多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆及序列分析

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2011, Vol. 29 ›› Issue (1): 16-67-70.

多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆及序列分析

李永光1, 2, 李文卉1, 盖文燕1, 姚菊霞1, 曲自刚1, 贾万忠1, Radu Blaga3, 付宝权1 *

1 中国农业科学院兰州兽医研究所，家畜疫病病原生物学国家重点实验室，农业部兽医公共卫生重点开放实验室，甘肃省动物寄生虫病重点实验室，兰州 730046；2 甘肃农业大学动物医学院，兰州 730070；3 罗马尼亚农业与兽医大学兽医学院，克鲁日?鄄纳波卡 400372

出版日期:2011-02-28 发布日期:2012-09-27

Cloning and Sequence Analysis of Thioredoxin Peroxidase Gene from Taenia multiceps

LI Yong-Guang-1, 2 , LI Wen-Hui-1, GAI Wen-Yan-1, TAO Ju-Xia-1, QU Zi-Gang-1, GU Mo-Zhong-1, Radu Blaga3, FU Bao-Quan-1 *

1 Key Laboratory of Animal Parasitology of Gansu Province；Key Laboratory of Veterinary Public Health of the Ministry of Agriculture；State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology；Lanzhou Veterinary Research Institute，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Lanzhou 730046，China；2 College of Veterinary Medicine，Gansu Agricultural University，Lanzhou 730070，China；3 Faculty of Veterinary Medicine，University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine，Cluj-Napoca 400372，Romania

Online:2011-02-28 Published:2012-09-27

摘要/Abstract

摘要： 从自然感染的羊脑内采集脑多头蚴原头节，提取总RNA。根据亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列设计特异引物，采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶（TmTPx）基因。PCR产物连接到pMD18-T载体构建重组质粒pMD-TmTPx，转化大肠埃希菌DH5α后筛选阳性克隆，经限制性酶切及测序鉴定后进行序列分析。扩增获得大小为614 bp的TmTPx基因cDNA，该基因的完整开放阅读框架（ORF， 591 bp）编码196个氨基酸，编码蛋白的相对分子质量为M_r21 690，等电点为7.61。生物信息学分析结果表明TmTPx具有一个典型的2-Cys Prx保守功能结构域。绦虫已知TPx的分子进化分析发现，多头带绦虫与亚洲牛带绦虫的亲缘关系最近，与猪带绦虫和肥头绦虫的亲缘关系次之，与细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的亲缘关系最远。

关键词: 多头带绦虫, 脑多头蚴, 硫氧还蛋白过氧化物酶, 克隆, 序列分析

Abstract: Protoscoleces of Taenia multiceps were collected from the naturally infected sheep and total RNA was extracted. Specific primers were designed according to TaHc2-D11 mRNA sequence and T. multiceps thioredoxin peroxidase gene （TmTPx） was amplified by RT-PCR. PCR products were ligated into pMD18-T vector and transformed to E. coli DH5α. The recombinant plasmids were identified by restriction digestion and sequencing. A 614 bp cDNA was amplified. The TmTPx open reading frame （591 bp） encoded a 196-amino acid protein with M_r21 690, pI 7.61. Bioinformatics analysis indicated that TmTPx had a typical 2-Cys Prx conserved domain. Phylogenetic tree revealed that T. multiceps had the closest relationship to T. asiatica， followed by T. solium and T. crassiceps， E. granulosus and E. multilocularis.

李永光1, 2, 李文卉1, 盖文燕1, 姚菊霞1, 曲自刚1, 贾万忠1, Radu Blaga3, 付宝权1 *. 多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆及序列分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2011, 29(1): 16-67-70.

LI Yong-Guang-1, 2 , LI Wen-Hui-1, GAI Wen-Yan-1, TAO Ju-Xia-1, QU Zi-Gang-1, GU Mo-Zhong-1, Radu Blaga3, FU Bao-Quan-1 *. Cloning and Sequence Analysis of Thioredoxin Peroxidase Gene from Taenia multiceps[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2011, 29(1): 16-67-70.

[1]	叶井明, 何威, 刘慧媛, 鱼潇, 罗波, 刘美辰, 周必英. 猪囊尾蚴排泄分泌抗原TPx对仔猪树突状细胞活化的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(3): 286-293.
[2]	李奔福, 王正青, 徐倩, 字金荣, 严信留, 彭佳, 李建雄, 蔡璇, 吴方伟, 杨亚明. 云南省细粒棘球绦虫线粒体co1和nd1基因序列分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(3): 306-311.
[3]	邹伟浩, 吴蔚玲, 廖远鹏, 陈敏, 彭鸿娟. 刚地弓形虫抗缓殖子期抗原1单克隆抗体的制备与应用[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 587-593.
[4]	刘雅芳, 陈彬, 芦新焱, 李光华, 杜春红, 姜丹丹, 杨兴. 云南微小扇头蜱线粒体基因组全序列测定与分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2022, 40(5): 677-681.
[5]	周岩, 陈韶红, 李浩, 程娜, 洪加林, 许学年. 卫氏并殖吸虫TPx基因的克隆、表达和免疫学诊断价值[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(1): 20-26.
[6]	李润花, 关丽, 殷国荣. 刚地弓形虫滑行相关蛋白45的克隆、表达与免疫反应性检测[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(5): 563-567.
[7]	杨瑞, 熊乙丁, 郭珊珊, 廖业, 夏嫱, 郭锦锦, 杜联峰. 前纤维蛋白多克隆抗体对刚地弓形虫在小鼠胚胎成纤维细胞中增殖的影响[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(4): 437-443.
[8]	赵正虎, 钱胜南, 万静宜, 唐子茹, 沈双. 刚地弓形虫磷酸丙糖异构酶多克隆抗体的制备及鉴定分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(3): 311-316.
[9]	袁义雪, 郑国侠, 王丹丹, 专行, 杜萌, 王云华. 蓝氏贾第鞭毛虫核苷二磷酸激酶基因的克隆与表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(2): 190-193.
[10]	周成艳, 马君, 刘伟, 徐前明, 朱兴全. 印度华首线虫核糖体和线粒体基因序列多态性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(1): 81-86.
[11]	袁义雪1，郑国侠2，王丹丹1，专行1，杜萌1，王云华1*. 蓝氏贾第鞭毛虫核苷二磷酸激酶基因的克隆与表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2018, 36(2): 190-192.
[12]	刘秀凤, 孙嘉慧, 徐斌, 陈军虎, 胡薇. 田鼠巴贝虫候选诊断抗原的表达和评价[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(6): 549-553.
[13]	杨慧, 赵殷奇, 李子华, 赵嘉庆, 王浩, 王娅娜, 朱明星, 赵巍. 细粒棘球绦虫原头节抗原分子Eg-08002的克隆、表达及免疫反应性分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(6): 559-562.
[14]	辛奇, 景涛*, 宋晓霞, 高海军, 孙旭东, 吕薇, Nabil Pervaiz, 鲁俊. 细粒棘球绦虫转醛醇酶基因的克隆、表达及其潜在免疫诊断价值的研究[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(4): 5-333-341.
[15]	王楠1, 滕飞翔1, 俞黎黎1, 杨李1, 张承伯1, 周鹰1,2, 崔玉宝1,2*. 粉尘螨变应原Der f 8全长基因克隆及表达[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017, 35(4): 8-351-356.