一例输入性皮肤利什曼病病原体的鉴定

中国寄生虫学与寄生虫病杂志

一例输入性皮肤利什曼病病原体的鉴定

赖德华1，吴娜1，谢祎婷1，洪晓昆1，陈允甫1，廖力夫2，伦照荣1*

1 中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室, 广州 510275；2 新疆实验动物研究中心，乌鲁木齐 830002

出版日期:2016-06-30 发布日期:2016-10-28

Pathogen Identification in an Imported Case of Cutaneous Leishmaniasis

LAI De-hua1, WU Na1, XIE Yi-ting1, HONG Xiao-kun1, CHEN Yun-fu1, LIAO Li-fu2, LUN Zhao-rong1*

1 State Key Laboratory of Biocontrol, School of Life Sciences, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510275, China；2 The Center for Laboratory Animal Research of Xinjiang, Urumqi 830002, China

Online:2016-06-30 Published:2016-10-28

摘要/Abstract

摘要： 对广州一例未知病原体感染引起的皮肤病患者血样进行免疫学和分子生物学鉴定，以确定其病原体。取静脉血，用Leish rK39 dipstick金标试纸检测利什曼原虫抗体情况。取皮损处组织，75%乙醇固定后，提取基因组DNA。用两对利什曼原虫种特异性引物LITSR-L5.8S和NAGTL1-NAGTL4分别PCR扩增利什曼原虫核糖体DNA内转录间隔区1和N-乙酰氨基葡萄糖苷转移酶的基因片段，扩增产物进行测序和BLAST序列分析。Leish rK39 dipstick金标试纸检测结果呈弱阳性。PCR结果显示，引物LITSR-L5.8S和NAGTL1-NAGTL4分别扩增出约404 bp和1 405 bp的片段，两片段序列与硕大利什曼原虫（Leishmania major）相应序列的相似性均为99.7%。其序列GenBank登录号分别为KU975160和KX150476。确诊该皮肤病患者为输入性皮肤利什曼病病例，病原体为硕大利什曼原虫。

关键词: 皮肤利什曼病, 金标试纸, 分子标记, 硕大利什曼原虫

Abstract: In this study, immune and molecular biological methods were used to identify the pathogen in a blood sample from a patient with dermatosis. Venous blood was collected and tested with Leish rK39 dipsticks. The lesion sample was collected and fixed in 75% ethanol, and DNA was extracted. The internal transcribed spacer 1 of rDNA and N-acetylglucosamine-1-phosphate transferase of Leishmania were amplified with PCR using primers LITSR-L5.8S and NAGTL1s-NAGTL4, respectively. The amplified products were sequenced and analyzed by BLAST. Weakly positive results were obtained for the gold-labeled Leish rK39 dipstick serological test. PCR resulted in products of 404 bp and 1 405 bp with primers LITSR-L5.8S and NAGTL1-NAGTL4, respectively. Both were 99.7% homologous to the corresponding sequence of Leishmania major. The accession number of the two sequences were KU975160 and KX150476. The case of dermatosis is diagnosed as imported cutaneous leishmaniasis and the pathogen is L. major.

Key words: Cutaneous leishmaniasis, Gold-labeled Leish rK39 dipstick, Molecular marker, Leishmania major

赖德华1，吴娜1，谢祎婷1，洪晓昆1，陈允甫1，廖力夫2，伦照荣1*. 一例输入性皮肤利什曼病病原体的鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志.

LAI De-hua1, WU Na1, XIE Yi-ting1, HONG Xiao-kun1, CHEN Yun-fu1, . Pathogen Identification in an Imported Case of Cutaneous Leishmaniasis[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases.

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