杨小迪1，孙希萌2，王旗1，崔洁1，计永胜3，薛洪宝4，胡守锋1，苏胖胖1，李江艳1，孟令文1，乔继琛1，丁忆晗1，宋迪1，吴琦1，方强1，陈兴智1*
YANG Xiao-di1, SUN Xi-meng2, WANG Qi1, CUI Jie1, JI Yong-sheng3, XUE Hong-bao4, HU Shou-feng1, SU Pang-pang1, LI Jiang-yan1, MENG Ling-wen1, QIAO Ji-chen1, DING Yi-han1, SONG Di1, WU Qi1, FANG Qiang1, CHEN Xing-zhi1*
摘要： 目的 观察金丝桃素对体外培养的刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）RH株速殖子的杀伤作用，探讨金丝桃素抗弓形虫的效果。 方法 将生理盐水（A组）和终浓度为5 μg/ml（B组）、50 μg/ml（C组）、500 μg/ml（D组）的金丝桃素分别加入含弓形虫速殖子1×106个/孔的24孔培养板中，于2、4、6 h后收集虫体，台盼蓝染色检测速殖子着色率，吉氏染色观察速殖子形态和结构变化，透射电镜观察速殖子超微结构的变化，流式细胞仪检测相同处理的携带黄色荧光蛋白的弓形虫的存活情况。 结果 弓形虫速殖子经不同浓度金丝桃素作用2 h后，B组、C组和D组虫体的台盼蓝着色率分别为（11.0±3.6）%、（25.0±6.3）%和（40.0±2.7）%，D组着色率高于C组和B组（P<0.01），3组均高于A组（6.0±3.0）%，但B组和A组间差异无统计学意义（P>0.05）。作用4 h后，D组着色率为（97.0±2.0）%，高于C组（30.0±7.2）%、B组（20. 0±3.0）%和A组（10.0±1.0）%（P<0.01）；作用6 h后，D组着色率为（98.0±1.7）%，亦高于C组（42.7±5.5）%、B组（34.0±6.6）%和A组（19.3±4.9）%，两两比较，各组间差异均有统计学意义（P<0.01）。吉氏染色观察发现，随时间的延长和剂量的增高，虫体两端逐渐变圆、肿胀、坏死。透射电镜观察结果显示，随金丝桃素作用时间延长，虫体逐渐肿胀，胞膜与基质间出现明显空隙，虫体内空泡增多、变大，胞膜破裂，内部结构溶解。流式细胞仪检测结果表明，弓形虫速殖子存活率在金丝桃素作用后的各时间段内与对照组间差异有统计学意义（P<0.01）；金丝桃素作用2 h后，D组无弓形虫存活，C组弓形虫存活率为（7.9±1.9）%，低于B组（38.1±5.5）%和A组（81.8±6.0）%（P<0.01）；作用4 h后，C组无弓形虫存活；B组在作用4 h和6 h后，弓形虫存活率分别为（14.3±7.9）%和（1.4±1.8）%，均低于A组的（73.8±11.3）%和（64.1±14.4）%（P<0.01）。 结论 金丝桃素具有较强的体外抗弓形虫速殖子效果，且随剂量增高和作用时间延长抗虫效果更明显。
