中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2007, Vol. 25 ›› Issue (2): 14-145.
张红梅;诸葛洪祥;王玉芳;龚唯;陆祥彬;黄利红
ZHANG Hong-mei;ZHUGE Hong-xiang;WANG Yu-fang;Gong wei,
摘要: 目的 研究获取钉螺血淋巴细胞的方法, 观察其形态结构, 研究其免疫等相关功能。 方法 参照外周淋巴器官中淋巴细胞的悬浮收集法, 获取钉螺血淋巴细胞, 经Giemsa染色后显微镜观察其形态。 血淋巴细胞经结晶紫染色后分别计数悬浮法、传统压片法及针刺法获取的血淋巴细胞数, 并进行方差分析和Dunnett?鄄t检验。取冻融的血淋巴细胞上清进行免疫沉淀、抑菌、吞噬杀菌实验。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析血淋巴细胞蛋白组份相对分子质量(Mr)。 结果 钉螺血淋巴细胞分为圆形有丝状伪足、嗜酸性圆形无丝状伪足、嗜碱性圆形无丝状伪足和梭形细胞4种形态, 平均直径依次约为 10.93、6.13、6.08及11.06 μm, 各约占细胞总数的 50%、 30%、 5% 及15%。每只钉螺悬浮法、传统压片法及针刺法获取的血淋巴细胞均数分别为1.50、0.66及0.03万/ml。悬浮法与传统压片法、与针刺法差异有统计学意义(F=281.47, P<0.01)。进一步Dunnett-t检验, 悬浮法与压片法、与针刺法的血淋巴细胞总体均数差异有统计学意义(t1=15.67, t2=24.50, 两组P<0.01)。血淋巴上清与日本血吸虫虫卵可溶性抗原(SEA)反应出现絮状沉淀, 抑菌试验对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌出现明显的抑菌圈, 血淋巴细胞对白色念珠菌的吞噬率和杀菌率分别为86%和46%。血淋巴细胞蛋白组份相对分子质量约为Mr 112 300、 107 100、 97 200、 73 500、 60 000及12 000。 结论 悬浮法可获得大量钉螺血淋巴细胞, 其具有沉淀SEA、抑制金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌生长, 以及吞噬杀灭白色念珠菌等免疫功能。