粉尘螨过敏原β-己糖胺酶的表达、纯化和生物信息学分析

中国寄生虫学与寄生虫病杂志

粉尘螨过敏原β-己糖胺酶的表达、纯化和生物信息学分析

莫丽华1，刘玉琳2，杨利桃3，范小琴3，刘志刚1，杨平常1 *

1 深圳大学过敏反应与免疫学研究所，深圳 518060；
2 南昌大学医学院免疫学教研室，南昌 330006；
3 深圳大学耳鼻咽喉科研究所，深圳 518020

出版日期:2015-04-30 发布日期:2015-05-04

Expression，Purification and Bioinformatics Analysis of β-hexosaminidase of Dermatophagoides farinae

MO Li-hua1，LIU Yu-lin2，YANG Li-tao3，FAN Xiao-qin3，LIU Zhi-gang1，YANG Ping-chang 1 *

1 Institute of Allergy and Immunology，Shenzhen University，Shenzhen 518060，China；2 Department of Immunology，Medical College of Nanchang University，Nanchang 330006，China；3 Institute of Otolaryngology，Shenzhen University，Shenzhen 518020，China

Online:2015-04-30 Published:2015-05-04

摘要/Abstract

摘要：

合成粉尘螨β-己糖胺酶基因并连接至pET-28a载体，用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达重组β-己糖胺酶蛋白。通过生物信息学软件分析粉尘螨β-己糖胺酶蛋白基本特性。表达菌经诱导后，高效表达出β-己糖胺酶蛋白，SDS-PAGE结果显示表达产物相对分子质量（Mr）约为55 000。粉尘螨β-己糖胺酶基因序列全长1 410 bp，编码469个氨基酸，位于胞外，无信号肽，属亲水性蛋白，其二级结构由14.71%的片层，30.70%的螺旋和54.58%的环组成。

关键词: 粉尘螨, &beta, -己糖胺酶, 原核表达

Abstract:

The DNA fragment encoding β-hexosaminidase was synthesized， and cloned into pET-28a vector. The constructed plasmid pMD18-T-β-hexosaminidase was transformed into E. coli Top10 and followed by expression of the protein induced by IPTG. SDS-PAGE result showed that the relative molecular mass of the recombinant protein was about M_r55 000. The full length of β-hexosaminidase gene was 1 410 bp. Bioinformatics analysis revealed that β-hexosaminidase was composed with 469 amino acid residues with a calculated molecular weight of M_r 55 000， and its secondary structure was composed of strand（14.71%）， helix（30.70%）， and loop（54.58%）. β-hexosaminidase was a hydrophilic protein without signal peptide， and located in the extracellular space.

Key words: Dermatophagoides farinae；&beta, -hexosaminidase；Prokaryotic expression

莫丽华1，刘玉琳2，杨利桃3，范小琴3，刘志刚1，杨平常1 *. 粉尘螨过敏原β-己糖胺酶的表达、纯化和生物信息学分析[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志.

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