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颜凤，吕清巧，程金芝，牟小会，翟慧，杨迅，商正玲，吴家红*
YAN Feng, LV Qing-qiao, CHENG Jin-zhi, MOU Xiao-hui, ZHAI Hui, YANG Xun, SHANG Zheng-ling, WU Jia-hong*
摘要：
目的 筛选并鉴定埃及伊蚊（Aedes aegypti）全基因组中的yellow基因，分析其基因结构、基因进化以及在不同发育时期和不同组织的表达谱。 方法 运用模式昆虫黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）Dm-yellow基因（GenBank登录号为AAF45497）王浆主蛋白（MRJP）结构域氨基酸序列，在埃及伊蚊全基因组数据库中筛选并鉴定埃及伊蚊yellow基因家族，采用ExPASy在线相关工具包分析其理化性质和结构域，运用SignalP4.1预测信号肽，结合使用DNAstar、MAGA6.0和GeneDoc软件包进行同源性比对、保守性分析和系统进化树构建。提取埃及伊蚊总RNA，合成cDNA，利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法对埃及伊蚊不同发育时期（卵、Ⅰ～Ⅳ龄幼虫、蛹以及未吸血雌蚊和雄蚊）和未吸血雌蚊不同组织（唾液腺、中肠、脂肪体和卵巢）的yellow基因表达谱进行相对定量分析。 结果 从埃及伊蚊全基因组中筛选出12条yellow基因（Aa-yellow、Aa-yellow-b、Aa-yellow-c、Aa-yellow-d、Aa-yellow-e、Aa-yellow-f2、Aa-yellow-fb、Aa-yellow-fc、Aa-yellow-g、Aa-yellow-g2、Aa-yellow-h和Aa-yellow-x）。生物信息学分析结果显示，12条yellow基因均具有MRJP结构域和信号肽序列。同源性比对结果显示，埃及伊蚊yellow基因家族成员间同源性较低，为15%~49%；但其保守域间同源性较高，可达60%。系统进化树分析结果显示，12个YELLOW蛋白分为5个亚家族，其中11个在黑腹果蝇中均有直系同源蛋白存在。qRT-PCR结果显示，Aa-yellow-d和Aa-yellow-x在雄蚊中高表达（P<0.01或P<0.05），相对表达量分别为0.018 9和0.023 5；Aa-yellow-fc在雌蚊和唾液腺中特异高表达（P<0.01），相对表达量分别为0.024 8和0.034 9；Aa-yellow-f2在Ⅱ龄幼虫中特异高表达（P<0.01），相对表达量为0.093 4；Aa-yellow、Aa-yellow-e和Aa-yellow-fb在Ⅲ龄幼虫中特异高表达（P<0.01），相对表达量分别为0.562 1、0.004 4和0.008 4；Aa-yellow、Aa-yellow-e、Aa-yellow-f2、Aa-yellow-fb、Aa-yellow-h和Aa-yellow-x等6条基因在卵巢中高表达（P<0.01或P<0.05），相对表达量分别为0.569 4、0.027 0、0.006 5、0.001 0、0.084 8和0.015 1；除Aa-yellow-c（0.004 0）和Aa-yellow-x（0.007 4）外，其余基因几乎不在中肠表达。 结论 在埃及伊蚊基因组中获得的12条yellow基因同源性较低，且在不同发育时期和不同组织中表达有差异。
