中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2013, Vol. 31 ›› Issue (4): 7-280-283.
刘华1 *,李化光2,耿丹丹3,孙黎1,王军2,刘肃2
LIU Hua1 *,LI Hua-guang2,GENG Dan-dan3,SUN Li1,WANG Jun2,LIU Su2
摘要: 目的 研究刚地弓形虫感染对大鼠胸腺的病理损伤和胸腺细胞凋亡的影响。 方法 将7~8周龄Wistar雄性大鼠50只随机分为感染组(40只)和对照组(10只)。感染组腹腔注射弓形虫速殖子5×104/只,对照组注射等量PBS,分别于感染后第3、6、9和12天取感染组10只和对照组2只,麻醉后摘取胸腺。部分胸腺用于常规制片和苏木素-伊红(HE)染色;制备胸腺单细胞样品,流式细胞仪分析细胞周期,计算细胞增殖指数;制备胸腺冰冻切片,经Hoechst 33258细胞核染色,荧光显微镜下观察胸腺细胞的凋亡情况;免疫组化检测胸腺细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达水平。 结果 HE染色结果发现,感染组于大鼠感染后第3天即出现病理学改变,胸腺被膜间隙增宽,皮质和髓质细胞稀疏,可见较多吞噬细胞和淤血;至感染后第6天损伤加重;第12天未见明显改善。感染后第3、6、9和12天胸腺细胞增殖指数分别为(11.15±0.99)%、(6.17±1.02)%、(5.45±0.96)%和(6.63±1.52)%,均显著低于对照组[(13.81±1.18)%](均P<0.01)。细胞核染色结果显示,感染后第3天凋亡细胞增多,第6天凋亡细胞明显增多,第6~12天凋亡细胞数量差异不大。免疫组化结果显示,感染后第3、6、9和12天胸腺组织Bax蛋白阳性细胞灰度值分别为88.21±4.74、64.69±6.82、83.62±5.79和101.09±6.72,均显著低于对照组(128.69±8.95)(均P<0.01),表明感染后大鼠胸腺的Bax蛋白水平均显著增加。大鼠感染弓形虫后胸腺细胞Bcl-2表达无明显变化(P>0.05)。 结论 弓形虫感染可导致中枢免疫器官胸腺的病理损伤、细胞增殖水平下降、凋亡细胞增多,并伴有凋亡蛋白Bax的高表达。