总RNA。根据亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列设计特异引物，采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶（TmTPx）基因。PCR产物连接到pMD18-T载体构建重组质粒pMD-TmTPx，转化大肠埃希菌DH5α后筛选阳性克隆，经限制性酶切及测序鉴定后进行序列分析。扩增获得大小为614 bp的TmTPx基因cDNA，该基因的完整开放阅读框架（ORF， 591 bp）编码196个氨基酸，编码蛋白的相对分子质量为M_r21 690，等电点为7.61。生物信息学分析结果表明TmTPx具有一个典型的2-Cys Prx保守功能结构域。绦虫已知TPx的分子进化分析发现，多头带绦虫与亚洲牛带绦虫的亲缘关系最近，与猪带绦虫和肥头绦虫的亲缘关系次之，与细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的亲缘关系最远。

关键词: 多头带绦虫, 脑多头蚴, 硫氧还蛋白过氧化物酶, 克隆, 序列分析

Abstract: Protoscoleces of Taenia multiceps were collected from the naturally infected sheep and total RNA was extracted. Specific primers were designed according to TaHc2-D11 mRNA sequence and T. multiceps thioredoxin peroxidase gene （TmTPx） was amplified by RT-PCR. PCR products were ligated into pMD18-T vector and transformed to E. coli DH5α. The recombinant plasmids were identified by restriction digestion and sequencing. A 614 bp cDNA was amplified. The TmTPx open reading frame （591 bp） encoded a 196-amino acid protein with M_r21 690, pI 7.61. Bioinformatics analysis indicated that TmTPx had a typical 2-Cys Prx conserved domain. Phylogenetic tree revealed that T. multiceps had the closest relationship to T. asiatica， followed by T. solium and T. crassiceps， E. granulosus and E. multilocularis.

李永光1, 2, 李文卉1, 盖文燕1, 姚菊霞1, 曲自刚1, 贾万忠1, Radu Blaga3, 付宝权1 *. 多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆及序列分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2011, 29(1): 16-67-70.

LI Yong-Guang-1, 2 , LI Wen-Hui-1, GAI Wen-Yan-1, TAO Ju-Xia-1, QU Zi-Gang-1, GU Mo-Zhong-1, Radu Blaga3, FU Bao-Quan-1 *. Cloning and Sequence Analysis of Thioredoxin Peroxidase Gene from Taenia multiceps[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2011, 29(1): 16-67-70.

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