中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ›› 2011, Vol. 29 ›› Issue (2): 2-87-92.
张薇娜1, 张鹏1, 刘淼1, 任翠平1, 黄大可1，2, 沈际佳1*
ZHANG Wei-Na1, ZHANG Feng1, LIU Miao1, LIN Cui-Beng1, HUANG Da-Ge1，2, CHEN Ji-Jia1*
摘要： 目的 研究日本血吸虫Mago nashi蛋白编码基因在虫体生殖器官发育方面的功能。 方法 体外PCR法合成Mago nashi双链RNA（dsRNA），将SjMago nashi基因dsRNA产物和阴性对照lacZ基因dsRNA产物分别电击转染至机械脱尾的日本血吸虫童虫体内，将部分电击转染的童虫作体外培养，在培养后第1、3和5天以TRIzol法同时提取其总RNA和总蛋白。实时荧光定量RT?鄄PCR和蛋白质印迹（Western blotting）分别检测Mago nashi基因和蛋白表达产物。电击转染的童虫注射入6只BALB/c小鼠体内，每鼠约1 000条，6周后取出虫体，盐酸卡红染色，在激光共聚焦显微镜下观察虫体内部各器官形态特征，测量虫体相关指标。 结果 在电击转染后的第1、3和5天，SjMago nashi dsRNA组目的基因的转录水平较阴性对照组分别下降了22%、69%和80%，蛋白质水平较阴性对照组分别下降了12%、39%和56%。激光共聚焦显微镜观察发现，SjMago nashi dsRNA组中的雄虫睾丸内有较多精子，呈泛雄性化表现，而雌虫的卵巢和卵黄腺无明显特征变化。与阴性对照组相比，SjMago nashi dsRNA组的雄虫的体宽、睾丸长和睾丸宽，雌虫的体宽、卵巢长和卵巢宽均明显缩小（P＜0.05）。 结论 SjMago nashi dsRNA可特异性抑制日本血吸虫靶基因及其编码蛋白的表达，SjMago nashi基因为日本血吸虫生殖相关基因，在生殖系统器官的正常发育中起一定作用。
