中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2017, Vol. 35 ›› Issue (2): 110-114.
杨小迪1, 李徽徽1,2, 陶志勇1, 方强1, 程洋3, 徐岚松1, 薛仁敏1, 陈勇1, 夏惠1, 张慧1, 姜辉1, 刘涛1, 彭琨1, 陈兴智1,*()
Xiao-di YANG1, Hui-hui LI1,2, Zhi-yong TAO1, Qiang FANG1, Yang CHENG3, Lan-song XU1, Ren-min XUE1, Yong CHEN1, Hui XIA1, Hui ZHANG1, Hui JIANG1, Tao LIU1, Kun PENG1, Xing-zhi CHEN1,*()
摘要:
目的 观察两种蠕虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin)体外对小鼠腹腔渗出细胞(PEC)一氧化氮(NO)的产生及细胞因子分泌的影响。方法 无痛处死BALB/c小鼠10只,收集腹腔内液体,制备渗出细胞(PEC),主要为巨噬细胞。将源自旋毛虫(Trichinella spiralis)及广州管圆线虫(Angiostrongylus cantonensis)的cystatin(Tscystatin, Accystatin)与脂多糖(LPS)刺激的小鼠PEC共孵育,实验分为RPMI组、LPS组、Accystatin + LPS组和Tscystatin + LPS组,除RPMI组外,其余3组均提前2 h用LPS(2 μg/ml)刺激贴壁细胞制备炎症模型,Accystatin + LPS组和Tscystatin + LPS组分别用2 μg/ml Accystatin或Tscystatin与LPS刺激后的细胞共孵育,每组6孔,培养24 h后,收集上清,用ELISA和硝酸还原酶法检测上清中α肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-10等细胞因子和NO的水平。采用SPSS11.5统计学软件处理实验数据。结果 ELISA检测结果显示:Accystatin + LPS组细胞上清中促炎因子TNF-α和IL-6分别为(507.50 ± 66.32)和(1 440.49 ± 77.25)pg/ml,较LPS组的(454.15 ± 53.11)和(1 016.2 ± 115.10)pg/ml明显升高(P < 0.05)。Tscystatin + LPS组分别为(296.35 ± 55.30)和(793.54 ± 86.61)pg/ml,较LPS组和Accystatin + LPS组明显降低(P < 0.05)。RPMI组和LPS组的IL-10分别为(38.80 ± 6.71)和(53.66 ± 7.72)pg/ml,差异无统计学意义(P > 0.05),Accystatin + LPS组和Tscystatin + LPS组的IL-10分别为(149.74 ± 26.01)和(158.76 ± 19.67)pg/ml,较LPS组均明显升高(P < 0.05)。Accystatin + LPS组和Tscystatin + LPS组NO水平分别为(12.54 ± 2.12)和(7.95 ± 1.40)μmol/L,较LPS组的(20.18 ± 3.99)μmol/L均明显降低(P < 0.05),且Tscystatin + LPS组NO水平低于Accystatin + LPS组(P < 0.05)。结论 旋毛虫和广州管圆线虫的cystatin均可抑制小鼠腹腔渗出细胞NO释放、上调IL-10的水平,Accystatin明显促进TNF-α及IL-6的分泌,Tscystatin则明显抑制两种细胞因子的水平。
中图分类号: